Fig. 12.—Egg of Bilharzia, with contained embryo and free sarcode globules. Original.
Fig. 13.—Free ciliated embryo of Bilharzia, slightly deformed, and having the pear-shaped organs largely developed. Original.
Fig. 14.—Ciliated embryos of Bilharzia, deformed by the application of reagents. Original.
Теперь этот быстрый способ рождения и выхода из оболочки гораздо более поразителен в случае яиц, которые помещены в совершенно чистую воду; ибо, пока яйца все еще находятся в моче, у эмбриона, по-видимому, нет ни силы, ни желания выбраться; но при изоляции и помещении их в подходящие условия их поведение еще более примечательно. В течение менее двух минут я неоднократно видел, как доселе неподвижный эмбрион менял свою форму путем сокращений, приходил в яростное возбуждение и вырывался из своей оболочки в состоянии свободно плавающего анималькуля. Более того, стоит отметить, что яйца и личинки Bilharzia вскоре погибают в несвежей моче. «16 августа 1870 года я поместил около тысячи яиц в кварту родниковой воды, в которую было добавлено всего драхма или немного меньше мочи. По истечении сорока восьми часов не удалось найти ни одного живого эмбриона. Впоследствии я установил, что не могу поддерживать жизнь эмбрионов в течение двадцати четырех часов ни в какой воде, в которую я ввел малейший след слизи, кровяных телец, мочевых кристаллов или разлагающихся веществ любого рода. Все виды реагентов быстро убивали личинок. Простое обесцвечивание раствором кармина или добавление капли раствора перманганата калия мгновенно заставляло их принимать гротескные и неестественные формы (рис. 13 и 14), причем смерть рано или поздно наступала в результате дезинтеграции и растворения их нежных тел в простые саркодные массы. Еще более быстрое ядовитое действие производилось добавлением небольшого количества хереса или спирта. В растворах, где количество спирта не превышало одной части спирта крепости proof на пятьдесят частей воды, эффект был таким же».
Развитие личинки одинаково хорошо осуществляется в дистиллированной воде, в колодезной воде и в солоноватой воде. В чистой морской воде процесс идет менее удовлетворительно. Было обнаружено, действительно, что добавление слегка соленой воды к реснитчатым эмбрионам, которые были на грани гибели в пресной воде, имело эффект оживления их на некоторое время. Эти факты имеют важное практическое значение.
Таким образом, я показал, что выход эмбриона отнюдь не является медленным процессом, который описал Бильхарц. Почти неизменно оболочка лопается продольной щелью, простирающейся более чем на две трети ее длинного диаметра, причем первая точка разрыва обычно расположена посередине между шипом и центром оболочки. При нормальных родах, так сказать, голова анималькуля выходит первой; но иногда животное спасается боком, и я даже видел, как эмбрион выбирался хвостом вперед. Нередко он испытывает трудности с отделением от оболочки, и в этом случае яйцо вращается вокруг своей оси полуосвобожденным пленником (рис. 15). Однако упор шипа о какое-либо инородное вещество обеспечивает необходимый рычаг для обеспечения побега.
