«Гистология крови: норма и патология»

Увеличение лимфоцитов от химических стимулов встречается чрезвычайно редко, хотя, как хорошо известно, большое количество веществ (бактериальные продукты, белки, нуклеины, органические экстракты и так далее) может вызвать полинуклеарный лейкоцитоз. В совершенно изолированных случаях наблюдалось увеличение лимфоцитов в крови вследствие инъекции туберкулина туберкулезным индивидуумам. (Э. Гравиц.) Из редкости этих случаев едва ли можно сомневаться, что здесь играет роль также туберкулезное заболевание желез, так что увеличенная иммиграция лимфоцитов вызвана не химическим свойством туберкулина, а обширной специфической реакцией больных желез.

Только одно единственное вещество до сих пор упоминалось в литературе как способное само по себе вызывать лимфоцитоз. Вальдштейн утверждает, что он вызвал инъекцией пилокарпина лимфемию, которая претерпевает прогрессирующее увеличение с ростом числа инъекций.

Происхождение лимфоцитоза поэтому также резко отграничено от происхождения обычного лейкоцитоза, который состоит в увеличении нейтрофильных элементов. В то время как последний, общепризнанно, является выражением хемотаксического действия и возникает путем действия на расстоянии растворимых веществ на костный мозг, лимфоцитоз обусловлен местной стимуляцией определенных железистых областей. Так, при лейкоцитозе пищеварения, кишечных заболеваниях детей мы относим его к возбуждению лимфатического аппарата кишечника, при туберкулиновой лимфемии мы признаем главным образом реакцию больных лимфатических желез. Отсюда мы заключаем, что лимфоцитоз появляется, когда происходит повышенная лимфоциркуляция в более или менее обширной области лимфатических желез и когда вследствие увеличенного потока больше элементов механически вымывается из лимфатических желез. Пилокарпиновый лимфоцитоз не противоречит этому взгляду, ибо пилокарпин вызывает необычайные, хотя и преходящие вариации в распределении воды, вследствие чего приток в кровь жидкости, содержащей лимфатические клетки, увеличивается. Мы поэтому рассматриваем лимфоцитоз как результат механического процесса; тогда как лейкоцитоз является выражением активной хемотаксической реакции полинуклеарных элементов.

Этот взгляд находит свою лучшую поддержку в том факте, что полинуклеарные лейкоциты обладают живым амебоидным движением, которое полностью отсутствует у лимфоцитов.

В соответствии с отсутствием сократимости у лимфоцитов также наблюдается, что при воспалительных процессах, в отличие от полинуклеарных нейтро- и оксифилов, лимфоциты не способны проходить через стенку сосуда. Очень интересный эксперимент по этому пункту был описан Нейманом годы назад. Нейман вызвал нагноение у пациента с лимфатической лейкемией, у которого кровь содержала только очень небольшое количество полинуклеарных клеток. Исследование гноя показало, что он состоял исключительно из полинуклеарных клеток и что ни один лимфоцит не попал в экссудат, хотя этот вид клеток присутствовал так обильно в крови.

Гистологическое исследование всех свежих воспалительных процессов, при которых обнаруживаются главным образом полинуклеарные элементы, приводит к согласующимся результатам. Хорошо известно, что мелкоклеточная инфильтрация происходит на поздней стадии воспаления, по-видимому, состоящая из лимфатических клеток; тем не менее, это ни в малейшей степени не доказывает, что эти лимфоциты эмигрировали сюда из кровеносных сосудов. Это не место для вступления в очень обширную полемику по этому пункту. Мы довольствуемся ссылкой на самую последнюю очень тщательную работу Рибберта. Рибберт рассматривает эти очаги мелкоклеточной инфильтрации как аналоги лимфатических узелков и объясняет их происхождение увеличением в размере очагов лимфатической ткани, нормально присутствующих, хотя и в мало развитом состоянии.

Из клинических и морфологических исследований, а также из наблюдений за воспалительными процессами, следовательно, вытекает, что лимфоциты никоим образом не связаны с полинуклеарными лейкоцитами. К тому же результату мы придем иным путем в следующем разделе.

(γ) Костный мозг.

Селезенка и лимфатические железы первоначально рассматривались как единственные места образования кровяных телец. Почти одновременные исследования Неймана и Биццоцеро впервые привлекли всеобщее внимание к значению костного мозга. Эти авторы показали, что именно там образуются ранние стадии красных кровяных телец; открытие, которое было быстро и повсеместно признано и вскоре стало патологически полезным благодаря наблюдениям Конгейма и других. В этой связи большую ценность имело наблюдение о том, что после значительной потери крови жировой костный мозг крупных трубчатых костей снова превращается в красный костный мозг, так как это свидетельствует о повышенных требованиях к регенеративной функции костного мозга.

Нам неизвестно второе место образования красных кровяных телец у человека. Однако у других млекопитающих, как мы упоминали выше (см. стр. 99), селезенка также может принимать небольшое участие в продукции эритроцитов. Тип, которому следует нормальное кроветворение у взрослых, и отклонения от него, наблюдаемые при пернициозной анемии, были описаны в главе о красных кровяных тельцах. Взгляд Эрлиха на то, что кроветворение при пернициозной анемии относится к иному типу, аналогичному эмбриональному, также был описан там.

Поэтому в данном разделе мы должны иметь дело главным образом с белыми кровяными тельцами и их связью с костным мозгом. У человека, как и у большого числа животных (например, обезьяны, морской свинки, кролика, голубя и так далее), костный мозг обнаруживает ту особенность, что производимые им клетки несут специфическую зернистость, в резком контрасте с лимфатической железистой системой, которая содержит элементы, свободные от гранул, во всем ряду животных.

Зернистые клетки костного мозга делятся на две группы.

Первая группа клеток со «специальной зернистостью» очень важна, поскольку она является характеристикой определенных видов животных. В зависимости от класса животного они проявляют различные тинкториальные и морфологические свойства. У человека и обезьяны, например, имеется нейтрофильная зернистость; у морской свинки и кролика — псевдоэозинофильная зернистость, описанная Курловым; у птиц мы находим две специфические зернистости, присутствующие бок о бок, которые обе являются оксифильными и из которых одна внедрена в протоплазму в кристаллической форме, другая — в форме гранул.

Виды специальной зернистости, исследованные до сих пор, обладают общим свойством: они окрашиваются соответственно кислыми и нейтральными красителями; они проявляют гораздо меньшее сродство к основным красителям. Тот факт, что они значительно превосходят другие элементы костного мозга у всех классов животных, свидетельствует о важности этих гранул.

