«Токсичность кофеина: экспериментальное исследование на различных видах животных»

Серия D.

Целью этой серии экспериментов было получение дополнительных данных относительно устойчивости различных пород кроликов к кофеину и установление наименьшей дозы, которая является безусловно фатальной для серого кролика или бельгийского зайца. Диета во всех случаях состояла из овса, который давался ad libitum, за исключением кролика № 235, который получал морковь в течение одной недели перед инъекцией кофеина. Введенные дозы варьировались от 267 до 300 мг на килограмм и вводились взрослым кроликам разных пород.

Rabbit 253. Brown and black, male. Weight, 1,600 grams. Diet, oats, November 9 to 12.

12 ноября: 11:30, моча из мочевого пузыря кислая, альбумина нет, сахара нет; 11:35, 22 см³ 2-процентного раствора кофеина (275 мг на килограмм) введено подкожно; 11:45, кролик спрыгнул со стола, начались судороги, запрокидывание головы и опистотонус, общий тремор, передние конечности вытянуты, задние конечности почти нормальные, частые подергивания; умер в 12:15.

Rabbit 252. Black, female. Weight, 1,335 grams. Diet, oats, November 9 to 12.

12 ноября: 11:30, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (270 мг на килограмм) введено подкожно. Моча, полученная из мочевого пузыря перед инъекцией, кислая, альбумина нет, сахара нет, цвет нормальный, тремор и сильное возбуждение замечены около 12:00; 16:30, при прикосновении проявил необычное беспокойство и возбуждение, за которыми последовали судороги с опистотонусом; периодические подергивания, состояние плохое. Умер в 16:35.

Rabbit 327. White, female. Weight, 820 grams. Diet, oats, March 8 to 16.

16 марта: 11:45, 12 см³ 2-процентного раствора кофеина (292 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:00, найден мертвым, но был еще теплым. Вскрытие: Геморрагический участок в месте инъекции в спинные мышцы; подкожная область брюшной полости демонстрировала обширный участок творожистого гнойного материала; печень и селезенка были полнокровны; мочевой пузырь наполнен; кишечник в норме.

Rabbit 340. White and brown male. Weight, 1,465 grams. Diet, oats.

March 30: 3.20 p. m., 20 cc of 2 per cent caffein (273 mg per kilo) injected subcutaneously in back.

31 марта: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 341. White and brown. Weight, 1,450 grams. Diet, oats.

30 марта: 15:20, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (270 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:40, найден в умирающем состоянии, были судороги; 16:45, мертв.

Rabbit 326. White, male. Weight, 1,645 grams. Diet, oats, March 8 to 16.

16 марта 1910 г.: 12:00, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (243 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:00, тремор выражен, гиперчувствительность, начал бегать, когда его поставили на пол; кролик не подвергался никаким манипуляциям, кроме необходимых для извлечения из клетки и возвращения в нее.

17 марта: 9:30, тремор все еще присутствует и выражен, в остальном общее состояние хорошее; других симптомов нет.

18 марта: 9:30, аппетита нет, тремор все еще присутствует, общее состояние плохое; умер около 14:00.

Rabbit 235. Belgian hare, male. Weight, 1,870 grams. Diet, carrots, November 2 to 9.

10 ноября: 11:05, 25 см³ 2-процентного раствора кофеина (267 мг на килограмм) введено подкожно; рефлексы усилены и тремор, но тетануса не наблюдалось; найден мертвым на следующее утро.

Rabbit 316. Belgian hare, female. Weight, 860 grams. Diet, oats, March 8 to 16.

16 марта 1910 г.: 11:40, 12 см³ 2-процентного раствора кофеина (267 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:15, рефлексы несколько усилены, но не значительно; ходил, когда его поставили на пол; походка неуклюжая и медленная; наблюдался тремор головы; 14:35, кролик лежит в клетке, задние конечности вытянуты и ригидны, передние конечности согнуты, голова запрокинута; все еще дышит; наблюдались периодические спазмы. Кролик умер в 15:00. Вскрытие: Поражений в месте инъекции в дорсальных спинных мышцах нет; печень и селезенка полнокровны; кишечник инъецирован; другие органы, по-видимому, в норме.

Rabbit 395. Belgian hare, male. Weight, 1,410 grams.

18 августа: 13:00, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (283 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:00, рефлексы значительно усилены; 17:00, рефлексы примерно такие же, но тетануса нет.

19 августа, 9:15: Рефлексы значительно усилены.

August 21, weight, 1,215 grams. Given 275 mg per kilo of caffein; no symptoms observed.

23 августа, найден мертвым. Вскрытие: Печень сильно полнокровна; желудок довольно хорошо растянут, слизистая оболочка в состоянии легкого воспаления; содержимое тонкой кишки жидкое по своей природе, но ее стенки выглядели нормальными; другие органы нормальны на вид.

Rabbit 396. Belgian hare, female. Weight, 1,475 grams. Diet, oats.

18 августа: 13:00, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (272 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:00, рефлексы значительно усилены; 17:00, рефлексы значительно усилены, но тетануса нет.

19 августа: 10:30, рефлексы все еще очень значительно усилены; кролик подпрыгивает при прикосновении.

21 августа: Вес 1245 граммов. Введено подкожно 275 мг кофеина на килограмм; рефлексы усилены, задние конечности стали жесткими через час.

22 августа: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Грудные органы нормальны на вид; желудок растянут, слизистая оболочка поражена катаральным воспалением; содержимое желудка было покрыто блестящей слизью; содержимое тонкой кишки жидкое и окрашено желчью; печень показала кокцидиозную инвазию; почки и селезенка нормальны на вид.

Rabbit 397. Belgian hare, male. Weight, 1,375 grams. Diet, oats.

August 19: 10.30 a. m., 20 cc 2 per cent caffein (290 mg per kilo) injected subcutaneously in the back.

22 августа: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Желудок растянут содержимым; слизистая оболочка демонстрировала катаральное воспаление с чрезмерными выделениями; большая часть кишечника показала состояние, аналогичное состоянию желудка, содержимое состояло в основном из блестящей слизи; печень увеличена; другие органы, по-видимому, в норме.

Rabbit 398, Belgian hare, female. Weight, 1,570 grams. Diet, oats.

19 августа: 10:30, 23 см³ 2-процентного раствора кофеина (293 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:00, найден мертвым. Вскрытие: Грудные органы, по-видимому, нормальны; слизистая оболочка желудка демонстрировала катаральное воспаление в целом; толстая кишка несколько уплотнена, но стенки выглядели нормальными; другие органы в норме.

Rabbit 399, Belgian hare, male. Weight, 1,725 grams. Diet, oats.

19 августа: 10:30, 26 см³ 2-процентного раствора кофеина (300 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; найден мертвым в 16:30. Вскрытие: Легкие слегка полнокровны; печень полнокровна и хрупкая; желчный пузырь хорошо наполнен; желудок демонстрировал катаральный гастрит; инъекция брыжейки и кишечника; почка показала выраженное корковое полнокровие.