Личинка никогда не демонстрирует свою надлежащую удлиненную, веретенообразную или цилиндро-коническую фигуру до некоторого времени после своего выхода из оболочки; и, как следствие этого, ее способности к передвижению сначала менее выражены, чем впоследствии. Во время выхода личинки обычно более или менее имеют форму песочных часов (рис. 11); эта конкретная форма иногда сохраняется в течение многих минут или даже часа. Обычно личинки имеют тенденцию приобретать свою нормальную форму сразу после выхода из оболочки; овальные, грушевидные и по-разному сокращенные формы постепенно сливаются в характерный конусообразный анималькуль (рис. 10). В своем полностью развитом состоянии они демонстрируют самые живые движения; и наблюдать, как сотни из них носятся с непрекращающейся активностью, — любопытное зрелище. Феномен, более того, не теряет своего интереса от соображения, что всего несколько часов, или, может быть, минут назад, эти ныне активно вращающиеся анималькули находились in ovo внутри кровеносных сосудов своего человеческого хозяина. От лиц, которые заражены, мириады этих яиц Bilharzia ежедневно совершают свой побег во время акта мочеиспускания; и когда этот акт совершается хозяином на открытом воздухе, легко понять, как легко яйца могут подвергаться условиям, благоприятным для развития личинок. Прямое попадание мочи в любой значительный резервуар естественной или пресной воды за несколько минут обеспечило бы вылупление всех яиц; и при отсутствии какой-либо такой прямой помощи развитию случайное выпадение дождя в любой местности, где болезнь Bilharzia является эндемичной, легко перенесло бы яйца в канавы, пруды, реки, озера и, в конечном итоге, возможно, даже в само море.
Fig. 15.—Egg of Bilharzia, with the shell adhering to the escaped ciliated embryo. Original.
Fig. 16.—Ciliated embryo of Bilharzia in the act of dying from the escape of the sarcodic contents. Original.
Поведение эмбриона под действием реагентов различных видов примечательно. Так, когда 5 сентября 1870 года я поместил некоторые яйца в солоноватую воду крепостью две части пресной воды на одну часть чистой морской воды, их содержимое легко развивалось, хотя выходящие эмбрионы не плавали энергично. Когда снова я поместил некоторые другие яйца в чистую морскую воду, их содержащиеся эмбрионы мгновенно становились пронзенными, вибрирующие реснички головы были жесткими и неподвижными. Сначала я естественно заключил, что эмбрионы были убиты наповал; но, к моему великому удивлению, шок прошел примерно через полчаса, когда они ожили и вскоре после этого вылупились. Одна из личинок, таким образом освобожденных, унесла с собой несколько свободных внутрихорионических глобул, которые во время периода пронзения стали прочно прилипшими к концам хвостовых ресничек. Здесь я могу заметить определенную разницу, наблюдаемую между ресничками головы и тела соответственно. Первые во все времена вибрирующие, активные и заметные, в то время как последние более нежные, способные к сравнительно небольшому движению и более разделяющие характер тонких щетинок. В длину их общее измерение варьирует от 1/2500 до 1/2000 дюйма. Действие чистой морской воды на свободных анималькулей, ранее погруженных в пресную или солоноватую воду, было столь же поразительным. Все без исключения немедленно становились парализованными и почти неподвижными; тем не менее, при повторном добавлении пресной воды некоторые полностью восстанавливались. Стоит заметить, что в этих случаях головные реснички давали первые признаки возвращающейся жизнеспособности. Я был особенно поражен поведением одного эмбриона, который под стимулом внезапного шока втянул свою конусообразную голову почти полностью внутрь общей полости тела (рис. 14, нижний экземпляр). В их умирающем состоянии, какую бы форму ни сохранял эмбрион, саркодное содержимое постепенно исчезало; контур существа, однако, становился более заметным (рис. 16). Обычно тело анималькуля становилось удлиненным во время истечения в морской воде. При других обстоятельствах эмбрион часто лопается; саркодное содержимое выходит в форме амебоподобных тел, а реснички сохраняют свои способности к движению долго после того, как все следы саркода исчезли.
Fig. 17.—Ciliated embryo of Fasciola hepatica, showing the so-called eye-spot. After Leuckart.
Личинки Bilharzia близко напоминают таковых Fasciola hepatica, которые последние могут быть уместно замечены в этом месте. Реснитчатый эмбрион обычного печеночного сосальщика имеет форму длинного перевернутого конуса; передний конец или голова плоско-выпуклая. В центре находится короткий хоботкоподобный сосочек, лишенный ресничек (рис. 17). Общее покрытие из ресничек покоится на хорошо определенном зернистом эпидермисе; за последним следует плотный периферический слой крупных нуклеированных клеток, каждая из которых измеряет около 1/2500 дюйма в диаметре. Эпидермис измеряет 1/6250 дюйма в толщину. В центральной массе паренхимы никакие внутренние органы не распознаваемы, но Лейкарт наблюдал признаки канала, который, как он думал, мог открываться у хвоста, хотя само отверстие не было фактически видимым.
