«Иммунитет при инфекционных заболеваниях»

[70]

Не только качество пищеварительных соков приспосабливается к потребностям пищеварения; их количество также претерпевает изменения в зависимости от роли, которую эти соки должны играть. Так, Павлов наблюдал, что его собаки секретировали слюну, которая была очень жидкой и очень обильной, когда он давал им кислоты, горькие вещества или другие вещества, которые им не нравились. С другой стороны, присутствие пищи во рту или даже вид ее возбуждали секрецию густой слюны, содержащей большое количество муцина. В первом случае роль, которую играла слюна, заключалась в том, чтобы разбавить вредные вещества как можно больше, во втором — в том, чтобы облегчить глотание пищи.

В целом организм проявляет тенденцию производить больше пищеварительных ферментов, чем ему действительно нужно для пищеварения. Вероятно, именно по этой причине их часто находят вне пищеварительного канала. Среди этих ферментов пепсин и амилаза, в частности, были определенно доказаны как присутствующие в моче человека и некоторых млекопитающих, особенно собаки. Данные относительно сычужного фермента и трипсина не так хорошо установлены. Но, поскольку некоторые из этих ферментов, такие как амилаза и трипсин, могут происходить из нескольких источников в организме, их выведение с мочой менее важно для тезиса, который я только что сформулировал, чем выведение пепсина.

Пепсин был обнаружен в моче Брюкке ровно сорок лет назад. Он чаще встречается в утренней моче, но отсутствует в той, что выделяется сразу после основного приема пищи. Лео и Сенатор [89] обнаружили лишь следы пепсина во время длительного голодания итальянца Четти; но в день, когда он прервал голодание, они смогли продемонстрировать присутствие значительного количества этого фермента в его моче.

[71]

Делезенн и Фруэн, с целью поиска источника мочевого пепсина, удалили желудок у собаки. После того как животное оправилось, они хорошо кормили его и исследовали его мочу в разные периоды дня. Методами, которые показали присутствие пепсина у всех нормальных собак, взятых в качестве контроля, они никогда не могли обнаружить ни малейшего следа этой диастазы в моче собаки, перенесшей операцию. С другой стороны, моча собаки, чей желудок был просто изолирован, содержала примерно такое же количество пепсина, как и у нормальных собак. Этот эксперимент доказал, среди прочего, что пепсин, прежде чем он мог быть выведен почками, должен был быть реабсорбирован стенкой желудка. Из этих данных, взятых вместе, следует, таким образом, признать, что пепсин, обнаруженный в крови и проходящий оттуда в мочу, может быть только желудочного происхождения. Поскольку он не служит никакой полезной цели в организме, мы должны заключить, что часть пепсина, секретируемая желудком и не используемая для пищеварения, была отвергнута как излишняя.

Изучение пищеварительной функции животных дает нам информацию по целому ряду пунктов, имеющих высочайшее значение для понимания иммунитета. Внутриклеточное пищеварение, функция, столь широко распространенная у низших животных, очень тесно связано с явлениями, которые наблюдаются, когда микроорганизмы уничтожаются в животном организме. Внеклеточное пищеварение дает нам информацию относительно многих черт прогрессивной адаптации, подобных тем, которые наблюдаются в связи с приобретенным иммунитетом.

Когда мы рассматриваем явления внутриклеточного пищеварения и явления секреторного пищеварения в целом, мы видим, что в обоих химические процессы подвергаются влиянию живых частей организма. У низших животных именно протоплазма амебоидных клеток регулирует химические процессы при пищеварении; у высших животных эта роль берется на себя очень сложным аппаратом, в котором нервная система играет преобладающую роль.

ГЛАВА IV РЕЗОРБЦИЯ СФОРМИРОВАННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ

Пищеварение в тканях. — Резорбция клеток у беспозвоночных. — Резорбция красных кровяных телец фагоцитами позвоночных. — Фагоциты. — Различные категории этих клеток. — Макрофаги и микрофаги. — Роль, которую играют макрофаги в резорбции сформированных элементов. — Пищеварительное свойство макрофагических органов. — Растворение красных кровяных телец сыворотками крови. — Два вещества, которые действуют при гемолизе. — Макроцитаза и фиксирующее вещество. — Аналогия последнего с энтерокиназой. — Выход макроцитазы во время фаголиза. — Подавление фаголиза. — Резорбция сперматозоидов. — Присутствие фиксирующих веществ в плазмах. — Происхождение фиксирующих веществ.