Вторая группа клеток костного мозга содержит гранулы, которые мы находим во всем ряду позвоночных, от лягушки до человека, и которые поэтому не являются характерными для какого-либо одного вида животных. Это: (1) эозинофильные клетки, (2) базофильные тучные клетки.

Формы костного мозга, свободные от гранул, состоят в основном из мононуклеарных клеток различного типа. Они далеко не так многочисленны и не так важны, как зернистый вид, особенно как первая и преобладающая группа.

Среди беззернистых форм особого упоминания заслуживают гигантские клетки, так как они являются почти постоянной составной частью костного мозга класса млекопитающих. Согласно недавним исследованиям Пульезе, гигантские клетки значительно увеличиваются после удаления селезенки у ежа; органа, обладающего у этого животного совершенно необычайными размерами и, несомненно, поэтому выполняющего важные гемопоэтические функции.

Пульезе утверждает, что у ежа после спленэктомии ядерные гигантские клетки переходят в лейкоциты путем амитотического деления ядра. К сожалению, в его предварительном сообщении нет заметок о гранулах клеток костного мозга.

При исследовании окрашенного сухого препарата костного мозга морской свинки, кролика, человека и т. д. видно, что характерные мелкозернистые клетки присутствуют на всех стадиях развития, от мононуклеарных через переходные к полинуклеарным (полиморфно-ядерным) формам, которые мы встречаем в циркулирующей крови. Взгляд на препарат такого рода показывает, что костный мозг, очевидно, является фабрикой, где типичные полинуклеарные клетки непрерывно образуются из содержащих гранулы мононуклеаров.

Здесь также можно увидеть тот же процесс созревания в полинуклеарных эозинофильных лейкоцитах.

Эрлиху удалось с помощью специальной дифференциальной окраски привести доказательство того, что состав зернистости меняется во время метаморфоза мононуклеарных клеток в полинуклеарные. В молодых гранулах заметна базофильная часть, которая становится все менее выраженной по мере роста клетки. Псевдоэозинофильные гранулы мононуклеарных клеток, например, морской свинки, окрашиваются в синевато-красный цвет эозин-метиленовым синим после длительной фиксации в перегретом паре: на переходных стадиях эта примесь постепенно теряется и, наконец, полностью исчезает в гранулах полинуклеарных лейкоцитов, которые окрашиваются в чистый красный цвет. Аналогичные наблюдения можно сделать в эозинофильных клетках человека и животных, а также в нейтрофилах человека. Следовательно, можно даже решить, принадлежала ли изолированная гранула старой или молодой клетке.

Пока невозможно с уверенностью судить о скорости, с которой происходит созревание мононуклеарных клеток в полинуклеарные, или далее решить, всегда ли созревание гранул идет параллельно по времени с созреванием всей клетки. На основании наших наблюдений мы предположили бы, что в целом оба процесса протекают бок о бок, но что в особых случаях морфологическое созревание клетки может протекать быстрее, чем созревание гранул. Особенно легко наблюдать этот момент в эозинофильных клетках. Эрлих уже упоминал в своей первой работе (1878), что наряду с типичными эозинофильными гранулами часто встречаются изолированные гранулы, которые проявляют отклонение в тинкториальных свойствах: например, они окрашиваются скорее в черный цвет в эозин-ауранция-нигрозине; в эозин-метиленовом синем — в синевато-красный до чисто синего. Эрлих уже описал их как молодые элементы в своей первой работе. Те же различия более резко выражены при лейкемии даже в циркулирующей крови, как в нейтрофильной, так и в эозинофильной группе. Эрлих неоднократно находил в лейкемической крови полинуклеарные эозинофильные клетки, чьи гранулы должны почти исключительно рассматриваться как молодые формы [15].

Эрлих рассматривал их как типичные примеры относительного ускорения морфологического созревания клеток по сравнению с развитием гранул.

В нормальной крови мы находим только зрелые формы специфических зернистых клеток костного мозга. Мононуклеарные и переходные формы нейтрофильной группы при нормальных обстоятельствах не переходят в кровоток.

Эрлих рассматривал мононуклеарные нейтрофильные зернистые клетки как характерные для костного мозга, поскольку они встречаются исключительно в костном мозге, никогда в селезенке или лимфатических железах, и по этой причине назвал их «миелоцитами», κατ' εξοχην [16]. Когда миелоциты, независимо от размера, появляются в значительном количестве в крови взрослого человека, почти всегда присутствует лейкемия миелогенного характера. (О крайне редких исключениях из этого правила, которые, добавим, никогда не могут быть перепутаны с лейкемией, см. стр. 77, 78.)

Точно такие же условия справедливы для эозинофильных клеток, поскольку одноядерные формы, которые можно назвать эозинофильными миелоцитами, встречаются почти исключительно в лейкемической крови. Эти формы, которые были впервые распознаны Г. Ф. Мюллером, однако, имеют меньшее значение, так как при миелогенной лейкемии основная часть чужеродной примеси крови состоит из миелоцитов Эрлиха.

Очень важные выводы по интересному вопросу о лейкоцитозе можно сделать из этих наблюдений. Помня о том, что полинуклеарные нейтрофильные клетки развиваются и накапливаются только в костном мозге, что при обычном лейкоцитозе в крови увеличиваются только полинуклеарные формы, очевидно, что лейкоцитоз является чисто функцией костного мозга, на чем Эрлих всегда настаивал со всей определенностью. Только при этом допущении можно удовлетворительно объяснить часто внезапное появление лейкоцитоза, как это так часто наблюдалось при болезненных и экспериментальных состояниях. В этих случаях промежуток времени, составляющий часто лишь минуты, слишком короток для того, чтобы можно было представить себе новое образование лейкоцитов; должны существовать места, в которых эти клетки уже полностью сформированы и способны оттуда эмигрировать при любом подходящем стимуле. Это место единственное, и это только костный мозг. Здесь все мононуклеарные формы постепенно созревают до полинуклеарных сократительных клеток, которые подчиняются каждому хемотаксическому стимулу путем эмиграции и которые, таким образом, вызывают внезапный лейкоцитоз.

Таким образом, костный мозг выполняет, среди прочих, чрезвычайно важную функцию защитного органа, с помощью которого определенные вредные влияния, воздействующие на организм, могут быть быстро и энергично отражены. Точно так же, как в пожарной части постоянно наготове имеются достаточные средства помощи, чтобы немедленно ответить на тревогу с любой стороны.

Мы хотим еще раз подчеркнуть, что крупные мононуклеарные лейкоциты и переходные формы нормальной крови не участвуют в увеличении при обычном лейкоцитозе; при лейкоцитозе высокой степени их относительное число может даже снижаться вследствие исключительного увеличения полинуклеарных клеток. По-видимому, эти элементы не реагируют на хемотаксические стимулы и, возможно, попадают в кровь совершенно иными путями, чем полинуклеары.