Результаты экспериментов этой серии также указывают на то, что бельгийский заяц более устойчив к кофеину, чем кролики других разновидностей. Так, из четырех серых кроликов (№ 235, 316, 395 и 396), которые получили от 267 до 283 мг кофеина на килограмм, двое погибли и двое выжили, один из которых, 396, показал наличие кокцидиоза печени. С другой стороны, можно заметить, что черно-белые кролики, которые получили от 270 до 275 мг кофеина на килограмм, все погибли от воздействия препарата; один в течение 1 часа 25 минут и другой в течение 50 часов после введения кофеина, в то время как № 340 умер ночью. Более того, следует отметить, что из последних трех кроликов этой серии, которые были бельгийскими зайцами и получили 290, 293 и 300 мг кофеина, двое погибли через шесть часов после инъекции, в то время как другой, № 397, прожил три дня. Минимальная летальная доза кофеина для бельгийских зайцев составляет, таким образом, около 290–300 мг на килограмм при подкожном введении, что примерно на 50 процентов больше, чем для кроликов других разновидностей.

Серия E.

В серии A было показано, что 0,15 кофеина на килограмм вызывало симптомы интоксикации. Однако, прежде чем сделать вывод, что это наименьшая доза, вызывающая симптомы отравления, был проведен ряд экспериментов с меньшими дозами. Было обнаружено, что в подавляющем большинстве случаев 0,1 кофеина на килограмм может вызывать диурез, но не нервные или мышечные симптомы. У некоторых кроликов, однако, даже такая доза оказывалась фатальной. Посмертные исследования в этих случаях показали наличие кокцидиоза печени, и следует напомнить, что подобные наблюдения делались ранее. Вполне возможно, поэтому, что кокцидиоз печени является важным фактором в снижении устойчивости к кофеину. Эксперимент 551 (стр. 25) показывает, что другие состояния могут также повышать токсичность кофеина.

Rabbit 325. White, female. Weight, 1,065 grams. Diet, oats.

17 марта: 11:00, 6 см³ 2-процентного (112 мг на килограмм) раствора кофеина введено подкожно в область спины. Около 5 см³ мочи выдавлено из мочевого пузыря перед введением кофеина.

17 марта: 13:00, задние лапы скрещены и вытянуты, передние лапы также вытянуты; кролик лежит, вытянувшись на животе.

17 марта: 17:40, кролик все еще жив, состояние несколько улучшилось.

18 марта: 9:00, найден мертвым, жестким и холодным. Вскрытие: Геморрагический участок в месте инокуляции; подкожная область обоих бедер представляла геморрагическую инфильтрацию тканей; печень содержала очаги кокцидиоза; другие органы, по-видимому, в норме.

Rabbit 330. Belgian hare, female. Weight, 935 grams; poorly nourished.

18 марта: 15:35, 5 см³ 2-процентного раствора кофеина (107 мг на килограмм) введено в подкожные ткани спины; 17:30, симптомов нет.

19 марта: 9:00, симптомов нет.

March 25: Weight, 825 grams.

Rabbit 329. Belgian hare, male. Weight, 775 grams; poorly nourished. Received March 18.

18 марта: 15:30, 4 см³ 2-процентного раствора кофеина (103 мг на килограмм) введено в подкожные ткани спины; 17:30, симптомов нет.

19 марта: 9:00, симптомов нет.

March 25: Rabbit alive in good condition; weight, 825 grams.

Rabbit 320. Black, male. Weight, 1,040 grams. Diet, oats.

17 марта: 11:00, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина (115 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; перед введением кофеина из мочевого пузыря получено лишь несколько капель мочи; 13:00, кролик очень беспокоен; убежал, когда его поставили на пол; пищал, когда его коснулись кусочком бумаги; тремора не наблюдалось, но кролик стал истощенным и не мог ходить; лапы вытянуты; после бега в течение примерно минуты одышка была очень выраженной, но кролик вскоре поднялся на лапы; 17:40, кролик стоит на лапах.

18 марта: 9:00, найден мертвым, но все еще теплым. Вскрытие: Легкие усеяны мелкими серовато-белыми узлами, спайки с реберной плеврой; вероятно, очаги кокцидиоза; печень усеяна узлами кокцидиоза. Кровоизлияния в месте инокуляции.

Кролик 551. Серый, самка. Вес 26 января 1650 граммов. Диета: овес; с 26 по 31 января ежедневно получал 20 см³ 25-процентного спирта.

31 января: Вес 1450 граммов; 10:20, температура 101,6°; 10:45, температура 101,6°; получил 7 см³ 2-процентного раствора кофеина подкожно в спину; 11:15, кратковременные судороги; поднялся на задние лапы, передние лапы широко расставлены; 16:10, выглядел нормально, не гиперчувствителен; 16:30, состояние казалось хорошим.

1 февраля: 9:00, найден мертвым, был жив в 17:30 предыдущего дня. Вскрытие: Обнаруженные поражения затрагивали в основном грудную полость; легкие были гепатизированы, а фибропластический экссудат вызвал их сращение с реберной плеврой; печень полнокровна и выглядела жирной; выраженных поражений, затрагивающих пищеварительный тракт, нет, легкий катар желудка был единственной заметной особенностью; почки и селезенка в норме.

Таблица 1. — Подкожные инъекции кофеина — кролики.

SERIES A. No. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms inDuration of life. Diet. Remarks. Grams. Mg. 332 1,070 1581 hour 45 minutesSurvived OatsGray. 331 1,170 153do.do.do.Do. 328 1,200 150do.do.do.Do. 322 1,065 1501 hourdo.do.White. 217 1,355 147do.do.Do. 219 1,820 153do.do.Maltese. 194 1,490 174do.do.White. 191 1,915 167do.do.Light brown. SERIES B, GROUP I. 95 1,478 2102 hours 50 minutes3 hours 10 minutesOatsWhite. 96 1,585 2001 hourAbout 18 hoursdo.Gray white. 112 875 20530 minutesdo.do.Black. 119 1,060 188do.do.Yellow white. 195 1,300 2003 hours 10 minutesCarrotsWhite. 208 1,068 1882 hoursAbout 24 hoursdo.Gray. SERIES B, GROUP II. 247 1,295 2002.5 hoursSurvivedOatsGray. 248 1,305 2003 hoursdo.do.Do. 337 1,040 2111.5 hoursdo.CarrotsDo. 336 1,045 211do.do.do.Do. SERIES C. 122 2,060 2502 hours 55 minutes1.5 daysOatsWhite. 234 1,650 242About 24 hoursCarrotsDo. 335 1,170 2401 hourdo.do.Gray coccidiosis. 249 1,185 2364 hoursSurvivedOatsGray. 321 1,135 2462 hours 10 minutesdo.do.Yellow. 250 1,435 2524 hours 35 minutesdo.do.Gray. 334 1,270 2401 hourdo.CarrotsDo. 233 1,675 2386 hours 10 minutes26 hoursdo.White. SERIES D. 253 1,600 27510 minutes35 minutesOatsBrown and black. 252 1,335 27030 minutes4 hours 55 minutesdo.Black. 327 820 2922 hours 15 minutesdo.White. 340 1,465 273About 18 hoursdo.White and brown. 341 1,450 2701 hour 25 minutesdo.Do. 326 1,645 2432 hours50 hoursdo.White. 235 1,875 26720 hoursCarrotsGray. 316 860 2672 hours 45 minutes3 hours 20 minutesOatsDo. 395 1,410 2833 hoursSurvivedDo. 395 1,215 275do.About 2 daysOatsDo. 396 1,475 272do.Surviveddo.Do. 396 1,245 2751 hourAbout 18 hoursdo.Do. 397 1,375 2903 daysdo.Do. 398 1,570 2935.5 hoursdo.Do. 399 1,725 3006 hoursdo.Do. SERIES E. 325 1,065 1122 hoursLess than 22 hours OatsWhite female. 330 935 107NoneSurvivedGray. 329 775 103do.do.Gray male. 320 1,040 1152 hours46 hours OatsBlack male. 551 1,450 10030 minutesLess than 24 hoursdo.Gray female.

