e. Для обнаружения сахара и маннита образец растворяют в подкисленной воде и добавляют избыток гидрата бария: образуется осадок, состоящий из хинина и сульфата бария. Затем через жидкость пропускают углекислоту, чтобы осадить избыток бария в виде нерастворимого карбоната, жидкость насыщают аммиаком, чтобы выделить хинин, который мог быть растворен заново углекислотой, и смесь фильтруют. Если соль чистая, при выпаривании фильтрата не останется никакого остатка; если эти вещества присутствуют, образуется остаток сахара или маннита.
f. Сульфат хинина неизменно содержит 2 или 3 процента цинхонина, происходящего не от мошеннической примеси, а от неполной очистки соли. Одним из лучших методов определения соответствующих количеств хинина и цинхонина, присутствующих в образце сульфата, является следующий: к одному-двум граммам исследуемой соли добавляют несколько граммов аммиака и эфира (предварительно промытого водой), смесь тщательно взбалтывают, а затем дают ей отстояться. Верхний эфирный раствор содержит весь хинин; цинхонин, который почти полностью нерастворим как в воде, так и в эфире, остается во взвешенном состоянии между слоями двух жидкостей. Затем эфир удаляют с помощью делительной воронки, выпаривают досуха и определяют полученную массу остатка. После этого операцию повторяют, заменяя эфир хлороформом, в котором растворимы как хинин, так и цинхонин. Остаток, образующийся при выпаривании второго раствора, будет тяжелее первого остатка: разница между двумя взвешиваниями дает массу присутствующего цинхонина.
g. Обнаружение присутствия сульфата хинидина основано на разнице в растворимости оксалатов хинина и хинидина. Оксалат хинидина достаточно растворим в холодной воде, чтобы не выпадать в осадок путем обменного разложения при смешивании растворов оксалата аммония и сульфата хинидина. При тех же обстоятельствах хинин осаждается почти полностью. Испытание применяется следующим образом:
Подозрительную соль растворяют в воде, добавляют небольшое избыток оксалата аммония и образующийся осадок отделяют фильтрованием. Если соль чистая, фильтрат едва мутнеет при добавлении аммиака; однако при присутствии сульфата хинидина он будет полностью содержаться в фильтрате, в котором аммиак вызовет обильный осадок.
ИССЛЕДОВАНИЕ ПЯТЕН КРОВИ.
Эта ветвь судебной химии некогда давала весьма ненадежные результаты. Прошло едва ли десять лет с тех пор, как реакции, которые теперь рассматриваются лишь как второстепенные и подтверждающие по своему характеру и далеко не окончательные, были единственными применяемыми: это тесты, основанные на присутствии железа и альбумина в крови. С тех пор в используемых методах был достигнут большой прогресс. Однако не следует понимать так, что рассматриваемый вопрос всегда допускает простое и решительное решение: пятна иногда бывают слишком сильно изменены, чтобы их можно было идентифицировать; но в тех случаях, когда могут быть воспроизведены отличительные реакции крови, истинную природу исследуемых пятен в настоящее время можно определить с достоверностью.
Fig. 21.
Fig. 22.
Недавно введенные тесты состоят в получении небольших характерных кристаллов, называемых кристаллами гемина, и в использовании спектроскопа. Кристаллы гемина (впервые открытые Тейхманом) образуются, когда сухая кровь растворяется в концентрированной уксусной кислоте и раствор выпаривается досуха: они имеют красновато-бурый цвет. Брюкке впервые предложил аналитический метод, основанный на этом свойстве крови, который является одновременно характерным и чувствительным: достаточно растворить ничтожную часть исследуемого вещества (высохшую кровь или остаток, оставшийся после выпаривания жидкости, полученной при обработке пятна, или высохшую кровь холодной водой) в ледяной уксусной кислоте и выпарить раствор досуха, чтобы получить кристаллы гемина, которые легко распознаются с помощью микроскопа с увеличительной способностью 300 диаметров. Если кристаллы происходят из свежей крови, они имеют вид, представленный на рис. 21; кристаллы из старой крови представлены на рис. 22.
Первые имеют красновато-бурый, вторые — более светлый цвет.
Различные методы, используемые в настоящее время для получения кристаллов гемина, были предложены Хоппе-Зейлером, Брюкке и Эрдманом. Какой бы процесс ни использовался, подозрительные пятна вначале тщательно отделяют от материала, на который они нанесены. Если они присутствуют на льне или других тканях, окрашенные участки, которые всегда остаются несколько жесткими, вырезают: они будут иметь красновато-бурый цвет в случае, если ткань не окрашена; если пятна находятся на дереве, их удаляют с помощью острого ножа; если на камне или железе, их отделяют соскабливанием.