Мы полагаем, что эти незернистые мононуклеарные клетки человека следует рассматривать как аналогичные таковым у морской свинки, описанным Курловым (см. стр. 86). Однако мононуклеарные клетки человека в конечном итоге превращаются в нейтрофильные зернистые клетки, тогда как клетки Курлова остаются свободными от гранул в процессе своего метаморфоза. При остром лейкоцитозе у морской свинки увеличиваются только псевдоэозинофильные полинуклеарные клетки, которые блуждают как таковые из костного мозга, но не полинуклеарные незернистые формы, которые лишь медленно растут до зрелости в крови. Таким образом, особенности крови морской свинки, в которой различимы два вида полинуклеарных клеток, проливают свет на соответствующие условия в крови человека. Различие в последней более затруднительно, поскольку в данном случае не очевидно, что полностью сформированные полинуклеарные нейтрофильные лейкоциты имеют двоякое происхождение: ибо большинство блуждает полностью сформированными из костного мозга в кровь, и лишь значительно меньшее число дорастает до зрелости внутри кровотока из мононуклеарных и переходных форм.

Никакого определенного утверждения пока нельзя сделать относительно мест образования незернистых крупных мононуклеарных лейкоцитов.

Курлов продемонстрировал, что у морской свинки эти клетки присутствуют как в костном мозге, так и в селезенке, но что после удаления селезенки абсолютное число не меняется. Таким образом, костный мозг у морской свинки также может сохранять баланс крупных мононуклеарных, незернистых клеток в крови.

Числа, которые мы нашли в наших исследованиях крови у человека после спленэктомии, также были нормальными. Мы можем, следовательно, несомненно предположить, что крупные мононуклеарные беззернистые клетки крови человека также возникают по большей части из костного мозга. В этой ткани их можно выделить из мешанины различных видов клеток только с величайшим трудом, из-за их малого числа и их малохарактерных свойств. Следовательно, точное исследование их происхождения могло бы, вероятно, быть успешным только в том случае, если бы удалось экспериментально вызвать заболевание, при котором именно эти формы подвергались бы значительному увеличению. Этот прогресс не совсем безнадежен, поскольку у человека, по крайней мере, абсолютное увеличение крупных мононуклеарных клеток наблюдается в постфебрильной стадии кори.

Только на основании микроскопических исследований мы заключаем, что костный мозг является, безусловно, самым важным из кроветворных органов, ибо его функция заключается в исключительной продукции красных кровяных дисков, а также основной группы белых телец — полинуклеарных нейтрофилов.

Физиологическое, экспериментальное исследование функций костного мозга представляет непреодолимые трудности. Исключение всего костного мозга или только его больших частей является невозможной операцией. Не можем мы приписать никакой ценности исследованиям, которые пытаются получить результат путем сравнительных подсчетов артериальной и венозной крови области костного мозга. Дж. П. Роецкий, работая под руководством Ускова, недавно произвел подсчеты такого рода у собаки, из питающей артерии большеберцовой кости и соответствующей вены. Он обнаружил, что число белых телец в вене несколько больше, что, с другой стороны, абсолютное число «молодых телец» (Усков), т. е. лимфоцитов, значительно уменьшилось, тогда как число «зрелых» телец, которые по большей части соответствуют нашим полинуклеарным, значительно увеличилось. Он приводит следующую таблицу:

Total number Young corpuscles Ripe corpuscles Old corpuscles Arterial blood 15000 1950 (13%) 840 (5.6%) 12210 (81%) Venous " 16400 656 (4.0%) 2788 (17.0%) 12956 (79.0%)

Аргумент, основанный на таких цифрах, предполагает, что функция костного мозга является непрерывной; предположение, которое Усков, действительно, по-видимому, делает.

Но если костный мозг постоянно поглощает лимфоциты в такой степени, совершенно непонятно, как может сохраняться нормальное состояние крови, учитывая объем костного мозга и скорость кровообращения. Все доказательства, действительно, склоняются к тому, что, напротив, костный мозг выполняет свои функции прерывисто, поскольку элементы постоянно дорастают до зрелости в костном мозге, как мы объяснили выше, но они эмигрируют только в определенное время в результате химических стимулов. Из этого соображения априори очевидно, насколько неубедительными должны быть результаты таких экспериментов, как эти у Роецкого [17].

Гораздо более важными для выяснения функции костного мозга являются клинические наблюдения случаев, в которых значительные части костного мозга замещаются тканью иного рода. Мы можем лучше всего разделить наблюдения по этому вопросу на две группы: 1. злокачественные опухоли костного мозга, 2. так называемая острая лейкемия.

К сожалению, имеется еще очень мало доступных наблюдений по первой группе. Еще реже встречаются случаи, в которых, как это необходимо, весь костный мозг был подвергнут исчерпывающему исследованию, что одно дает адекватное доказательство степени дефекта.

Среди изменений костного мозга, возникающих вследствие опухолей, можно выделить две группы, в зависимости от характера состояния крови. Первый тип иллюстрируется случаем Нотнагеля, опубликованным в его работе о лимфадении костей. Здесь при жизни кровь показывала, в основном, признаки простой тяжелой анемии; но в дополнение — изолированные нормобласты, мелкие клетки костного мозга и умеренный лейкоцитоз. Вскрытие, при котором вся скелетная система была подвергнута систематическому точному исследованию, показало полную атрофию костного мозга и замещение его опухолевыми массами. В этом случае, следовательно, состояние крови in vivo удовлетворительно объясняется отсутствием функции костного мозга. Нотнагель предположил, что образование скудных ядерных красных кровяных телец происходило викарно в селезенке, а лейкоцитов — в лимфатических железах.

Во второй серии, к которой относятся случаи Израиля и Лейдена, а также недавно опубликованный случай Дж. Эпштейна из отделений Носсера, кровь показывает, помимо обычных анемических изменений, другие аномалии, которые свойственны отчасти пернициозной анемии, отчасти миелогенной лейкемии. В случае метастатического рака костного мозга у Эпштейна была обнаружена значительная анемия с многочисленными ядерными красными кровяными тельцами как нормо-, так и мегалобластического типа; их ядра представляли самые странные формы, обусловленные не только типичным делением ядер, но и дегенерацией ядер. Белые кровяные тельца были значительно увеличены, их пропорция к красным составляла от 1/25 до 1/40; увеличение касалось в основном крупных мононуклеарных форм, которые по большей части несли нейтрофильную зернистость и поэтому должны были называться миелоцитами. Во всех препаратах было найдено только две эозинофильные клетки [18].