[72]

Обычно считается, что питательные вещества должны обязательно подвергаться влиянию пищеварительных соков в желудочно-кишечном канале, прежде чем они могут быть использованы для питания организма. Это очень старая идея. Она была основана на хорошо известном эксперименте Шиффа, который вводил нескольким животным внутривенно растворы тростникового сахара и яичного альбумина, а другим — те же вещества после того, как они были искусственно переварены. В первом случае пищевые вещества попадали в мочу, во втором — они появлялись там только при введении в больших количествах.

[73]

На недавнем Международном медицинском конгрессе, состоявшемся в Париже в 1900 году, вопрос о внеротовом питании широко обсуждался [90]. Было принято, что жиры при введении в подкожные ткани, по крайней мере частично, поглощаются организмом, но что углеводы и альбуминоиды никогда не поглощаются. Это, возможно, верно с точки зрения клинической медицины. Но в принципе следует признать, что пищевые вещества самой разной природы, при введении в организм по каналам, отличным от желудочно-кишечного тракта, все же претерпевают глубокие изменения.

Когда мы вводим молоко, сыворотку крови или яичный белок, то есть материалы, очень богатые альбуминоидными веществами, под кожу или в брюшную полость лабораторных животных, мы обнаруживаем, что через некоторое время они исчезают. В то же время они вызывают модификации организма, которые указывают на то, что эти введенные вещества претерпели там глубокие изменения.

После введения сыворотки угря кроликам Т. Чистович [91] обнаружил в крови введенных животных вещество, которое давало осадок с сывороткой угря. Вскоре после этого Борде [92] наблюдал, что кровь животных, которым он вводил коровье молоко, приобрела новое свойство: она давала осадок с этим молоком, состояние, никогда не наблюдаемое в сыворотке необработанных животных.

Введение яичного белка кроликам, осуществленное Майерсом [93] и Уленгутом [94], привело к тем же изменениям в сыворотке крови. Исследования последнего из этих двух наблюдателей представляют для нашей текущей цели особый интерес. Он продемонстрировал сначала, что введение яичного белка в брюшную полость кроликов сопровождалось появлением в сыворотке крови этих животных вещества, которое осаждает яичный альбумин in vitro. Затем Уленгут получил это же приобретенное свойство крови у кроликов, которых заставляли проглатывать значительное количество белка куриных яиц. Через двадцать четыре дня после начала этого режима сыворотка кроликов осаждала яичный белок в пробирке. Этот пример дает заметную аналогию между результатами пищеварения в пищеварительном канале и результатами резорбции в ткани. Уленгут указывает, действительно, что его кролики, которые получали инъекции яичного белка в брюшную полость, процветали при этом лечении.

[74]

В настоящее время признано определенное количество подобных примеров. Все они указывают на то, что различные питательные вещества при введении в брюшную полость или под кожу животных удерживаются там в течение более или менее длительного времени и подвергаются определенным модифицирующим влияниям со стороны организма. Доказательство того, что эти вещества не выводятся в неизменном виде почками, было предоставлено большим количеством экспериментов. Недавно Линдеманн [95] и Нефедьев [96], работавшие в моей лаборатории, установили тот факт, что нормальная сыворотка крови при введении под кожу животных не вызывает альбуминурии вовсе, или, по крайней мере, вызывает ее в очень незначительной и преходящей степени.

Механизм, с помощью которого организм модифицирует эти питательные вещества, введенные по каналу, отличному от пищеварительного тракта, еще недостаточно известен; и поэтому его нелегко определить. Но мы очень определенно знаем, что каждая инъекция сыворотки, будь то яичного белка, молока или жирового вещества, сопровождается довольно значительным асептическим воспалением в том месте, где эти вещества вводятся. Мы могли бы заключить из этого, что организм переваривает пищевые вещества вне желудочно-кишечного канала посредством воспалительной реакции. Чтобы более точно определить явления, которые появляются в этих условиях, может быть полезно рассмотреть сначала не жидкие вещества, а твердые элементы, которые вводятся в ткани и полости.

Начнем с низших животных, у которых анатомическая организация и все функции имеют гораздо более простой характер, чем у позвоночных. В моей «Сравнительной патологии воспаления» (лекция IV) я уделил некоторое внимание пищеварению губок.