ВВЕДЕНИЕ ЧЕРЕЗ РОТ.

Эти эксперименты проводились на двух разновидностях кроликов, белых и серых. Диета состояла преимущественно из овса, но в нескольких случаях морковь составляла исключительную диету. Пища и вода давались ad libitum. 2-процентный раствор кофеина вводился через желудочный зонд. Поскольку принято считать, что устойчивость к большинству лекарств выше при приеме через рот, чем при введении любым другим путем, в серии предварительных экспериментов вводились дозы от 175 до 200 мг на килограмм; все они были выполнены на серых кроликах весом от 865 до 1135 граммов, которых в течение нескольких дней перед экспериментом кормили морковью. Трое кроликов выжили, двое без проявления каких-либо симптомов; в другом случае через пять часов после получения кофеина наблюдался паралич задних конечностей, и на следующее утро он был найден мертвым. К сожалению, вскрытие не проводилось. Низкая устойчивость этого животного к кофеину, вероятно, была обусловлена каким-то аномальным состоянием, развившимся примерно во время эксперимента, поскольку двумя неделями ранее этот кролик получил 325 мг кофеина на килограмм, и в результате этого воздействия наблюдалось лишь усиление рефлексов. Следовательно, 200 мг кофеина на килограмм нельзя считать токсичной дозой при введении через рот. Поэтому в следующих экспериментах вводились более высокие дозы.

Серия A.

Rabbit 248. Belgian hare. Weight, 1,170 grams. Diet, oats.

17 ноября: 13:20, 19,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (330 мг на килограмм) введено через рот; 16:30, несколько гиперчувствителен.

19 ноября: Симптомов нет; в 9:00 собрана моча, восстановления реактива Фелинга нет; кролик выжил.

Rabbit 241. White male. Weight, 1,380 grams. Diet, oats.

17 ноября: 13:15, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (290 мг на килограмм) введено через рот; 16:30, некоторая гиперчувствительность, но других симптомов нет.

18 ноября: 9:00, собрана моча, восстановления реактива Фелинга нет; симптомов нет; кролик выжил.

Rabbit 249. Belgian hare. Weight, 890 grams. Diet, oats.

17 ноября: 13:30, введено 14,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (325 мг на килограмм); 16:30, гиперчувствительность; других симптомов нет.

18 ноября: 10:00, симптомов нет; собрана моча, восстановления нет; кролик выжил.

Серия B.

Целью этих экспериментов было определение минимальной летальной дозы кофеина для двух разновидностей кроликов, белых и серых. Все выбранные животные были примерно одного веса.

Rabbit 239. Belgian hare, male. Weight, 935 grams. Diet, oats.

19 ноября: 16:00, 17 см³ 2-процентного раствора кофеина (363 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 10 см³ 0,9-процентного солевого раствора.

20 ноября: Моча исследована, сахара не обнаружено, никаких симптомов после инъекции не замечено.

Rabbit 254. Belgian hare, female. Weight, 975 grams. Diet, oats.

19 ноября: 16:05, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (369 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 10 см³ 0,9-процентного солевого раствора.

20 ноября: 9:00, кролик найден мертвым.

Rabbit 267. White. Weight, 1,050 grams. Diet, oats.

23 ноября: 12:10, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (342 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 18 см³ солевого раствора; 13:00, усиление рефлексов, тремор выражен, но тетануса нет; 13:05, кролик растянулся на животе, задние конечности в вытянутом положении и парализованы, вскоре начались клонические судороги, которые повторялись примерно каждую минуту; 13:14, тетанус и смерть. Вскрытие: Печень показала жировую дегенерацию; легкое воспаление желудка и кишечника; другие органы в норме.

Rabbit 268. White. Weight 1,100 grams. Diet, oats.

23 ноября: 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (363 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 20 см³ солевого раствора; 13:15, несколько гиперчувствителен; 16:30, тремор довольно выражен, моча не отходила, из мочевого пузыря получено около 2 см³ мочи кровавого вида, которая содержала альбумин и значительное количество гликогена; кролик умер.

Rabbit 419, Belgian hare, male. Weight, 1,600 grams. Diet, oats.

26 сентября: 10:00, 28 см³ 2-процентного раствора кофеина (350 мг на килограмм) введено через рот; рефлексы усилены в 16:00; 18:00, рефлексы все еще усилены, других симптомов нет.

27 сентября: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Легкие, печень и почки полнокровны; другие органы в норме.

Rabbit 420. Belgian hare, male. Weight, 1,250 grams. Diet, oats.

26 сентября: 10:00, 22 см³ 2-процентного раствора кофеина (352 мг на килограмм) введено через рот; 11:35, судороги; 12:00, найден мертвым. Вскрытие: Печень показала очень обширный кокцидиоз; других поражений нет.

Rabbit 421. Belgian hare, male. Weight, 1,485 grams. Diet, oats.

26 сентября: 10:00, 26 см³ 2-процентного раствора кофеина (351 мг на килограмм) введено через рот; 16:00, рефлексы усилены; 18:00, рефлексы как прежде, тетануса не наблюдалось.

27 сентября: 9:00, кролик найден мертвым. Вскрытие: Полнокровие легких и почек; печень полнокровна и слегка жирная.

Rabbit 424. White, male. Weight, 1,295 grams. Diet, oats.

26 сентября: 14:00, 19 см³ 2-процентного раствора кофеина (293 мг на килограмм) введено через рот; 16:00, рефлексы усилены, других симптомов нет; 18:00, изменений с 16:00 нет.

27 сентября: 12:00, судороги и смерть. Вскрытие: Полнокровие легких; других поражений нет.

Rabbit 423. White, male. Weight, 1,205 grams. Diet, oats.

26 сентября: 14:00, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина введено через рот; 16:00, рефлексы усилены, тетануса нет; 18:00, состояние без изменений с 16:00.

27 сентября: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Легкие, печень и почки полнокровны; другие органы в норме.

Rabbit 422. White, male. Weight, 1,440 grams. Diet, oats.

September 26: 2 p. m., 21 cc 2 per cent caffein (291 mg per kilo) given by mouth; reflexes increased at 4 p. m.

27 сентября: 15:00, жив, симптомов нет; 16:00, судороги с последующим восстановлением, вскоре последовал сильный приступ тетануса, который длился около минуты и сменился параличом; кролик умер в 16:30. Вскрытие: Печень слегка полнокровна; небольшая часть кишечника показала полнокровие и отек; другие органы в норме.