Объяснение картины крови такого рода, помимо чисто анемических изменений, отнюдь не легко, как справедливо замечает Эпштейн. Появление миелоцитов легче всего объясняется прямой стимуляцией оставшегося костного мозга окружающими массами опухоли. В этом механический фактор менее значим, чем химические продукты метаболизма опухолевых масс, которые сначала действуют на прилегающую ткань в особо сильной концентрации, а также отрицательно хемотаксически на блуждающие клетки. Этот взгляд получает поддержку в тщательной работе Рейнбаха о поведении лейкоцитов при злокачественных опухолях. Из 40 исследованных случаев только в одном, лимфосаркомы, осложненной туберкулезом, в крови были найдены миелоциты, составляющие около 0,5–1,0% белых кровяных телец. Вскрытие показало изолированные желтовато-белые очаги роста в костном мозге, достигающие размера шестипенсовой монеты. Помня о том, что ни в одном из других 39 случаев миелоциты не были продемонстрированы, не колеблются объяснить их присутствие в крови в этом единственном случае метастазами в костном мозге. Малый размер последних является также причиной малого процента миелоцитов.

При объяснении присутствия мегалобластов в крови пациента Эпштейна мы должны иметь перед глазами то, что мы сказали в другом месте об этом виде клеток. Они не присутствуют в нормальном костном мозге; они возникают, напротив, согласно нашему взгляду, когда специфический болезнетворный агент действует на костный мозг, как мы должны предполагать, это имеет место при пернициозных формах анемии. В случаях анемии от опухолей, при которых мы находим мегалобласты в большом количестве в крови, мы должны точно так же предполагать, что химические стимулы исходят от опухолей, приводя к образованию мегалобластов в костном мозге.

Присутствие мегалобластов в костном мозге само по себе не вызывает их появления в крови, ибо при пернициозной анемии костный мозг может быть заполнен мегалобластами, и все же в крови можно найти лишь очень скудные примеры. Является ли эмиграция мегалобластов из костного мозга в кровоток в целом следствием химических стимулов, как это имеет место в частном случае Эпштейна, или механических причин, в настоящее время решить нельзя.

Костный мозг может быть замещен типичной лимфатической тканью, так же как и субстанцией злокачественных опухолей. Первое постоянно встречается при лимфатической лейкемии согласно хорошо известным результатам Неймана, которые с тех пор были повсеместно подтверждены. В этих случаях обширные участки костного мозга замещаются не массами злокачественного роста, а индифферентной тканью, так сказать, тканью, которая неспособна оказывать вышеописанное стимулирующее влияние на оставшийся костный мозг. Именно благодаря этому обстоятельству мы можем наблюдать в случаях лимфатической дегенерации костного мозга явления, обусловленные его исключением, в их наиболее несложной форме [19].

Наиболее убедительные результаты получаются из случаев острой (лимфатической) лейкемии, довольно частое возникновение которой было впервые замечено Эпштейном и которая в последнее время была очень тщательно изучена А. Френкелем. Для рассматриваемой цели острая лейкемия особенно подходит, поскольку аномальный рост лимфатической ткани происходит очень быстро и по этой причине вызывает быстрое и несложное исключение ткани костного мозга; как бы экспериментально. Под его влиянием нейтрофильные элементы костного мозга быстро исчезают, и во многих случаях настолько полностью, что требуется некоторое усилие, чтобы найти хотя бы один миелоцит, как, например, в случае Эрлиха. Полинуклеарные лейкоциты производятся в костном мозге, следовательно, там, где костный мозг разрушен, как в этом случае, ясно, что их число должно быть абсолютно очень сильно уменьшено в крови.

Док также пришел к аналогичным результатам, как мы видим из предварительного отчета; и он аналогично объясняет отсутствие нейтрофильных клеток при лимфатической лейкемии замещением миелоидной ткани лимфатической.

Таким образом, лимфатическая лейкемия дает поразительное доказательство того, что лимфоциты являются клетками особого рода, которые совершенно независимы от полинуклеарных клеток. Поэтому чрезвычайно удивительно, что Френкель, после тщательного изучения и анализа восьми случаев острой лимфатической лейкемии, полагает, что нашел в них императивные причины для предположения, что лимфоциты превращаются в полинуклеарные клетки. Это можно объяснить только путаницей, которую принесло учение Ускова о «молодых клетках».

Мы определяем лимфоцитоз как увеличение лимфоцитов крови; Френкель, подобно Ускову, рассматривает его как эмиграцию молодых форм белых кровяных телец в кровь. Он логически заключает из уменьшения полинуклеарных клеток при этой форме заболевания, «что условия трансформации молодых форм претерпели нарушение». Но если предположить, что лимфоциты — это молодые формы, а полинуклеары — их более старые стадии, гораздо ближе к фактам говорить не о нарушении при лимфатической лейкемии, а об абсолютном препятствии процессу созревания. Легко представить себе любой конкретный стимул или повреждение, вызывающее ускорение нормального процесса, то есть преждевременную старость, но столь же трудно ясно представить себе условия, которые замедляют или полностью предотвращают нормальное старение элементов. Открытие таких условий было бы действительно эпохальным как для общей биологии, так и для терапии. Единственным выходом из этой дилеммы было бы допущение очень преждевременной смерти лимфоцитов, для чего, однако, не найдено ни малейшего доказательства даже в монографии Френкеля. Френкель отличает острые формы лейкемии от хронических тем фактом, «что в первых вновь образованные элементы эмигрируют из мест своего образования в кровоток с необычайной быстротой. Поэтому нет времени для дальнейшего местного метаморфоза. При хронической лейкемии эмиграция происходит, весьма вероятно, гораздо медленнее». Этому различию противоречат факты; ибо существуют хронические формы лимфатической лейкемии, чья микроскопическая картина идентична таковой при острой лейкемии. И поэтому отправная точка всех дедукций Френкеля становится ненадежной.

СНОСКИ:

[14] К. С. Энгель недавно предложил называть острый лейкоцитоз «лиенальным лейкоцитозом» по аналогии с клиническим понятием лиенальной лейкемии. Эту терминологию следует использовать только в том случае, если бы полинуклеарные клетки действительно возникали из селезенки, предположение, которое сам Энгель, по-видимому, даже не делает, поскольку он прямо предостерегает от того, чтобы делать какие-либо выводы из этого названия относительно их происхождения. Поскольку, однако, острые лейкоцитозы, как мы покажем в следующем разделе, относятся исключительно к костному мозгу, термин «лиенальный лейкоцитоз» кажется нам совершенно ошибочным, ибо он логически должен привести к концепции происхождения лейкоцитов, прямо противоположной их фактическим взаимоотношениям.