Питательные вещества — мелкие организмы — независимо от того, попали ли они через маленькие отверстия, столь многочисленные на поверхности губок, или были введены через разрыв в стенке тела, претерпевают одну и ту же судьбу. Они захватываются мерцательными или амебоидными клетками, которые поглощают пищу и переваривают ее путем внутриклеточного пищеварения. Эти два вида клеток, которые подпадают под категорию фагоцитов, имеют большое сходство друг с другом, и мы можем сказать, что пищеварение и резорбция — это два очень тесно связанных явления.

[75]

Когда мы рассматриваем несколько более высоких беспозвоночных, таких как медузы или некоторые другие кишечнополостные, мы все еще можем проследить тесную аналогию между истинным пищеварением пищи, которое происходит внутри эпителиальных клеток энтодермы, и резорбцией некоторых инородных тел, которые проникают по внеротовому каналу в промежуточную ткань. Здесь эти тела окружаются амебоидными клетками, которые выполняют свою функцию фагоцитов, поглощая и переваривая вещества, пришедшие извне.

Здесь нет необходимости проходить всю гамму совершенствования организации беспозвоночных в ее отношении к резорбции инородных тел, тем более что это уже было рассмотрено в моих лекциях по воспалению. Давайте выберем лишь некоторых из наиболее распространенных и лучше известных представителей беспозвоночных и остановимся на несколько мгновений на явлениях, проявляющихся в их организме, в среду которых были введены несколько ядерных красных кровяных телец [97].

Если небольшая капля дефибринированной крови гуся введена под кожу улитки, а другая — под кожу личинки майского жука, красные тельца рассеиваются в кровяной жидкости, которая сама по себе неспособна их модифицировать, но через несколько часов лейкоциты двух беспозвоночных, которые мы выбрали для эксперимента, поглотят определенное количество введенных красных кровяных телец. На следующий день красные кровяные тельца все еще можно найти нетронутыми в плазме крови, но подавляющее большинство было поглощено лейкоцитами (рис. 13). Внутри этих клеток красные тельца претерпевают постоянные и заметные изменения. У улитки они становятся круглыми, а их стенки — проницаемыми. В вакуолях, которые образуются вокруг поглощенных красных кровяных телец, обнаруживается растворенный гемоглобин (рис. 14); часть этого красящего вещества проходит в ядро красных кровяных телец, так что оно также претерпело глубокое изменение (рис. 14). Многие ядра становятся пустыми, оставаясь только в периферическом слое. Этот слой и мембрана красного тельца — это части, которые сопротивляются действию лейкоцитов дольше всего, и их находят в течение некоторого времени после их поглощения. Белые кровяные тельца улитки, поглотив одно или несколько красных телец, могут сами стать добычей своих собратьев.

[76]

[77]

У «ver blanc» (французское народное название личинки майского жука) явления резорбции красных телец гуся напоминают только что описанные. Плазма крови оставляет нетронутыми красные тельца, которые не претерпевают никаких изменений, пока не будут поглощены лейкоцитами. Гемоглобин диффундирует в лейкоцит, тогда как ядро и мембрана сохраняются в течение очень значительного периода (рис. 15), хотя они теряют свой нормальный вид, сморщиваются и превращаются в неправильную массу коричневого пигмента, которая может оставаться в веществе лейкоцита (рис. 15, p) в течение недель.

Рис. 13. Лейкоциты личинки майского жука, содержащие красные кровяные тельца гуся.

Рис. 14. Красные кровяные тельца гуся, свободные и поглощенные лейкоцитами улитки (Helix pomatia), через 24 часа после их введения.

Fig. 15. Leucocyte of a cockchafer larva, 7 days after last injection of goose’s blood.

Рис. 16. Лейкоцит из брюшной полости золотой рыбки после поглощения красных кровяных телец морской свинки.