Пока реснитчатое покрытие остается неповрежденным, эмбрион, подобно другим анималькулям, демонстрирует большую активность, вращаясь вокруг своей оси, а также описывая вращения и круги различных степеней диапазона в воде, причем последние движения совершаются путем сгибания тела на себя до большей или меньшей кривизны. Эмбрионы Bilharzia и другие инфузории демонстрируют такое же поведение, и, как отмечает Лейкарт, когда эти эмбрионы ударяются о какое-либо препятствие, они делают паузу после удара, как будто чтобы обдумать природу вещества, которого они коснулись. Как и в случае эмбрионов сосальщиков в целом, реснитчатое покрытие в конечном итоге отпадает, и эмбрион вновь принимает более или менее овальную фигуру, одновременно меняя свой плавательный способ передвижения на менее достойный метод ползания. В свободном реснитчатом состоянии эмбрион обычного печеночного сосальщика измеряет, согласно Лейкарту, 1/190 дюйма в длину, причем передний широкий конец составляет 1/500 дюйма. Реснички имеют продольное измерение 1/1388 дюйма.
Fig. 18.—Ciliated embryo of Distoma lanceolatum. After Leuckart.
Согласно наблюдениям доктора Виллемо-Сума, реснички эмбрионов Distoma megastoma ограничены передним полюсом тела. Это также расположение, как впервые указал Лейкарт, у Distoma lanceolatum (рис. 18). С другой стороны, Пагенштекер показал, что эмбрионы Distoma cygnoides и Amphistoma (Diplodiscus) subclavatum реснитчаты повсюду, наблюдение, которое в отношении последнего вида было подтверждено Вагенером и другими. Первоначальное утверждение доктора Пагенштекера о том, что «внутрихориониальные зародыши трематод не предлагают отличительных характеристик», должно, следовательно, в нынешнем состоянии наших знаний быть принято как общее заключение, допускающее много исключений. На ранних стадиях развития эмбрион Distoma lanceolatum занимает центр яйца и, согласно Лейкарту, имеет свою коническую голову неизменно направленной к верхнему полюсу оболочки, или, другими словами, к тому концу яйца, который снабжен крышечкоподобным оперкулумом. Лейкарт описывает сам эмбрион как «мелкозернистый и вооруженный на кончике кинжалоподобным шипом, который при одновременном смещении соседней зернистой массы может быть выдвинут вперед и втянут обратно». Помимо этой так называемой головной зернистой массы, внутри эмбрионального тела есть две другие зернистые массы, широко отделенные друг от друга, но занимающие заднюю половину эмбриона. Эти Лейкарт предполагает быть рудиментами будущего выводка, который должен быть развит в то время, когда свободный эмбрион потеряет свой реснитчатый плавательный аппарат, проложит свой путь с помощью головного шипа в ткани моллюска и будет метаморфизирован в мешкообразную личинку (Нянька, Спороциста или Редия, как может быть). Каково бы ни было полное значение этих внутренних развитий, у нас есть по крайней мере удовлетворительные доказательства того, что полный и свободный эмбрион является шарообразным анималькулем, имеющим переднюю треть или головной конец тела, покрытый ресничками, и вооруженным центральным бурильным шипом. Вследствие этого ограничения реснитчатого покрытия его плавательные движения менее живы, чем у эмбриона Fasciola hepatica; он, следовательно, вероятно, займет свое место жительства в менее активном хозяине, чем тот, который выбран эмбрионом Fasciola, выбирая одного из тех моллюсков, которые либо движутся медленно, либо склонны держаться на дне воды. Зрелые яйца имеют длину от 1/625 до 1/555 дюйма и ширину 1/833 дюйма. Длинный диаметр свободного эмбриона варьирует от 1/990 до 1/833 дюйма, поперечный диаметр составляет 1/1562 дюйма. Пока эмбрионы были еще в яйце, Лейкарт не мог видеть никакого реснитчатого движения. У большинства наблюдателей как реснитчатый аппарат, так и бурильный шип, по-видимому, на этой стадии полностью ускользнули от наблюдения.