[15] Многие авторы, например Арнольд, объясняют это двойное окрашивание эозинофильных клеток присутствием эозинофильной и тучноклеточной зернистости бок о бок. Что это, безусловно, не так, показывает тот факт, что «базофильная» зернистость эозинофильных клеток не проявляет при метахроматическом окрашивании метахромазии, характерной для тучных клеток.

[16] А. Френкель недавно сообщил о гистологических исследованиях, в которых он мог продемонстрировать в одном случае истинные миелоциты в воспаленных лимфатических железах. Он говорит (XV Конгресс по внутренним болезням): «В течение некоторого времени я проводил систематические исследования силами моего ассистента, доктора Яфы, зернистости лейкоцитов, содержащихся в этих железах при большом числе инфекционных заболеваний, которые сопровождаются острым набуханием лимфатических желез, таких как скарлатина, дифтерия, брюшной тиф. Они выполнялись следующим образом: сухие мазки на покровных стеклах делались из сока желез, удаленных вскоре после смерти, и окрашивались обычным способом по Эрлиху триацидной смесью. Среди большого числа таким образом исследованных случаев удалось только в одном случае скарлатины — но в этом вне всякого сомнения — продемонстрировать присутствие мононуклеарных клеток с нейтрофильной зернистостью». Крайняя редкость этого состояния поддерживает наше мнение о том, что образование нейтрофильных мононуклеарных элементов нельзя рассматривать как нормальную функцию лимфатических желез. Полинуклеарные нейтрофильные клетки почти всегда естественным образом присутствуют в воспаленных лимфатических железах как продукт воспаления, который иммигрировал туда. Каждый препарат гноя показывает, что полинуклеарные нейтрофильные лейкоциты могут превращаться в тканях в мононуклеарные, и изолированные наблюдения Яфы следует объяснять таким образом.

[17] Более того, исследования Роецкого совершенно лишены основания, поскольку большеберцовая кость собаки, на которой этот автор проводил свои эксперименты, содержит у всех пород собак — согласно информации, любезно предоставленной нам профессором Шютцем — не красный костный мозг, а только жировой, который, как известно, неспособен к малейшей гемопоэтической функции.

[18] Мы обращаем особое внимание на малое число эозинофильных клеток, поскольку согласно постулатам Эрлиха это отсутствие эозинофильных клеток несовместимо с диагнозом лейкемии.

[19] В отличие от этого лимфатического метаморфоза костного мозга, при миелогенной лейкемии обнаруживается миелоидная трансформация других кроветворных органов, особенно лимфатических желез; трансформация, достаточно охарактеризованная как миелоидная присутствием миелоцитов, эозинофилов и ядерных красных кровяных телец.

III. О ДЕМОНСТРАЦИИ КЛЕТОЧНЫХ ГРАНУЛ И ИХ ЗНАЧЕНИИ.

В течение последних десяти лет было проделано большое количество ценной работы по клеточным гранулам с гистологической, биологической и клинической сторон. Это особенно помогло гематологии, где остается ряд проблем, решение которых возможно только с помощью знания гранул. Мы должны поэтому рассмотреть историю, методы и результаты этой работы.

Эрлих был, несомненно, первым, кто настоял на важности клеточных гранул и получил практические результаты в этом направлении. Мы обязаны упомянуть об этом, поскольку Альтман, несмотря на прямые исправления, неоднократно утверждал обратное. В 1891 г. [20] Эрлих опроверг притязание Альтмана на приоритет, тем не менее, Альтман во 2-м издании своих «Элементарных организмов» (1894) заявил, что до него никто не признавал специфической важности гранул, хотя некоторые авторы рассматривали их как «редкие и изолированные явления».

Мы можем процитировать отрывок, опубликованный Эрлихом в 1878 г. [21], то есть за десять лет до работ Альтмана. «С начала гистологии слово «зернистый» использовалось для описания характера клеточных форм. Этот термин не очень удачен, поскольку многие обстоятельства вызывают зернистый вид протоплазмы. Современная работа показала, что многие клетки, ранее описывавшиеся как зернистые, обязаны этим видом сетчатому протоплазматическому каркасу. И мы не имеем больше права называть зернистыми клетки, в которых происходят белковые осадки, либо спонтанно, как при коагуляции, либо от реагентов (спирт). Название должно быть сохранено исключительно для клеток, в которых при жизни вещества, химически отличные от нормального белка, внедрены в зернистой форме. Мы можем легко различить лишь немногие из этих веществ, такие как жир и пигмент; большинство из них мы можем в настоящее время охарактеризовать лишь несовершенно или вовсе не можем».

«Более ранние наблюдения, особенно над тучными клетками, привели меня к ожиданию, что эти зернистости, хотя они долгое время были недоступны для химического анализа, могут быть различимы по их поведению с определенными красителями. Я нашел, в самом деле, гранулы этого рода, характеризующиеся своим сродством к определенным красителям, и которые могли быть тем самым легко прослежены через ряд животных и в различных органах. Я далее нашел, что определенные гранулы встречаются только в конкретных клетках, для которых они характерны, как пигмент для пигментных клеток, и гликоген для хрящевых клеток (Нейман) и так далее. Мы можем диагностировать разнообразно сформированные тучные клетки только по окрашиванию их гранул в растворе далии, то есть с помощью микрохимического теста. И таким же образом мы можем отделить тинкториально другие зернистые клетки, морфологически неразличимые, на определенные подгруппы. И по этой причине я предлагаю называть эти зернистости специфическими».

«Исследования выполнялись по методу Коха следующим образом. Жидкость (кровь) или паренхима органов (костный мозг, селезенка и т. д.) распределялась на покровных стеклах как можно более тонким слоем, высушивалась при комнатной температуре и после удобного промежутка времени окрашивалась. Я выбрал этот, казалось бы, грубый метод по той особой причине, что для гистологического распознавания новых, возможно, определенных химических соединений, соответствующих зернистостям, должны быть избегнуты все вещества, которые могли бы действовать как растворители, например вода или спирт, или как окисляющие агенты, такие как осмиевая кислота. В этом случае могут быть использованы только такие процедуры, которые оставят простое высыхание каждого отдельного химического вещества по возможности неизменным».

Более детальное изучение процесса окрашивания и связи между химическим составом и окрашивающей способностью позволило сделать дальнейший шаг вперед. И первым результатом в этом ранее нетронутом направлении было резкое различие между кислыми, основными и нейтральными красителями и между соответствующими окси-, базо- и нейтрофильными зернистостями. Триацидный раствор был найден только после испытания многих сотен комбинаций; и по сей день этот краситель в своей первоначальной форме или в небольших модификациях играет видную роль в различных областях гистологии.