Изучение этих экспериментов показывает также значительную вариативность токсичности кофеина при введении через рот. В некоторых случаях доза 300 мг на килограмм и даже меньше вызывала смерть, как у кроликов 423 и 424. У других кроликов, однако, примерно такие же дозы кофеина вызывали только усиление рефлексов. Те же симптомы были вызваны у № 248 и 249 после введения 325–330 мг кофеина на килограмм, в то время как другой кролик (№ 239) пережил дозу 363 мг на килограмм. Однако то, что это исключение, видно из результатов следующих экспериментов на кроликах № 419, 420 и 421, все из которых погибли после получения 350 мг кофеина на килограмм, и кроликах 267 и 268, для которых дозы 363 и 342 мг на килограмм соответственно оказались фатальными. Далее следует заметить, что серые кролики более устойчивы к кофеину, чем белые животные, так как 350 мг на килограмм были наименьшей летальной дозой для кроликов 419, 420 и 421, все из которых были серыми кроликами, в то время как доза 290 мг на килограмм была фатальной для некоторых белых кроликов. Опять же, будет замечено, что из двух серых кроликов, № 254 и 239, которые получили наибольшие дозы в этих экспериментах, а именно 369 и 363 мг соответственно, один выжил. Наибольшие дозы, данные белым кроликам, составляли 363 и 342 мг кофеина на килограмм. Оба погибли от воздействия препарата. Можно сделать вывод, что минимальная токсичная доза для серого кролика составляет около 325 мг кофеина на килограмм, а минимальная летальная доза — не менее 350 мг на килограмм. В этой связи следует отметить, что посмертное исследование показало обширный кокцидиоз у кролика 420 и жировую печень у № 421, в то время как макроскопическое исследование органов № 424 и 423 не выявило наличия таких аномалий. Поскольку, как наблюдалось в разделе о подкожной инъекции и в других местах этого исследования, патологические изменения склонны снижать устойчивость к кофеину, вполне возможно, что 350 мг на килограмм не является минимальной летальной дозой для нормального кролика. Действительно, эксперимент на кролике 239 подтверждает эту точку зрения, тем самым предоставляя дополнительные доказательства различия в устойчивости к кофеину у двух разновидностей кроликов.

Таблица 2. — Введение кофеина через рот.

SERIES A. Rabbit No. Weight.Caffein per kiloSymptoms.Duration of life. Diet. Remarks. Grams. Mg. 248 1,170 3303 hoursSurvivedOatsGray. 241 1,380 2902 hoursdo.do.White male. 249 890 3253 hoursdo.do.Gray male. SERIES B. 239 935 363SurvivedOatsGray male. 254 975 369About 2 daysdo.Gray female. 267 1,050 34250 minutes1 hourdo.White. 268 1,100 363About 3 hoursdo.Do. 419 1,600 3506 hoursLess thando.Gray male. 420 1,250 3521 hour2 hoursdo.Do. 421 1,485 3516 hoursLess thando.Do. 424 1,295 2932 hours22 hoursdo.White male. 423 1,205 300do.Less thando.Do. 422 1,440 291do.2½ hoursdo.Do.

ИНЪЕКЦИЯ В БРЮШНУЮ ПОЛОСТЬ.

В ряде экспериментов кофеин вводился в брюшную полость. Для этой цели использовались кролики разных пород, получавшие диету из овса или моркови; пища и вода давались ad libitum. Были определены минимальные дозы, необходимые для вызова симптомов или смерти у этих животных; тесты с кофеином также проводились на молодых кроликах для изучения влияния возраста на устойчивость к этому веществу. Результаты показаны в следующих экспериментах:

Серия A.

В этой серии вводились большие дозы, приближающиеся к 0,3 грамма на килограмм.

Rabbit 71. Gray female. Weight, 1,659 grams.

20 января: 14:20, 25 см³ водного раствора 2-процентного кофеина (300 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 15:45, когда открыли дверцы клетки, у кролика был кратковременный спазм.

21 января: Кролик найден мертвым.

Rabbit 72. Gray and white. Weight, 1,402 grams.

21 января: 11:17, 20,2 см³ (водного раствора) 2-процентного кофеина (300 мг на килограмм) введено в брюшную полость из бюретки; 11:25, паралич; 11:30, у кролика начались судороги, когда его подняли с пола, за которыми позже последовали несколько спазмов; 11:35, типичный тетанус; 12:30, найден мертвым.

Rabbit 61. Black female. Weight, 2,143 grams.

19 января: 40 см³ 2-процентного раствора кофеина, водный раствор (300 мг на килограмм), введено в брюшную полость из бюретки; тетанус, когда было введено около 30 см³; при извлечении из держателя — повторяющиеся и сильные судороги, закончившиеся смертью.

Серия B.

Целью этих экспериментов было определение минимальной летальной дозы; кроликам этой серии вводилось от 0,2 до 0,15 грамма кофеина на килограмм.

Rabbit 69. White female. Weight, 1,714 grams.

20 января: 10:15, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина, водный раствор, введено в брюшную полость. Симптомов нет, под наблюдением в течение 45 минут, кролик дефецировал довольно обильно; фекалии были мягкими; 11:00, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина, водный раствор, введено в брюшную полость, симптомов нет, под наблюдением в течение 40 минут; 11:40, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина введено в брюшную полость; 11:45, кролик беспокоен, рефлексы усилены.

Rabbit 70. Gray and white female. Weight, 1,487 grams.

20 января: 13:30, 15 см³ 2-процентного водного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 14:20, симптомов нет.

30 января: Около 14:00 кролик умер.

1 февраля: Вскрытие: Цирроз печени; энтерит тонкой кишки; желудок и почки в норме.

Rabbit 93. Maltese, male. Weight, 1,197 grams.

2 марта: 11:30, 12 см³ 2-процентного раствора кофеина (200 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 11:35, во время освобождения из держателя произошел тетанус, позже повторяющиеся приступы, клонические судороги с тонической ригидностью задних конечностей во время приступов, а также в интервалах, передние конечности были расслаблены в интервалах между приступами, наблюдались опистотонус шейного отдела, но кифоз в поясничном отделе, слюнотечения или расширения зрачков не было; 14:00, кролик умер.

Rabbit 92. Yellow female. Weight, 1,388 grams.

25 февраля, 16:15, 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 16:20, беспокойство и усиление рефлексов, кролик найден растянувшимся в клетке, но снова поднялся на лапы; 16:45, общий тремор при прикосновении.

26 февраля: 9:00, кролик найден мертвым. Вскрытие: Кровоизлияние в брюшные мышцы в месте инъекции; кровоизлияние также в стенках желудка напротив аналогичного места в брюшной стенке.

Rabbit 309. Belgian hare, female. Weight, 1,500 grams. Diet, oats.

2 марта: 14:05, 2-процентный раствор кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 14:25, найден мертвым, в мочевом пузыре мочи не обнаружено.

Rabbit 307. Belgian hare, female. Weight, 1,320 grams. Diet, oats.

2 марта: 12:00, моча получена из мочевого пузыря, прозрачная янтарного цвета, альбумина нет, восстановления нет; 12:06, 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,151 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 13:30, кролик поставлен на пол, бегает, но передние и задние конечности вскоре вытянулись, в тоническом состоянии; 14:25, рефлексы усилены, паралич конечностей, одышка; 16:50, собрано около 100 см³ мочи, альбумина нет, восстановление реактива Фелинга умеренное.

3 марта: 9:30, задние конечности вытянуты и ригидны, передние конечности парализованы, дыхание менее частое и глубже нормального. Кролик умер в 11:50; моча, собранная с 16:50 предыдущего дня, дала очень сильное восстановление реактива Фелинга. Вскрытие: Животное в хорошем состоянии; в левой подмышечной области наблюдалось кровоизлияние в подкожную и мышечную ткань этой области. Вентральная часть толстой кишки, соприкасающаяся с вентральной брюшной стенкой, показала геморрагический участок длиной около полудюйма, такой, какой мог быть вызван проколом или ушибом кишки через брюшную стенку. Небольшая часть тонкой кишки, прилегающая к толстой, была поражена аналогичным образом. Все внутренние органы были, по-видимому, нормальными.