Введя однажды кровь гуся улиткам и «vers blancs», если мы повторим инъекцию несколько раз, наблюдаемые явления неизменно остаются теми же. Красные тельца не подвергаются воздействию плазмы и претерпевают те же изменения внутри лейкоцитов. Эти изменения, по сути, сравнимы с теми, что описаны в предыдущей главе при обсуждении внутриклеточного пищеварения красных телец кишечными клетками планарий. В обоих случаях красные тельца захватываются амебоидными клетками и подвергаются влиянию их содержимого. В кишечных фагоцитах планарии, как и в фагоцитах крови (лейкоцитах) улитки и «ver blanc», гемоглобин диффундирует через стенку красного тельца, наиболее устойчивыми частями которого являются ядро и мембрана. Эти устойчивые остаточные фрагменты, пропитанные гемоглобином, становятся коричневыми у планарии, у «ver blanc», а также, но в меньшей степени, у улитки. Наиболее заметная разница заключается в образовании экскреторных вакуолей, содержащих конкреции, у планарии и отсутствии этих вакуолей в фагоцитах крови других беспозвоночных. Мы, однако, имеем меньше прав приписывать фундаментальное значение этой разнице, поскольку явления у актиний, которые поглощают красные кровяные тельца амебоидными клетками своей энтодермы, во всех отношениях (за исключением присутствия этих специальных экскреторных вакуолей) сравнимы с явлениями, наблюдаемыми у планарий. Из того факта, что в этих двух примерах мы имеем дело с истинным внутриклеточным пищеварением, следует признать, что модификации красных кровяных телец внутри фагоцитов крови у улитки и у личинки майского жука также должны быть помещены в ту же категорию явлений.

[78]

Чтобы провести более тщательное изучение этого внутриклеточного пищеварения в фагоцитах крови, мы должны направить наше внимание на более крупных и более высокоорганизованных животных, чем улитка и «ver blanc». Возьмем сначала пример среди низших холоднокровных позвоночных. Красные кровяные тельца нескольких капель (0,25 куб. см) крови морской свинки, введенные в брюшную полость золотой рыбки (Cyprinus auratus), заметно не изменяются самой перитонеальной жидкостью; но многочисленные лейкоциты, которые находятся в перитонеальной жидкости, захватывают их и поглощают, точно так же, как это делают фагоциты крови беспозвоночных или кишечные фагоциты у планарий и актиний в случае красных кровяных телец гуся. Каждый лейкоцит Cyprinus поглощает несколько красных кровяных телец и подвергает их внутриклеточному пищеварению. Строма красных телец становится проницаемой; гемоглобин диффундирует в питательные вакуоли, и по истечении более или менее длительного периода все растворяется и обесцвечивается (рис. 16). Здесь не образуется коричневого пигмента, и красные тельца полностью перевариваются, не оставляя «остатков»; в этом отношении отличаясь от процесса у упомянутых беспозвоночных.

Этот результат зависит, вероятно, отчасти от более слабого сопротивления, оказываемого безъядерными красными тельцами млекопитающих, и отчасти от более активной пищеварительной силы лейкоцитов рыб.

В результате нескольких инъекций крови морской свинки в брюшную полость Cyprinus перитонеальная жидкость приобретает новые свойства [98]. Если через две недели после первой инъекции немного перитонеального экссудата у золотой рыбки будет извлечено, обнаруживается, что капля сыворотки, которая плавает на поверхности, вызывает почти немедленно хорошо выраженную агглютинацию красных телец морской свинки, за чем вскоре следует быстрое растворение этих красных кровяных телец в жидкости. Это новое свойство, которое не существует у необработанной рыбы, также появляется в сыворотке крови Cyprini, обработанных кровью морской свинки. Эксперимент очень успешен при температуре 18°–19° C.

Поскольку растворение или лизис красных кровяных телец в сыворотке точно такой же, как тот, который происходит внутри лейкоцитов Cyprinus, мы вправе предположить, что в обоих случаях он производится одним и тем же веществом. И, поскольку растворяющая или гемолитическая сила сыворотки приобретается только в результате внутриклеточного пищеварения красных кровяных телец лейкоцитами, вероятно, что растворяющее вещество представляет собой внутриклеточный фермент, происходящий из лейкоцитов.

[79]

Предмет, который мы только что затронули, имеет фундаментальное значение в связи с изучением резорбции и зависящих от нее явлений иммунитета. Поэтому необходимо, чтобы мы более полно углубились в его анализ. С этой целью мы должны сначала рассмотреть процессы, которые происходят во время резорбции у высших животных, и продолжить наше изучение изменений, которые введенная или экстравазированная кровь претерпевает в различных положениях организма.