Классификация клеточных гранул крови согласно их различным химическим сродствам, которая была составлена этим методом, принята сегодня как наиболее ценное и единственное практическое средство группировки лейкоцитов. С самого начала Эрлих настаивал на том, что разные виды клеток обладают разными гранулами, различающимися не только своими тинкториальными свойствами, но также своими различными реакциями на растворители.

Именно в этой связи, действительно, метод Альтмана, состоящий из сложного процесса отверждения и использования единственного, всегда похожего красителя, представляет собой регрессивный шаг, поскольку он имеет тенденцию затемнять принцип специфичности каждого вида зернистости.

Дальнейший недостаток метода отверждения Альтмана заключается в обстоятельстве, что клеточные белки осаждаются им в сферической форме и окрашиваются при последующей обработке. Поэтому чрезвычайно трудно различить, что является предформированным, а что артефактом. После публикации А. Фишера, где формирование зернистоподобных осадков под влиянием различных реагентов экспериментально продемонстрировано, серьезные сомнения в реальности форм Альтмана были подняты с разных сторон. Сухой процесс Эрлиха, напротив, полностью свободен от ошибок. Гранулы не могут быть искусственно произведены путем высушивания, и окрашенные картины соответствуют в точности тому, что видно в свежей живой крови. Величайшая ценность сухого метода в том, что химическая природа отдельных гранул остается неизменной, так что попытки дифференциации делаются на почти неизмененном объекте [22].

Другое средство изучения природы гранул зависит от принципа витального окрашивания. «Витальное окрашивание метиленовым синим» (Эрлих), которое с тех пор стало столь важным, особенно в неврологии, привело к первым попыткам окрашивания гранул у живых животных. Одной из первых публикаций на эту тему является публикация О. Шульце, который помещал личинки лягушек в разбавленный раствор метиленового синего и через короткий период находил гранулы желудка, красные кровяные тельца и другие клетки окрашенными в синий цвет. Этот метод, однако, не может считаться полностью свободным от ошибок, так как Эрлих часто обнаруживал, что когда эксперимент длится некоторое время, метиленовый синий часто образует зернистые осадки, которые могут быть перепутаны с гранулами. Тейхман направляет детальный анализ на этот пункт и рассматривает большинство гранул, описанных Шульце, как искусственные продукты.

Нейтральный красный высоко пригоден для изучения витального окрашивания гранул, краситель, рекомендованный Эрлихом и успешно применяемый с того времени Пржесмицким, Провазеком, С. Майером, Сольгером, Фридманом, Паппенгеймом и другими. Этот краситель был приготовлен О. Н. Виттом из нитрозодиметиламина и метатолуилендиамина и является солянокислой солью основания, которое растворимо в чистой воде, давая фуксиново-красный цвет, но которое в слабом щелочном растворе — щелочности минеральной воды достаточно — имеет желто-оранжевый оттенок.

Теперь нейтральный красный характеризуется действительно максимальным сродством к большинству гранул. Эрлих смог с помощью этого красителя продемонстрировать гранулы даже в некоторых растительных клетках. Более того, метод его использования — самый простой из возможных, так как подкожная или внутривенная инъекция, или даже кормление у высших животных окрашивает гранулы; с личинками лягушек и беспозвоночными часто достаточно позволить им плавать в разбавленном растворе красителя. Окрашивание также удается в «выживающих» органах и лучше всего осуществляется путем позволения маленьким кусочкам плавать в физиологическом солевом растворе, к которому добавлена капля нейтрального красного, при обильном доступе воздуха. Когда объект макроскопически красный, он готов к исследованию.

Наилучшие результаты, естественно, дают органы, которые легко расщепляются, например яйца мух или мальпигиевы каналы насекомых. Окрашивающий раствор следует выбирать так, чтобы акт окрашивания не длился слишком долго, но, с другой стороны, нельзя использовать слишком высокую концентрацию. Рекомендуется около 1/50000 до 1/100000, чтобы протоплазма и ядро оставались совершенно неокрашенными. Искусственные продукты при этом методе нельзя полностью исключить, и, например, в растительных клетках, содержащих танин, они объясняются образованием и осаждением соли дубильной кислоты. Однако опытному человеку нетрудно распознать искусственные продукты как таковые в отдельных случаях. Вид зернистости, типичное распределение, сравнение с соседними клетками, комбинация различных методов, сравнение одного и того же объекта при витальном и «выживающем» окрашивании облегчают суждение и предотвращают ошибки такого рода.

Большинство гранул позвоночных окрашиваются в оранжево-красный цвет нейтральным красным, что соответствует слабощелочной реакции этих форм. Гранулы, окрашивающиеся в чистый фуксиновый цвет и, следовательно, обладающие слабой кислой реакцией, встречаются гораздо реже.

Комбинированное окрашивание можно рекомендовать как ценное дополнение к методу нейтрального красного. Эрлих использовал двойное окрашивание нейтральным красным и метиленовым синим. Личинкам лягушек позволяли оставаться в растворе нейтрального красного, к которому была добавлена капля метиленового синего. Он затем находил почти исключительно красные зернистости, только гранулы гладкой мускулатуры желудка окрашивались интенсивно в синий цвет. С помощью трехкратной комбинации Эрлих получил еще большую дифференциацию живых клеточных гранул. Нет никакого сомнения, что тщательное изучение этого метода нейтрального красного привело бы к важным выводам относительно природы и функции гранул и привело бы нас к самым реальным проблемам клеточной жизни. С нашей нынешней информацией мы даже можем получить определенные концепции, основанные на фактах, относительно биологической важности клеточных гранул.

В своей первой публикации Эрлих описал гранулы как продукты метаболизма клеток, отложенные внутри протоплазмы в твердой форме, отчасти чтобы служить резервным материалом, отчасти чтобы быть выброшенными из клетки. На основании наблюдений над клетками печени, описанных подробно в статье Фрерикса (1883, стр. 43), Эрлих оставил эту позицию, хотя лишь временно. Эрлих показал, что клетки печени кролика, богатые гликогеном, выглядят в сухих препаратах как крупные многоугольные элементы, однородного гомогенного коричневого цвета, окруженные тонкой, хорошо выраженной желтой мембраной. В клетках, которые были не слишком богаты гликогеном, маленькие округлые тельца, явно протоплазматической природы, чисто желтого цвета, могут быть видны внедренными в гомогенные клетки, окрашенные в коричневый цвет гликогеном. «Гиалиновое клеточное основное вещество, несущее гликоген, ни при каких обстоятельствах не могло быть окрашено, но вышеупомянутые клеточные гранулы легко окрашивались всеми видами красителей. Далее можно было показать окрашиванием, что мембрана химически отличалась от гранул, так как с эозин-ауранция-индулин-глицерином мембрана окрашивалась в черный цвет, а гранулы — в оранжево-красный».