В случае использования метода Хоппе-Зейлера пятна, отделенные, как указано выше, размягчают в небольшом количестве холодной воды (теплая вода коагулировала бы присутствующий альбумин и, следовательно, препятствовала бы протеканию растворения): пятна размягчаются, наблюдаются полосы и бурые или красноватые облака, особенно когда высохшая кровь свежая, и в то же время предметы, на которые были осаждены пятна, обесцвечиваются. При самопроизвольном испарении полученной таким образом жидкости на часовом стекле остается красновато-бурый или бурый осадок, из которого кристаллы гемина готовятся следующим образом: к остатку добавляют почти незаметное количество поваренной соли, затем от шести до восьми капель концентрированной уксусной кислоты и тщательно перемешивают массу путем помешивания небольшой стеклянной палочкой. Смесь сначала нагревают над небольшим газовым пламенем, затем выпаривают досуха с помощью тепла водяной бани. Если пятна были образованы кровью, микроскопическое исследование остатка покажет присутствие кристаллов гемина. Этот метод имеет возражение: если испачканные предметы были промыты теплой водой до исследования, альбумин коагулирует, и кровь станет нерастворимой; в этом случае холодная вода ничего не растворит, и остаток не образует кристаллов при обработке уксусной кислотой.
Чтобы исправить эту трудность, Брюкке действует непосредственно на окрашенное тканое или древесное волокно либо на вещество, удаленное с камня или железа: материалы кипятят в пробирке с ледяной уксусной кислотой, жидкость декантируют или фильтруют, добавляют следы поваренной соли, а затем выпаривают жидкость на часовом стекле при температуре от 40 до 80 °. Если пятна действительно происходили из крови, кристаллы гемина теперь будут легко различимы при исследовании полученного остатка под микроскопом.
Окрашенную ткань, вещество, удаленное с камня или железа, или остаток, оставшийся от раствора, которым были обработаны пятна, помещают на стекло, добавляют следы хлорида натрия и накрывают все тонкой стеклянной пластинкой. Затем каплю уксусной кислоты помещают у края пластинок — между которыми она вскоре затекает посредством капиллярного притяжения — и оставляют смесь в покое на холоде на несколько мгновений. Затем массу переводят в раствор путем легкого нагревания и выпаривают, удерживая пластинку на значительном расстоянии над газовой горелкой. Жидкость время от времени исследуют под микроскопом: когда она достаточно сконцентрирована, будут наблюдаться кристаллы, имеющие вид, представленный на рис. 21 или 22. Они особенно хорошо выражены, если между пластинками также присутствует нерастворимое вещество, которое препятствует их слипанию. Жидкость собирается посредством капиллярного притяжения в точках соприкосновения пластинок в виде более или менее окрашенного слоя, в котором осаждаются кристаллы.
Если вышеуказанный тест сначала не дает отличительных признаков, между пластинками вводят одну или две свежие капли уксусной кислоты и исследование повторяют. Результат не следует рассматривать как отрицательный до тех пор, пока несколько попыток не окажутся бесплодными, поскольку окрашенные участки растворяются медленно и кристаллизация могла быть предотвращена слишком быстрым испарением уксусного раствора.
Кристаллы гемина, увиденные однажды, вряд ли могут быть спутаны с другими веществами; все же полезно идентифицировать их, подтверждая их нерастворимость в воде, спирте и холодной уксусной кислоте, а также их мгновенную растворимость в щелочном растворе едкого натра.
Добавление поваренной соли обычно излишне, так как она нормально содержится в крови; но возможно, если пятна были промыты теплой водой, что помимо коагуляции альбумина могло произойти растворение соли, и в этом случае кристаллы не образуются. Добавление соли призвано исправить эту возможную случайность; хотя чувствительность теста не нарушается, даже если образуются кристаллы хлорида натрия, так как они легко растворимы в воде и легко отличаются от кристаллов гемина с помощью микроскопа.