Fig. 19.—Outline representation of a ciliated embryo of Bilharzia, showing the arrangement of the water vessels and the vacuoles. Original.
Что касается внутреннего строения реснитчатого зародыша Bilharzia hæmatobia, я должен далее отметить, что вскоре после его выхода из оболочки до того момента разрозненные глобулярные саркодовые частицы сливаются. По-видимому, это предварительный этап к последующему процессу дифференциации. Относительно стебельчатых слепых мешков, сформированных внутри головки, я полагаю, что мы должны рассматривать самый крупный из них как представляющий желудок личинки на ее будущей стадии церкарии. При использовании объектива 1/12″ я отчетливо распознал в полости центрального слепого мешка многочисленные сильно преломляющие свет гранулы, диаметр которых в среднем составлял не более 1/12000″. Рудиментарный желудок часто можно обнаружить, пока личинка еще находится внутри яйца. Его длина, включая стебелек, составляет около 1/500″, а ширина — 1/14000″. Ширина узкого стебелька не превышает 1/9000″. Два других стебельчатых тела, по-видимому, имели характер лемнисков. Их иногда удавалось хорошо рассмотреть, пока зародыш еще находился внутри яйца. Что касается покровов, то легко различить два слоя. При тщательной настройке фокуса внутренняя стенка прозрачной дермы приобретает зернистый вид. Эти мельчайшие и правильные отметины не претерпевают изменений во время сокращений тела личинки.
У этих маленьких анималькулей существует высокоразвитая водоносная сосудистая система. Многократно я видел следы этой системы сосудов, а в нескольких случаях получил весьма удовлетворительное представление обо всей серии ветвей. Стремясь получить подтверждение своего открытия, я продемонстрировал существование этих сосудов опытному микроскописту — покойному г-ну Дж. Г. Пилчеру из армии Ее Величества. В самых кратких выражениях можно сказать, что водоносная сосудистая система Bilharzia в личиночной стадии состоит из двух главных стволов, которые проходят извилистым путем от головы до хвоста и которые в ходе своих изгибов отдают несколько анастомозирующих ветвей (рис. 19). Как это также имеет место у соответствующих личинок Diplodiscus subclavatus, на хвосте не видно никакого выделительного отверстия.
Ободренный опытом и выводами Пагенштехера, Филиппи, Вагнера, Лейкарта и других, я искал промежуточных хозяев среди пресноводных моллюсков и мелких ракообразных. Потерпев неудачу в этом, я предположил, что личинки Bilharzia могут в норме обитать в речных или даже морских рыбах. Эта последняя мысль, по-видимому, также пришла в голову доктору Эйткену. В приложении к своему «Отчету для Армейского медицинского департамента за 1868 год», датированному Нетли, ноябрь 1869 года, он приводит рисунок формы-няньки, которую он называет церкарией, из хвоста пикши, предполагая наличие некоторой генетической связи с Bilharzia. Доктор Эйткен также расширяет свои взгляды в отношении некоторых личиночных трематод, которые, как утверждалось, были найдены в так называемых делийских фурункулах и лахорских язвах. Однако доктор Джозеф Флеминг показал, что эти паразитические формы — не что иное, как измененные волосяные луковицы («Армейские медицинские отчеты», 1868–69).