К этим наблюдениям Эрлих добавил следующее заключение: «что клетки печени после еды действительно обладают тонкой протоплазматической мембраной и гомогенным гликоген-несущим веществом, в котором внедрены ядро и круглые гранулы (? функционально активные) протоплазмы».

«При сравнении этих результатов с результатами более недавнего исследования клеток легко определить местоположение гликогена очень точно. Купфер показал, сначала для клеток печени — и это теперь признано как общепринятое — что их содержимое не представляет собой микроскопически единое вещество. В «выживающем» препарате он нашел, в дополнение к ядру, два четко различных вещества: гиалиновое основное вещество в преобладающем количестве и более скудное, мелкозернистое, фибриллярное вещество, внедренное в него. Купфер называет первое параплазмой, последнее — протоплазмой. При нагревании препарата примерно до 22° C в сети появились явные, хотя и слабые движения. Едва ли можно сомневаться, что из этих двух веществ зернистое сетчатое — протоплазма — является более важным; и не было бы ошибочным предположить, что зернистости сети образуют центр специфической (особой) клеточной функции. В любом случае желательно дать специальное название, такое как микросомы (Ханштейн), этим формам, которые в клетках печени распознаваемы как отчетливые, круглые или овальные гранулы, окрашивающиеся в желтый цвет йодом и легко и глубоко окрашивающиеся другими способами».

Необходимо было процитировать полностью эту старую статью, чтобы показать, что Эрлих рассматривал гранулы как особые носители клеточной функции еще в 1883 году, взгляд, который Альтман отстаивал много лет спустя под названием «теория биобластов». Постоянно повторяемое утверждение Альтмана о том, что никто до него не придавал столь высокого значения гранулам, следовательно, находится в противоречии с фактами, которые мы выше сделали достаточно ясными.

Важность, которую Альтман в конечном итоге придал гранулам, которые он также называет именем «озонофоры», показана его собственными словами («Элементарные организмы», 1-е изд., стр. 39):

«Наша концепция озонофоров может, следовательно, заменить концепцию живой протоплазмы, по крайней мере, насколько это касается вегетативной функции; и может служить нам объяснением сложных органических процессов. Еще раз, кратко суммируя свойства озонофоров; как переносчики кислорода они могут выполнять восстановление и окисление и могут, таким образом, осуществлять разложения и синтезы тела, не теряя своей собственной индивидуальности».

Тем временем Эрлих сделал различные наблюдения, которые не могли быть полностью приведены в соответствие с его собственной более ранней гипотезой или далеко идущими выводами Альтмана. Исследования, в частности, потребностей организма в кислороде, показали, что «озонофоры» определенно не могли быть важной частью клетки. Кроме того, было обнаружено, что нормально встречаются клетки, в которых никакие гранулы не могут быть распознаны обычными методами. Наконец, патологическое наблюдение сделало несостоятельным взгляд, что гранулы являются носителями клеточной функции. В случае пернициозной анемии (ср. Farbenanalytische untersuchungen) Эрлих нашел полинуклеарные клетки крови и костного мозга и их ранние формы свободными от всякой нейтрофильной зернистости. На основании этого наблюдения Эрлих вернулся к своему первоначальному предположению, что гранулы являются секреторными продуктами клеток, и определил свою точку зрения в то время следующим образом:

«Если бы нейтрофильные зернистости действительно представляли собой тельца, которые снабжают эти клетки кислородом, как предполагает Альтман, состояние, подобное тому, которое мы здесь представили, было бы невозможно, так как с исчезновением гранул должна была бы последовать смерть клеток. Но с точки зрения теории секреции описанное состояние легко объяснимо. Точно так же, как при определенных условиях жировые клетки могут полностью потерять свое содержимое, не погибая, так и клетка костного мозга, если кровь не дает ей необходимых веществ, может иногда быть неспособна производить больше нейтрофильных гранул. И таким образом она становится незернистой».

Взгляд, что гранулы являются особыми продуктами метаболизма специфической клеточной активности, сильно поддерживается большими химическими различиями между ними. Эрлих прояснил эти особенности для клеток крови и нашел, что их зернистости отличаются друг от друга не только своими цветовыми реакциями, но также своей формой и растворимостью; так что они должны быть резко разграничены.

В то время как, например, большинство гранул являются более или менее округлыми формами, в некоторых классах животных, например у птиц, аналоги гранул крови млекопитающих характеризуются определенной кристаллической формой и сильной оксифилией. Субстанция зернистостей тучных клеток также является кристаллической у некоторых видов животных.

Размер отдельных гранул постоянен у любого вида животных для каждого вида гранул — за исключением только тучных клеток. Эозинофильная зернистость достигает своего наибольшего размера у лошади, где встречаются действительно гигантские примеры.

Присутствие зернистых бесцветных кровяных клеток было продемонстрировано в самых различных классах животных и даже в крови многих беспозвоночных, особенно, как показал Нолль, у пластинчатожаберных, многощетинковых, педатов, оболочников и головоногих. Что касается позвоночных, особенно высших классов, имеются точные и обширные исследования. У птиц мы распознаем две оксифильные зернистости, из которых одна внедрена в клетки в кристаллической, другая — в обычной зернистой форме. Среди позвоночных большинство исследованных классов обладают зернистыми полинуклеарными клетками. Этому обстоятельству Хиршфельд недавно посвятил тщательную статью, содержащую много деталей, заслуживающих внимания. У большинства наблюдаемых животных он также нашел, что полинуклеарные клетки содержали нейтрофильные гранулы; только у одного животного, белой мыши, он нашел их, или аналогичные им зернистости, полностью отсутствующими.

Согласно исследованиям, проведенным несколько лет назад в лаборатории Эрлиха доктором Францем Мюллером, эти результаты Хиршфельда следует признать неточными. После многих тщетных попыток доктору Мюллеру удалось найти метод, с помощью которого в полинуклеарных клетках мыши можно было обнаружить многочисленные, хотя и очень мелкие, гранулы. Этот случай показывает, что недопустимо предполагать отсутствие гранул, если обычные методы окрашивания не дают немедленного результата. Не существует универсального метода окрашивания гранул, так же как и универсального метода окрашивания различных видов бактерий. Действительно, все легкорастворимые гранулы исчезают при использовании триацидного метода, в результате чего создается видимость гомогенной протоплазмы клетки.