Показания, предоставляемые с помощью спектроскопа, менее надежны, чем те, которые даются получением кристаллов гемина; кроме того, спектроскопическое исследование требует благоприятной погоды для его проведения. Тем не менее этот тест следует использовать во всех возможных случаях. Порядок действий следующий:
Водную жидкость, которой обрабатывали пятна, помещают в часовое стекло и выпаривают в вакууме над серной кислотой; самую последнюю оставшуюся часть жидкости соединяют на дне стекла, заставляя ее собраться в единую каплю. По завершении испарения жидкости часовое стекло помещают перед суженной щелью спектроскопа и пропускают луч рассеянного света (или, что лучше, свет, отраженный от гелиостата) через часть стекла, содержащую остаток. Если пятна происходят из крови, в спектре будут наблюдаться линии поглощения гемоглобина, состоящие из двух больших темных полос справа от линии натрия (линии Д Фраунгофера). В случае, если оба вышеуказанных теста не дают положительных результатов, почти наверняка исследованные пятна не были вызваны кровью. Если же, напротив, реакции произошли, почти не остается сомнений в присутствии крови. При этих обстоятельствах целесообразно подтвердить результаты с помощью тестов, о которых ранее говорилось как о некогда применяемых исключительно; это следующие тесты:
a. От 1/2 до 1 куб. см озонированного скипидара, т. е. скипидара, который подвергался воздействию воздуха в течение времени, достаточного для приобретения свойства обесцвечивать воду, слегка подкрашенную индиго, вводят в пробирку и добавляют равный объем настойки гваякового дерева (последняя настойка готовится путем обработки внутренней части смолы спиртом до тех пор, пока ее бурый цвет не сменится на буровато-желтый).
Если при добавлении некоторого количества исследуемого вещества к вышеуказанной смеси наступает четкое синее окрашивание, а выброшенное нерастворимое вещество обладает глубоким синим цветом, это указывает на присутствие красящего вещества крови. Смесь также придает синий цвет смоченным точкам, с которых пятна крови были извлечены как можно более полно. К сожалению, сульфат железа дает такую же реакцию.
b. При нагревании жидкости, полученной при обработке пятен холодной водой, в пробирке ее бурый или красноватый цвет исчезает, и выпадают серовато-белые хлопья коагулированного альбумина. Осадок приобретает кирпично-красный цвет при обработке кислым раствором нитрата ртути, содержащим азотистую кислоту. Альбумин также коагулирует при добавлении азотной кислоты: он приобретает более или менее желтый цвет при нагревании с небольшим избытком кислоты. Хлорная вода, особенно при нагревании, также осаждает альбумин в виде белых хлопьев.
c. Если жидкость подкисляют несколькими каплями уксусной кислоты и добавляют каплю железистосинеродистого калия, образуется белый осадок или по крайней мере муть.
d. Хлопья альбумина, отделенные нагреванием, растворяются в едких щелочах с образованием раствора, из которого они вновь осаждаются азотной кислотой или хлорной водой.
e. При обработке пятен крови хлорной водой образуется раствор, который содержит хлорид железа и приобретает красную окраску при добавлении роданистого калия.
f. Если пятна не поддались воздействию холодной воды (что, как уже отмечалось, имеет место, когда их предварительно мыли горячей водой), их обрабатывают слабым щелочным раствором едкого натра. Азотная кислота, соляная кислота и хлорная вода вызовут в полученном таким образом растворе белый осадок, который проявляет общие свойства альбумина, описанные ранее. Если пятна отложены на льне, необходимо заменить соду аммиаком, чтобы избежать растворения ткани.
g. Растворы щелочей, растворяющие альбумин, оставляют красящие вещества нетронутыми и, следовательно, не обесцвечивают ткань. Если последняя впоследствии подвергается действию соляной кислоты, красящее вещество растворяется, образуя раствор, который при выпаривании досуха оставляет остаток, содержащий железо, дающий синее окрашивание с железистосинеродистым калием и красное окрашивание с роданистым калием.
h. Красящее вещество крови растворяется в кипящем спирте, в который добавлена серная кислота, с образованием бурой дихроичной жидкости (кажущейся зеленой в проходящем свете и красной в отраженном свете). Смесь ржавчины и крови обнаруживает то же явление.
i. Если вещества, содержащие кровь, нагревают в сухой пробирке, выделяется запах, напоминающий запах жженого рога. Если испачканная ткань представляет собой вещество, которое само по себе производит этот запах (например, шерсть, шелк или волосы), тест естественно теряет всякую ценность.
j. Если жидкость, полученную при обработке пятен водой или щелочью, выпаривают с небольшим количеством углекислого калия и остаток нагревают сначала при 100 °, а затем докрасна в стеклянной трубки, в которую добавлено новое количество углекислого калия, образуется цианистый калий. В остывшем виде трубку разрезают выше части, содержащей сплавленную смесь, массу нагревают с железными опилками и водой, жидкость фильтруют, а затем фильтрат подкисляют соляной кислотой: железистосинеродистый калий будет присутствовать в жидкости, и при добавлении капли раствора хлорного железа образуется зеленый или синий цвет и постепенно выпадает осадок берлинской лазури.