Что касается сосальщиков из пикши, я убедился, что эти незрелые трематоды из нервов рыб семейства тресковых не могут иметь генетической связи с Bilharzia; и я считаю своим долгом сказать доктору Мэддоксу, что принимаю его заключение относительно них. В своей статье («Микроскопические труды», том xv, 1867, стр. 87) он приводит веские доказательства того, что так называемая Distoma neuronaii Monroii из пикши (Morrhua æglefinus) является ювенильной стадией Gasterostoma gracilescens морского черта (Lophius piscatorius).
С сожалением должен констатировать, что все мои эксперименты дали отрицательный результат. Я пытался заставить реснитчатых зародышей проникнуть в тела различных животных, таких как Gammari, личинки двукрылых, Entomostraca, Lymnæi, Paludinæ, различные виды Planorbis и другие моллюски; но ни в них, ни в колюшках, плотве, пескарях или карпах они не проявляли склонности поселиться.
Весьма своеобразный и грозный гельминтоз, вызываемый этим паразитом, был тщательно исследован Гризингером и Бильхарцем и подробно описан в классических трудах Кюхенмейстера и Лейкарта. Мой собственный случай из Наталя также предоставил много интересных клинических фактов, которые были опубликованы в моих «Лекциях по гельминтологии», процитированных ниже. Сравнительная распространенность этого заболевания в Египте хорошо установлена. Симптоматически его главной особенностью является общее нарушение уропоэтических функций. На поздних стадиях заболевания возникают диарея и гематурия, которые также часто сопровождаются так называемым египетским хлорозом, коликами, анемией и сильным упадком жизненных сил. Истинный источник заболевания, однако, легко упустить из виду, если не провести тщательное микроскопическое исследование мочи и других выделений. Если с ними смешана кровь и также наблюдается обильное выделение слизи, то тщательный осмотр экскрементов почти наверняка выявит присутствие характерных яиц Bilharzia. Помимо усиления секреции слизи, может наблюдаться даже выделение гнойного содержимого, что свидетельствует о далеко зашедшем заболевании. Организм пациента со временем истощается; часто развивается пневмония, и в конечном итоге наступает смерть. При проведении патологоанатомических исследований выявляются следующие факты. В случаях, когда болезнь зашла не слишком далеко, на слизистой поверхности мочевого пузыря обнаруживаются мелкие очаги кровоизлияний, но в более выраженных случаях пятна становятся крупнее или даже сливаются. В некоторых случаях наблюдаются ворсинчатые или грибовидные утолщения, изъязвления и отслоение участков слизистой оболочки с различной степенью окрашивания в зависимости от количества кровоизлияния, которое превращается в серые, ржаво-коричневые или черные пигментные отложения. Часто поверх накладывается песчанистый или зернистый осадок, состоящий из обычных зерен мочевой кислоты, смешанных с яйцами и яичными скорлупками. Яйца легко обнаруживаются в моче, так как они вышли из разорванных сосудов мочевого пузыря. Слизистые оболочки мочеточников и почечных полостей также более или менее поражены; почки часто увеличены и полнокровны. Однако следует помнить, что во всех этих органах истинным местом локализации заболевания является кровь, которая составляет надлежащую среду обитания Bilharzia; и в этом случае черви, как и их вышедшие яйца, могут быть найдены в любом из сосудов, питающих пораженные органы. В одном случае, процитированном Лейкартом, Гризингер обнаружил несколько пустых яиц в левом желудочке сердца, и из этого обстоятельства было сделано предположение, что они могут переноситься в различные важные органы или даже закупоривать крупные сосуды. Как было сказано ранее, однако, паразиты наиболее распространены в сосудах мочевого пузыря, брыжейки и воротной системы. Воздействие на слизистую оболочку кишечника во многих отношениях сходно с тем, что происходит в мочевыводящих путях. Кровоизлияния с утолщением, экссудацией, изъязвлением и грибовидными разрастаниями появляются в кишечных слизистых и подслизистых тканях и на них; эти проявления, конечно, более или менее выражены в зависимости от степени инвазии.