Но, разумеется, из этих соображений нельзя отрицать наличие незернистых полинуклеарных клеток у определенных классов животных. Хиршфельд утверждает, что такие клетки встречаются наряду с зернистыми, например, у собаки, и делает из этого далеко идущие выводы о значении гранул. Напротив, основываясь на работе Курлова (см. стр. 85), мы должны настаивать на том, что нет никаких доказательств того, что незернистые полинуклеары идентичны зернистым клеткам. Курлов показал, по крайней мере на крови морской свинки, что эти два гетерогенных элемента должны быть четко отделены друг от друга и что они имеют совершенно различное происхождение.

Особенно важным для теории природы гранул является обстоятельство, что, вообще говоря, у всех видов животных они присутствуют только в тех клетках крови, которые приспособлены к эмиграции и способны к ней. То, что определенная питательная функция должна приписываться эмиграции зернистых клеток, является весьма очевидным предположением, которое вряд ли можно отрицать; и, естественно, клетки с обильным запасом резервного материала чрезвычайно подходят для этой цели. Лимфоциты же, напротив, неспособные к эмиграции, почти полностью лишены специфической зернистости.

Дальнейшим указанием на то, что зернистость действительно связана со специфической клеточной активностью, является тот факт, что одна клетка несет только одну специфическую зернистость. Противоположные утверждения о том, что нейтрофильная и эозинофильная, или эозинофильная и тучноклеточная зернистости встречаются в одной и той же клетке, Эрлих считает необоснованными, основываясь на обширных исследованиях, специально направленных на этот вопрос. Эрлих также не наблюдал превращения псевдоэозинофильной клетки кролика в истинную эозинофильную [23]. То, что такого перехода не происходит, наиболее отчетливо видно из того факта, что различные виды зернистости ведут себя совершенно по-разному по отношению к растворителям. Например, с помощью кислот псевдоэозинофильные гранулы могут быть полностью извлечены из клеток, в то время как эозинофильные гранулы остаются целыми при этом процессе и теперь могут быть окрашены отдельно.

Наиболее ясное доказательство того, что нейтрофильные, эозинофильные и тучные клетки полностью отделены друг от друга фундаментальным различием их протоплазмы, выражением которого является зернистость, дает изучение различных форм лейкоцитоза. Как будет подробно показано в следующей главе, нейтрофильные и эозинофильные лейкоциты ведут себя совершенно по-разному в своей восприимчивости к хемотаксическому раздражению. Вещества, обладающие сильным положительным или отрицательным хемотаксисом для одной группы клеток, как правило, безразличны для другой; часто наблюдается даже прямо противоположное отношение, поскольку вещества, привлекающие один вид, отталкивают другой. Еще больше различие между тучными клетками и двумя другими группами клеток; ибо, насколько позволяют судить современные исследования, они совершенно не подвержены влиянию веществ, обладающих хемотаксисом для нейтрофильных или эозинофильных клеток.

Как специфические клеточные секреты, различные виды гранул также должны быть четко разграничены друг с другом по своим химическим свойствам. Гранулы кровяных телец, по-видимому, имеют очень простое химическое строение. У нас есть особые основания для предположения, что кристаллические гранулы по большей части состоят из одного химического соединения, не обязательно очень сложного, но представляющего собой относительно простое тело, такое как гуанин, жир, меланин и т. д. Несомненно, другие гранулы имеют более сложное строение и очень часто представляют собой смесь различных химических веществ. Самыми сложными гранулами крови являются эозинофильные, которые, как уже упоминалось в другом месте, имеют более сложное гистологическое строение. Ибо периферический слой четко отличается от центральной части гранулы. Следует отметить, что, согласно Баркеру, эозинофильные гранулы, по-видимому, содержат железо.

Краеугольным камнем гипотезы о секреторной природе гранул является прямое наблюдение секреторного процесса в клетках, несущих гранулы. Естественно, эти исследования представляют чрезвычайные трудности, поскольку только совпадение ряда счастливых обстоятельств позволило бы проследить переход растворенного вещества гранул в окружающую среду. Кантак и Харди удалось продемонстрировать секреторную природу эозинофильных гранул у лягушки. Когда, например, бациллы сибирской язвы вводятся в спинной лимфатический мешок лягушки, они оказывают положительный хемотаксис на эозинофильные клетки. Последние вступают в контакт с бациллами и остаются прикрепленными к ним в течение некоторого времени. В этот период Кантак и Харди наблюдали выделение гранул из этих клеток, которые теперь обладают относительно гомогенной протоплазмой. Впоследствии эти клетки удаляются от бацилл, и их место занимают полинуклеарные нейтрофильные клетки, о чем будет сказано позже. Эти авторы далее смогли наблюдать постепенное накопление гранул в эозинофильных клетках в лимфе, сохраняемой под микроскопическим наблюдением в виде висячей капли, и таким образом продемонстрировали, что они проходят две стадии, характерные для секреции: (1) появление гранул внутри клеток, (2) выделение этих гранул наружу.

Тучные клетки также кажутся подходящими для этой цели, поскольку их специфическое вещество сильно характеризуется своеобразным метахроматическим окрашиванием и, кроме того, особенно легко распознается, так как благодаря своему большому сродству к основным красителям оно остается четко окрашенным даже в препаратах, которые почти полностью обесцвечены. Фактически, нередко встречаются проявления тучных клеток, которые следует отнести к экскреторным процессам такого рода.

Прежде всего, иногда можно наблюдать, что зернистость тучных клеток растворяется внутри клетки и диффундирует в растворе в ядро. Вместо хорошо известной картины тучной клетки (см. стр. 76) с бесцветным ядром, окруженным глубоко окрашенной метахроматической зернистостью, присутствует ядро, интенсивно и гомогенно окрашенное в тон зернистости тучной клетки, окруженное протоплазмой, в которой видны лишь следы гранул.

Еще более убедительным является наличие своеобразного ореола у тучных клеток, описанного различными авторами. Эрлих впервые кратко упомянул об этом ореоле в своей книге о потребности организма в кислороде. Несколько лет назад Унна, до которого, несомненно, не дошло замечание Эрлиха, описал аналогичное состояние следующим образом: «в некоторых узелках тучные клетки казались отчасти вдвое больше обычного, особенно при окрашивании новым красителем для тучных клеток (полихромный метиленовый синий, смесь глицеринового эфира). Это было вызвано окрашиванием большого круглого ореола, в центре которого лежала своеобразная, давно известная тучная клетка, состоящая из синего ядра и ареолы темно-красных гранул. Большое увеличение показало, что ореол был не зернистым, а очень мелкосетчатым, хотя он имел точно такой же красный цвет, как и гранулы. Следовательно, это была спонгиоплазма, свойственная этим тучным клеткам».