Rabbit 308. Belgian hare, female. Weight, 1,350 grams. Diet, oats.

2 марта: 11:45, моча получена из мочевого пузыря, альбумина нет, восстановления нет; 11:50, 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,15 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 13:30, не очень активен, других аномальных симптомов нет; 15:30, кролик выглядел подавленным, делал очень мало попыток двигаться, оставался в одном положении большую часть времени, когда его ставили на пол; 16:30, собрано 180 см³ мочи, альбумина нет, восстановление реактива Фелинга умеренное.

3 марта: 9:30, кролик выглядит нормально, способен ходить, но легко утомляется, когда его заставляют ходить или когда кладут на бок, за чем следует паралич передних конечностей, задние конечности, по-видимому, нормальны, около 90 см³ мочи, собранной в полдень, были свободны от альбумина, не восстанавливали реактив Фелинга.

4 марта: 11:00, лежит на боку в клетке, передние конечности вялые, задние конечности вытянуты и ригидны, находится в умирающем состоянии.

5 марта: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Печень полнокровна; селезенка полнокровна, но не увеличена; почки, некоторое полнокровие в корковом слое; желудок наполнен, слизистая оболочка утолщена и легко снимается; петехиальные кровоизлияния на серозной оболочке толстой кишки.

Серия C.

Эксперименты этой серии были проведены для определения минимальной токсичной дозы.

Rabbit 295. Belgian hare, female. Weight, 1,205 grams. Diet, carrots.

1 марта: 10:40, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; около 2 см³ мочи получено перед введением кофеина; 14:00, собрано 100 см³ мочи кровавого вида, присутствует умеренное количество альбумина, восстановления нет; 15:40, симптомов нет.

4 марта: 14:00, кролик выглядит хорошо.

Rabbit 293. Belgian hare, female. Weight, 1,605 grams. Diet, carrots.

1 марта: Моча из мочевого пузыря прозрачная, щелочная; 11:55, 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 15:00, собрано 90 см³ мочи нормального цвета, альбумина нет, восстановления нет; 15:40, симптомов нет.

4 марта: 13:15, кролик выглядит нормально.

Rabbit 292. Belgian hare, male. Weight, 1,595 grams. Diet, carrots.

1 марта: 10:10, 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 10:40, кролик помочился, рефлексы усилены, но других симптомов нет; 10:50, мочи из мочевого пузыря не получено; 14:00, собрано 105 см³ прозрачной бледной мочи; альбумина нет, восстановления нет; 15:40, симптомов нет.

4 марта: 14:00, кролик выглядит хорошо, моча собрана, сахара не содержала.

Rabbit 298. Belgian hare, female. Weight, 1,205 grams. Diet, carrots.

1 марта: 16:06, 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,125 грамма на килограмм) введено в брюшную полость, моча получена из мочевого пузыря сразу после инъекции, альбумина нет, восстановления нет; 17:30, рефлексы усилены, кролик был способен бегать, но вскоре парализовался; 17:40, кролик снова способен бегать.

3 марта: 10:00, передние конечности парализованы, способен использовать задние конечности.

4 марта: 13:00, кролик выглядит нормально.

Rabbit 223. Belgian hare, male. Weight, 1,165 grams. Diet, carrots.

1 марта: 15:50, моча, полученная из мочевого пузыря, прозрачная, янтарного цвета, без белка и сахара; 15:52, в брюшную полость введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (125 мг на килограмм); 17:40, кролик почти не пытается бежать, когда его ставят на пол, выражена слабость конечностей.

4 марта: 13:15, кролик в норме.

Серия D.

Целью экспериментов этой серии было изучение влияния возраста на устойчивость к кофеину. Поэтому в следующих экспериментах использовались кролики среднего возраста.

Rabbit 310. Belgian hare, female. Weight, 880 grams. Diet, oats.

March 2: 3.25 p. m., 9 cc 2 per cent caffein (0.2 gram per kilo) injected into peritoneal cavity.

3 марта: 9:30, симптомов нет, кролик выглядит нормально.

4 марта: 11:00, задние конечности отведены, при помещении на пол ходил, не пытался сменить позу, когда его положили на бок, оставался в этом положении некоторое время.

5 марта: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: печень показала участки дегенерации; почки — застой крови и петехиальные кровоизлияния на коре; тонкий и толстый кишечник — выраженное воспаление; мочевой пузырь растянут.

Rabbit 75. Gray and white, female. Weight, 842 grams.

25 января: 15:00, в брюшную полость введено 8,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 15:15, передние конечности слабые, рефлексы усилены.

27 января: кролик парализован, но способен перевернуться, если его положить на спину.

Rabbit 74. Gray and white, female. Weight, 692 grams.

25 января: 15:00, в брюшную полость введено 7 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 15:15, рефлексы усилены, передние конечности парализованы.

27 января: кролик оправился и может ходить по комнате.

Rabbit 312, maltese, female. Weight, 740 grams. Diet, oats.

3 марта: 11:47, моча, полученная из мочевого пузыря, нормального вида, белка нет, реакция с реактивом Фелинга отрицательная; 11:50, в брюшную полость введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 14:30, передние конечности парализованы, задние конечности ригидны и вытянуты; около 17:00 кролик умер.

Rabbit 311. Belgian hare, female. Weight, 650 grams. Diet, oats.

3 марта: 11:26, моча, полученная из мочевого пузыря, нормального вида, значительное содержание белка, реакция с реактивом Фелинга отрицательная; 11:27, в брюшную полость введено 6 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 14:30, кролик казался нормальным, симптомы не развились; собранная моча содержала большое количество сахара, реакция была очень сильной, но белка не обнаружено.

4 марта: 11:00, состояние хорошее, передвигается, когда его ставят на пол; походка нормальная.

Кролик 78. Желто-белый. Вес 659 граммов.

26 января: 13:30, в брюшную полость введено 8,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм), под наблюдением остаток дня, симптомов нет.

27 января: 16:00, симптомы не развились.

Кролик 317. Бельгийский заяц, самка. Вес 635 граммов. Диета: овес.

15 марта: 10:35, в брюшную полость введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,252 грамма на килограмм); 12:00, выраженное отведение задних ног, не мог ходить после небольшого усилия, кролик умер между 12:30 и 12:50. Вскрытие: правое легкое гепатизировано и имело спайки с реберной и медиастинальной плеврой; печень усеяна узелками кокцидиоза; селезенка полнокровна; желудок наполнен, слизистая оболочка в норме; кишечник инъецирован; серозная оболочка толстой кишки в вентральной области, вблизи места инъекции, геморрагична; почки в норме.

Кролик 323. Белый, самка. Вес 820 граммов. Диета: овес.

15 марта: 10:45, в брюшную полость введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм); 12:00, рефлексы усилены, задние ноги отведены, но может ходить, симптомы легкие; 13:40, тремор, слабость, отведение головы и ног гораздо более выражены, чем в 12:00.

16 марта: состояние хорошее.

17 марта: состояние хорошее, выздоровление, по-видимому, полное.