Если испачканная ткань является неазотистой (например: конопля, лен или хлопок), вместо обработки ее водой ее можно нагреть до порошкообразного состояния, смешать с углекислым калием, смесь прокалить, а затем завершить операцию, как только что описано. После того как этот тест дал утвердительные результаты, операции следует повторить с неокрашенной частью ткани, чтобы устранить все сомнения в том, что полученные показания действительно не происходят от самой ткани.
В нынешнем состоянии науки невозможно химически различить человеческую кровь и кровь животных. Господин Баррюэль, правда, способен не только сделать это, но и отличить кровь различных видов животных по ее запаху! Но этот тест имеет несколько гипотетическую ценность для научных целей. Что касается кристаллов гемина, они не представляют достаточных различий, чтобы позволить различить кровь разных животных. Мы еще не рассматривали шарики. Часто случается, что эти мельчайшие органы изменяются настолько, что их уже нельзя распознать при микроскопическом исследовании; однако, когда пятна довольно свежие, их можно обнаружить, исследуя смоченную испачканную ткань непосредственно под микроскопом: тогда возможно различие между животной и человеческой кровью: тельца человеческой крови имеют больший размер: тельца овцы, например, имеют лишь половину диаметра первых. Однако это различие удается использовать лишь изредка.
ИССЛЕДОВАНИЕ СЕМЕННЫХ ПЯТЕН.
В случаях, когда подозревается попытка насилия, изнасилование или педерастия, от эксперта может потребоваться определить природу пятен, обнаруженных на одежде, простынях и т. д. Тот факт, что пятна были произведены семенем, часто может рассматриваться сам по себе как изобличающая улика. Поэтому этот класс исследований имеет значительную важность.
Внешний вид пятен. — Сухие семенные пятна тонки и обнаруживают серый или иногда лимонно-желтый цвет, если они присутствуют на белой ткани. В случае, если ткань цветная, они выглядят беловатыми, а если они на льне, то имеют блестящий вид. Они просвечивают, если смотреть на них в проходящем свете. Если ткань, на которую нанесены пятна, имеет плотную текстуру, они видны только с одной стороны: при любых обстоятельствах их окружность имеет неровную и волнистую форму. Однако эти признаки не являются окончательными и варьируются в зависимости от того, были ли пятна произведены густой спермой сильного мужчины или жидкой семенной жидкостью пожилого и больного человека, либо семенами, более или менее смешанными с секретом предстательной железы. При смачивании семенных пятен иногда выделяется специфический несвежий запах свежей спермы, но эта характеристика обычно маскируется присутствием посторонних веществ.
Пятна спермы растворимы в воде, образуя клейкую жидкость, в которой хлор, спирт, бихлорид ртути, ацетат и субцитат свинца дают белый осадок, но которая не коагулирует при нагревании. Плюмбат калия не придает этим пятнам желтовато-коричневого цвета при температуре выше 20 °, как это происходит с пятнами, произведенными альбуминовыми веществами.
Персульфат железа придает семенным пятнам бледно-желтый цвет,
Сульфат меди — синевато-серый цвет,
Медно-калиевый тартрат — синевато-серый цвет,
Нитрат серебра — бледно-серый цвет,
Азотная кислота — бледно-желтый цвет.
Вышеуказанные реакции, по отдельности или в совокупности, недостаточны; они не обладают высокой чувствительностью и точно так же вызываются пятнами, происходящими из других разновидностей слизи: только показания микроскопического исследования пятен являются окончательными.
Микроскопическое исследование. — Семень содержит в качестве своего основного и оплодотворяющего компонента особые вибрирующие нити (сперматозоиды), удерживаемые во взвешенном состоянии в вязкой жидкости. Эти нити при сохранении в теплом и влажном месте сохраняют свою активность в течение значительного времени; возможно даже, что они проявляют жизнеспособность в органах, в которые они были извергнуты добровольно или насильственно, в течение десяти или даже двадцати четырех часов. При воздействии холодного воздуха сперматозоиды быстро погибают; тем не менее они сохраняют свою форму в течение некоторого времени, и, поскольку она очень характерна, их легко идентифицировать; более того, поскольку они происходят исключительно из яичек, их обнаружение может считаться достоверным доказательством присутствия семени. В пятнах, произведенных пожилыми людьми и лицами, ослабленными излишествами, сперматозоиды могут не обнаруживаться; в случае их обнаружения этот факт, очевидно, не влияет на достоверность семенного происхождения пятен. Обратный вывод никогда не является абсолютно достоверным: тем не менее, если с помощью микроскопа не удается установить присутствие сперматозоидов, почти наверняка пятна были произведены не семенем.