Поскольку эксперименты серии А, задуманные как предварительные испытания, показали, что 0,3 грамма кофеина на килограмм при введении в брюшную полость быстро всасывается и является смертельным, в последующих испытаниях препарата использовались гораздо меньшие дозы. Это показано в серии B, которую можно разделить на две группы. Группа I, состоящая из кроликов 69, 70, 92, 93 и 309, которые получили 0,2 грамма кофеина на килограмм, и Группа II, № 307 и 308, которым вводили 0,15 грамма кофеина на килограмм. Три кролика из Группы I (№ 92, 93, 309) умерли от воздействия кофеина; кролик 309 через двадцать минут после инъекции, а кролики № 92 и 93 — через двадцать часов и два с половиной часа соответственно после введения кофеина. У обоих этих кроликов симптомы появились в течение пяти минут после инъекций. Следует отметить, что кролики 69 и 70 выжили после введения такого же количества кофеина пропорционально массе тела, какое было дано другим членам этой группы. Усиленная перистальтика и распределение дозы могут объяснить большую устойчивость кролика № 69. Случай с кроликом № 70, очевидно, является примером исключительной устойчивости к кофеину, поскольку оба кролика из Группы II умерли от воздействия гораздо меньшей дозы, а именно 0,15 грамма кофеина на килограмм. Более того, макроскопическое исследование при вскрытии № 307 и 308 не выявило никаких поражений, которые могли бы способствовать снижению устойчивости к кофеину.

Таким образом, из результатов экспериментов серии C, в которых меньшие дозы (0,125 грамма кофеина на килограмм) вызывали лишь легкие симптомы, в то время как 0,1 грамма на килограмм редко вызывали какие-либо симптомы, следует, что доза 0,15 грамма на килограмм, по всей вероятности, является минимальной смертельной дозой для кролика при введении в брюшную полость. Можно отметить, что кроликов серии C кормили морковью, тогда как кролики № 307 и 308 получали овес. Их устойчивость к кофеину может быть разной, но, как было указано ранее в этом исследовании, диета, по-видимому, не влияет на токсичность разовой дозы кофеина. Дозы 150 мг и от 100 до 125 мг на килограмм при введении в брюшную полость можно считать, соответственно, минимальной смертельной и минимальной токсической дозами для серого кролика. Анализ экспериментов в серии D показывает гораздо большую устойчивость к кофеину, чем у других кроликов, получавших его внутрибрюшинно. Так, после введения 0,2 грамма на килограмм каждому из пяти кроликов, в двух случаях (№ 310, 311) никакого эффекта не наблюдалось, в то время как у двух других (№ 74, 75) развились симптомы, но они выжили. Только один кролик, № 312, умер от воздействия этой дозы; вскрытие показало наличие дегенерации печени и петехиальных кровоизлияний на коре почек у № 310, что, вероятно, и стало причиной смерти, а не кофеин.

Таким образом, два дециграмма кофеина нельзя считать смертельной дозой для кроликов. Это дополнительно подтверждается результатами, полученными в экспериментах с большими дозами. Кролик 78, получивший 257 мг на килограмм, не проявил никаких симптомов. Такое же количество пропорционально массе тела у № 323 вызвало лишь легкие симптомы, в то время как быструю смерть кролика № 317 после такой же дозы кофеина можно объяснить поражением, обнаруженным при вскрытии, что дает дополнительные доказательства того, что болезнь может снижать устойчивость к кофеину. Можно заметить, что все члены этой серии были молодыми кроликами, и, как будет показано позже, молодые животные других видов также более устойчивы к кофеину, чем взрослые особи. Аналогичные результаты были получены фон Анрепом, который наблюдал, что атропин менее токсичен для молодых животных, чем для взрослых.

Также проводились наблюдения за диуретическим эффектом кофеина при введении в брюшную полость. Результаты, представленные в следующей таблице, указывают на стимулирующее влияние на почечную секрецию независимо от того, состояла ли диета из овса или моркови. Моча некоторых кроликов содержала умеренное количество сахара после введения от 0,2 до 0,15 грамма кофеина на килограмм; белок наблюдался в одном случае, но ни в одном из других. У кролика № 311 белок был обнаружен до инъекции кофеина, но отсутствовал в моче, собранной через три часа после введения кофеина.

Влияние кофеина на почечную секрецию.

No. Weight.Caffein per kilo.Urine.Time. Diet. Grams. Gram.cc. 307 1,320 0.150 100 4.5 hours Oats. 308 1,305 .150 180 do.Do. 295 1,205 .100 100 2 hours 20 minutes Carrots. 293 1,605 .100 90 3 hoursDo. 292 1,595 .100 105 4 hoursDo.

Примечание. Количество мочи, выделенной за три часа контрольными кроликами на морковной диете, варьировалось от 35 до 50 см³, при этом средний вес животных был немного выше 1600 граммов. Секреция мочи на овсяной диете была значительно меньше за тот же период времени.

Таблица 3. Внутрибрюшинные инъекции.

SERIES A. No. Weight.Caffein per kiloTime of appearance of symptoms inDuration of life. Remarks. Grams. Gram. 71 1,659 0.3 85 minutes24 hoursGray. 61 2,143 .3 At the end of injectionBlack. 72 1,402 .3 8 minutes1.25 hourGray and white. SERIES B, GROUP I. 70 1,487 0.210 daysGray and white. 93 1,492 .2 5 minutes2.5 hoursMaltese; given second dose after 3 days, died 2.5 hours later. 69 1,492 .2 About 5 minutesSurvivedWhite. 92 1,388 .2 5 minutes24 hoursYellow. 309 1,500 .2 20 minutesBelgian; oats. SERIES B, GROUP II. 308 1,350 0.15 3 hours and 40 minutesAbout 2.5 daysBelgian; oats. 307 1,320 .15 1 hour 24 minutes24 hours Do. SERIES C. 223 1,165 0.1252 hoursSurvivedBelgian; carrots. 293 1,605 .1 do. Do. 295 1,205 .1 do. Do. 292 1,595 .1 do. Do. 298 1,205 .1251.5 hours do. Do. SERIES D. 310 880 0.2 2 days1About 2.5 days1Belgian; oats. 311 650 .2 Survived Do. 312 740 .2 40 minutes4.5 hoursMaltese; oats. 78 659 .25715 minutesSurvivedYellow and white; oats. 75 842 .2 do. do.Gray and white. 74 692 .2 do. do. 317 635 .2521 hour 25 minutesAbout 2 hoursBelgian; oats. 323 820 .25 1 hour 15 minutesSurvivedWhite; oats.

1 Не связано с кофеином.

ВНУТРИМЫШЕЧНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Для этих экспериментов использовались хорошо откормленные кролики, получавшие исключительно овсяную диету. Инъекции производились в поясничные или ягодичные мышцы.

Серия A.

В этой серии кофеин вводился в ягодичные мышцы.

Rabbit 284. Brown and white, female. Weight, 1,100 grams.

14 декабря: 14:00, в ягодичные мышцы введено 11 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм), под наблюдением до 17:00, наблюдались частые судороги; в 17:00 в коматозном состоянии. Кролик был найден мертвым на следующее утро.

Rabbit 286, white and black, female. Weight, 1,315 grams.

15 декабря: 14:30, в ягодичные мышцы введено 13 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1977 грамма на килограмм), в течение следующих двух часов наблюдались тремор и усиление рефлексов, но других симптомов не было.

17 декабря: кролик жив.

Rabbit 285, yellow and white, female. Weight, 1,385 grams.

14 декабря: 10:15, в ягодичные мышцы введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм), общий тремор, но судорог не наблюдалось. Кролик выжил.

17 декабря: кролик все еще жив.

Rabbit 287. Belgian hare, female. Weight, 1,140 grams.

15 декабря: 14:15, в ягодичные мышцы введено 11 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:30, тонические сокращения задних конечностей. Паралич и смерть в 14:40.

Серия B.

В серии B кофеин вводился в поясничные мышцы.

Rabbit 307. Belgian hare, female. Weight, 1,175 grams.

16 февраля: 11:05, в поясничные мышцы введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,136 грамма на килограмм); под наблюдением до 16:00, симптомов нет; 16:00, разрешено ходить по полу; после прохождения небольшого расстояния — потеря координации и паралич задних конечностей; 17:20, найден мертвым.

Rabbit 306. Belgian hare, female. Weight, 1,860 grams.

16 февраля: 11:00, в поясничные мышцы введено 12,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 12:00, симптомов нет; 14:00, прошел около 10 футов, истощение и паралич; 15:00 найден мертвым.

Rabbit 181. Belgian hare. Weight, 1,230 grams. (Was experimented on some time previously.)

16 февраля: 10:55, в поясничные мышцы введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,130 грамма на килограмм); 12:00, симптомов нет; 14:00, симптомов нет; 15:00, помещен на пол, прошел около 10 футов и был истощен, задние конечности парализованы; 16:00, найден мертвым.

Серия C.

Осенью того же года были проведены дополнительные эксперименты с дозами от 100 до 200 миллиграммов кофеина на килограмм, которые вводились в поясничные мышцы. Результаты приведены в следующих сокращенных протоколах:

Rabbit 425. Belgian hare. Weight 1,520 grams.

27 сентября: 10:30, в поясничные мышцы введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:00, рефлексы усилены.

28 сентября: кролик в норме.

5 октября: вес 1620 граммов; 14:50, в поясничные мышцы введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:05, рефлексы усилены.

13 октября: вес 1520 граммов; 10:30, введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (131 мг на килограмм); 11:00, симптомов нет; 11:30, рефлексы значительно усилены.

14 октября: жив, симптомов нет.

Rabbit 426. Belgian hare, female. Weight, 1,425 grams.

27 сентября: 7 см³ 2-процентного раствора кофеина введено в поясничные мышцы в 10:30; 14:00, рефлексы усилены.

28 сентября: кролик в норме.

5 октября: вес 1425 граммов; 14:55, в поясничные мышцы введено 9 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:05, рефлексы усилены.

13 октября: вес 1405 граммов; 10:30, введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (142 мг на килограмм); 11:00, симптомов нет; 11:30, рефлексы усилены.

14 октября: кролик жив, симптомов нет.

Rabbit 427. Belgian hare, female. Weight, 1,780 grams.

27 сентября: в поясничные мышцы введено 9 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:00, рефлексы усилены.

28 сентября: кролик в норме.

5 октября: вес 1850 граммов; 15:00, в поясничные мышцы введено 11,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:10, рефлексы усилены.

13 октября: вес 1830 граммов; 10:40, в поясничные мышцы введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (153 мг на килограмм); 11:00, симптомов нет; 11:30, рефлексы усилены.

14 октября: кролик жив, симптомов нет.

Rabbit 453. Belgian hare, male. Weight, 1,160 grams.

12 октября: 15:45, в поясничные мышцы введено 11,5 см³ 2-процентного водного раствора кофеина; 16:15, рефлексы усилены; 16:30, парализован.

13 октября: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: слизистая оболочка желудка геморрагична; печень потемнела; другие органы в норме.

Rabbit 455. Belgian hare, gray, female. Weight, 1,185 grams.

12 октября: 15:30, в поясничные мышцы введено 11,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 16:00, рефлексы усилены.

13 октября: кролик весил 1070 граммов, симптомов отравления кофеином нет, рефлексы нормальные; 10:30, в поясничные мышцы введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина; 11:30, спрыгнул со стола, случился приступ судорог, и он умер. Вскрытие: результаты те же, что и у № 453.

Rabbit 428. Belgian hare, gray, male. Weight, 1,650 grams.

5 октября: 16:00, в поясничные мышцы введено 14,8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,18 грамма на килограмм).

6 октября: найден мертвым.

Rabbit 429. Belgian hare, male. Weight, 1,340 grams.

5 октября: 16:00, в поясничные мышцы введено 13,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм).

8 октября: кролик найден мертвым.

Серия D.

В этой серии были проведены дальнейшие эксперименты с инъекциями как в поясничные, так и в ягодичные мышцы.

Rabbit 577. Gray male. Weight, 1,380 grams.

14 февраля: 15:00, в ягодичные мышцы правой стороны введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:10, беспокоен, спрыгнул со стола и ходил, рефлексы усилены; 15:45, выделил 30 см³ прозрачной мочи соломенного цвета; 16:45, разрешено ходить, пробежал через комнату около 20 футов, выглядел уставшим, растянулся на полу, затем поднялся и ходил, не проявляя нарушений походки.

15 февраля: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 578. Gray, female. Weight, 1,670 grams.

14 февраля: 15:05, в ягодичные мышцы правой стороны введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:15, рефлексы усилены, но беспокойства нет; 17:00, разрешено ходить, симптомов не наблюдалось.

15 февраля: найден мертвым.

Rabbit 579. White and gray, male. Weight, 1,490 grams.

14 февраля: 15:15, в ягодичные мышцы правой стороны введено 15 см³ 2-процентного раствора кофеина; помещен в клетку; 15:30, рефлексы усилены; 17:00, вынут из клетки и разрешено ходить по комнате, особых симптомов не замечено.

23 февраля: все еще жив.

Rabbit 580. Gray male. Weight, 1,510 grams.

February 14: 3.35 p. m., 15 cc 2 per cent caffein solution injected into lumbar muscles.

23 февраля: все еще жив, в хорошем состоянии.

Rabbit 581. Gray female. Weight, 1,680 grams.

14 февраля: 15:45, в поясничные мышцы правой стороны введено 17 см³ 2-процентного раствора кофеина; 16:00, рефлексы усилены; 16:15, спрыгнул со стола и начались сильные судороги, стал очень беспокойным, ходил по лаборатории; 16:25, периодически случались судороги; 16:30, конечности вытянуты и довольно ригидны; 16:35, судороги и смерть.

Rabbit 582. Gray male. Weight, 1,870 grams.

14 февраля: 16:15, в поясничные мышцы правой стороны введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина; 17:00, рефлексы усилены; ходил по комнате, затем отдыхал; 17:15, при прикосновении случился короткий спазм.

23 февраля: жив; хорошее состояние.

Данные, представленные в этих экспериментах, показывают, что токсичность кофеина при введении в мышцы поясничной области такая же, как и при введении в ягодичные мышцы. Кролики серии A получили примерно 0,2 грамма кофеина на килограмм, и двое умерли в результате этой процедуры. Остальные двое выжили, но наблюдались симптомы интоксикации кофеином.

В серии B меньшие дозы оказались смертельными, из чего можно было бы сделать вывод, что кофеин более токсичен при введении в поясничные мышцы. Однако дальнейшие наблюдения не подтвердили результаты, полученные в этой серии. Так, в серии C 130–150 мг кофеина на килограмм при введении в поясничные мышцы вызывали лишь легкие симптомы. Эксперименты с большими дозами показали, что 0,180 грамма кофеина на килограмм могут вызвать смерть. С другой стороны, будет замечено, что кролик № 455 выжил после дозы 0,2 грамма на килограмм. Поэтому были проведены новые эксперименты, в которых в поясничные мышцы вводились такие же количества кофеина пропорционально весу животных, как и в ягодичные мышцы. Как показано в экспериментах серии D, один кролик (№ 581) умер вскоре после введения кофеина в поясничные мышцы; двое выздоровели. Двое из трех, получивших инъекции в ягодичные мышцы, были найдены мертвыми на следующий день; один выздоровел. Патологоанатомическое исследование не выявило наличия каких-либо отклонений. Таким образом, скорость всасывания кофеина из ягодичных и поясничных мышц, по-видимому, одинакова или различается незначительно. В этой связи интересны наблюдения Ауэра и Мельцера. Согласно их исследованиям, адреналин быстрее всасывается из поясничных мышц, чем из ягодичных. Это, по всей вероятности, связано с большей чувствительностью теста, который они использовали (поскольку они судили о скорости всасывания по влиянию адреналина на кровяное давление), а также с гораздо большей активностью этого вещества.

Таблица 4. Внутримышечные инъекции.

SERIES A. No. Weight.Caffein per kiloSymptoms after—Duration of life. Site of injection. Remarks. Grams. Gram. 284 1,100 0.200 3 hoursLess than 20 hours GlutealWhite and brown female. 286 1,315 .1977 2 hoursSurvived do.White and black female. 285 1,385 .200 Present do. do.Yellow and white female. 287 1,140 .210 15 minutes25 minutes do.Gray female. SERIES B. 307 1,175 0.136 5 hours6 hours, 20 minutes LumbarGray female. 306 1,860 .134 3 hours4 hours do. Do. 181 1,230 .130 4 hours5 hours do.Gray. SERIES C. 425 1,520 0.131 1 hourSurvived LumbarGray. 426 1,405 .14230 minutes do. do.Gray female. 427 1,830 .15350 minutes do. do. Do. 453 1,160 .20030 minutesLess than 20 hours do.Gray male. 455 1,185 .200 do.Survived do.Gray female. 428 1,650 .180Less than 20 hours do.Gray male. 429 1,340 .200 do. do. Do. SERIES D. 577 1,380 0.20010 minutesLess than 18 hours GlutealGray male. 578 1,670 .210 do. do. do. Do. 579 1,490 .20015 minutesSurvived do.White and gray male. 580 1,510 .200 do. LumbarGray male. 581 1,680 .20015 minutes50 minutes do. Do. 582 1,870 .19245 minutesSurvived do. Do.

Изучение таблицы 4 показывает, что 14 кроликов получили от 180 до 210 мг кофеина на килограмм. Появление симптомов у этих кроликов варьировалось весьма значительно. У некоторых усиление рефлексов можно было заметить через 10–15 минут после инъекции кофеина; у других оно задерживалось на 2–3 часа. Можно добавить, что начало симптомов во многих случаях происходило очень скоро после введения препарата — в среднем примерно через 10–30 минут после инъекции. После введения меньших доз путем инъекции в поясничные мышцы появление симптомов в некоторых случаях задерживалось на несколько часов. Продолжительность жизни этих 14 кроликов варьировалась значительно. Восемь из них умерли в течение 1–20 часов; шестеро выжили. Около 0,2 грамма кофеина на килограмм можно считать минимальной смертельной дозой, в то время как минимальная токсическая доза находится где-то между 130 и 150 мг на килограмм.

ВНУТРИВЕННАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Эти эксперименты проводились на хорошо откормленных взрослых серых кроликах. Диета в течение нескольких дней, предшествующих экспериментам, состояла из овса или моркови, которые давались ad libitum. Инъекции производились в ушные вены из бюретки или с помощью шприца, температура раствора кофеина составляла около 40° C. Также было обращено внимание на влияние скорости инъекции и концентрации на токсичность. Минимальные токсические, а также летальные дозы были определены, как показано в следующих экспериментах.

Серия A.

В этих экспериментах скорость инъекции составляла около 1 см³ 2-процентного раствора кофеина в минуту.

Rabbit 194. White, female. Weight, 1,310 grams.

19 октября: в ушную вену введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (115 мг на килограмм). Кролик проявил скованность; вскоре после этого появился паралич конечностей. Кролик выжил.

Rabbit 556. Gray, female. Weight, 1,635 grams.

31 января: 14:00, в ушную вену введено 11 см³ 2-процентного раствора кофеина (134 мг на килограмм) примерно за 11 минут; 14:10, судороги, кролик оставался лежать на боку; в течение оставшегося часа у него периодически случались судороги; 15:20, судороги и смерть. Кролик не мочился после инъекции кофеина.

Rabbit 557. Gray, female. Weight, 1,580 grams.

31 января: с 14:30 до 14:37 введено 7 см³ 2-процентного раствора кофеина из бюретки со скоростью 1 см³ в минуту; 14:37, поток жидкости прекратился, вены были переполнены и свободно кровоточили, инъекция была продолжена с помощью шприца; введено 2 см³ 2-процентного кофеина за две минуты; инъекции прекращены, так как появились судороги; 14:50, кролик поднялся, но упал; 15:10, кролик принял нормальную позу, ходил по полу, не проявляя никаких признаков воздействия кофеина; 16:30, ходил, походка нормальная, состояние казалось хорошим.

1 февраля: 14:00, состояние хорошее, аппетит хороший, общее количество введенного кофеина — 9 см³ 2-процентного раствора, или 114 мг на килограмм.

Rabbit 558. Gray, female. Weight, 1,590 grams.

31 января: 15:00, введено 8 см³ 2-процентного кофеина за восемь минут; 15:10, сильные судороги; 15:20, кролик был растянут на животе, конечности вытянуты, мочился; 16:30, выглядел нормально; мог ходить.

1 февраля: 14:00, состояние хорошее, аппетит хороший.

Rabbit 292. Belgian hare, male. Weight, 1,770 grams.

18 февраля: с 16:26 до 16:39 в ушную вену введено 12,5 см³ теплого раствора кофеина (0,141 грамма на килограмм), после введения этого количества последовала судорога, вскоре после этого — тоническая ригидность конечностей; 16:52, состояние без изменений, кролик на полу, конечности вытянуты, лежит на животе.

Rabbit 294. Belgian hare, female. Weight, 1,350 grams. Carrot diet for about 10 days before the experiment.

19 февраля: 12:20, в ушную вену введено 5 см³ 2-процентного кофеина (74 мг на килограмм) за пять минут, отек уха, использовано другое ухо, введено 3,5 см³ за 10 минут, повторные судороги; 13:25, кролик все еще жив, частые приступы судорог; 14:30, найден мертвым. Общее количество, введенное за 15 минут, 8,5 см³, или 0,126 грамма на килограмм.

В предыдущих экспериментах будет замечено, что симптомы тяжелой интоксикации присутствовали у всех шести кроликов, но только двое из них (№ 294 и 556) умерли от воздействия кофеина. Из тех, кто выжил, трое получили дозы от 100 до 114 мг кофеина на килограмм, а другой (№ 292) получил 141 мг кофеина на килограмм. Смерть кроликов № 294 и 556 можно, следовательно, рассматривать как случай исключительно низкой устойчивости к кофеину.

Серия B.

В этих экспериментах использовались дозы от 160 до 200 мг кофеина на килограмм. Скорость инъекции составляла 1 см³ в минуту, за исключением эксперимента 254, в котором 10,8 см³ 2-процентного кофеина были введены за 17 минут 25 секунд.

Rabbit 562. Gray female. Weight, 1,650 grams. Diet, oats.