Это изучение становится сравнительно легким для нас благодаря многочисленным исследованиям, которые были проведены патологоанатомами с целью установления судьбы выпотов или экстравазатов крови, столь часто встречающихся при заболеваниях. Давно известно, что при подкожных, мозговых и других кровоизлияниях, или в гепатизированных легких, в излившейся крови обнаруживается большое количество клеток, содержащих красные тельца. Как упоминалось в предыдущей главе, эти клетки были, очевидно, амебоидными клетками, которые поглотили красные кровяные тельца. Лангхансу [99], в частности, мы обязаны детальным изучением явлений, которые следуют за экстравазацией крови, произведенной искусственно в подкожной ткани голубя, кролика и морской свинки. У всех этих животных кровоизлияние рано сопровождается экссудативным воспалением, во время которого лейкоциты приходят в большом количестве и поглощают красные кровяные тельца, которые модифицируются внутри лейкоцитов. Происходит образование или отложение пигмента, и, наконец, все следы красных телец исчезают. У млекопитающих пигмент коричневый или коричневатый, точно так же, как он у планарий и у «ver blanc»; у голубя он зеленый и напоминает тот, что найден у актиний. Короче говоря, существует большая аналогия между резорбцией красных телец и истинным внутриклеточным пищеварением красных кровяных телец, которое происходит в кишечных клетках беспозвоночных.

Но какова природа этих амебоидных элементов, которые вмешиваются в резорбцию экстравазированной крови? В период, когда Лангханс проводил свое исследование, мы были неспособны дифференцировать клетки сколько-нибудь удовлетворительно. Только после публикации классических исследований Эрлиха о белых кровяных тельцах мы смогли внести больше порядка в этот вопрос. Благодаря использованию различных анилиновых красителей Эрлих смог распределить лейкоциты, обнаруженные у позвоночных, на несколько определенных групп.

Вопрос уже был затронут в нашей восьмой лекции о воспалении; поэтому нет необходимости рассматривать его здесь подробно. Мы должны, однако, прежде чем приступать к анализу существенных явлений при резорбции клеток, как мы их теперь понимаем, дать быстрый обзор различных разновидностей амебоидных клеток, которые встречаются у позвоночных.

[80]

Помимо подвижных амебоидных клеток, представленных несколькими формами белых кровяных телец, мы должны различать фиксированные амебоидные клетки. Они постоянно зафиксированы в определенных ситуациях в теле; это, однако, никоим образом не мешает им выбрасывать амебоидные отростки в различных направлениях и захватывать инородные тела или определенные элементы того же организма. Нервные клетки, крупные клетки пульпы селезенки и лимфатических желез, некоторые эндотелиальные клетки, клетки нейроглии и, возможно, некоторые клетки соединительной ткани принадлежат к категории фиксированных амебоидных клеток. Все эти элементы при определенных условиях способны поглощать твердые тела; следовательно, они действуют как фагоциты. За исключением клеток нервных центров, все эти фиксированные фагоциты имеют мезобластическое происхождение. Много обсуждалось, не могут ли некоторые отростки нервных клеток действительно служить для захвата инородных тел и переноса их в содержимое клетки. Нам кажется, что иногда они, несомненно, выполняют эту функцию. Например, только с помощью таких амебоидных движений бациллы проказы могут быть введены внутрь ганглиозных клеток и клеток спинного мозга [100]. Мы не должны останавливаться на этом вопросе, так как фагоцитарное свойство нервных элементов не играет никакой роли в резорбции клеток. С другой стороны, клетки нейроглии вносят большой вклад в этот процесс, и их фагоцитарная функция теперь признается многими наблюдателями [101].

Долгое время крупные «пылевые» клетки дыхательных путей рассматривались как эпителиальные клетки, которые были способны поглощать частицы угля, микроорганизмы и другие инородные тела. Исследования Н. Чистовича, проведенные в моей лаборатории более двенадцати лет назад, сделали очевидным, что эти элементы — не что иное, как белые кровяные тельца, которые иммигрировали в альвеолы и бронхи.

[81]

Вероятно, то же самое происходит и в отношении звездчатых клеток печени, известных как клетки Купфера. Впервые описанные Купфером как клетки нервного типа, имеющие длинные отростки, они были позже признаны несколькими наблюдателями как принадлежащие к эндотелиальной ткани кровеносных сосудов печени. Купфер [102] сам принял этот взгляд, и в своей недавно опубликованной монографии об этих звездчатых клетках он описывает их как эндотелиальные клетки, которые сохранили свою независимость. Некоторые исследования по резорбции крови, о которых я вскоре расскажу, привели меня к мысли, что эти клетки — не что иное, как белые кровяные тельца, которые были задержаны в печеночных капиллярах. Я попросил Мениля, главу моей лаборатории, изучить этот вопрос для меня. Его исследование еще не завершено, но демонстрация, уже сделанная, что печень эмбрионов морских свинок и новорожденных кроликов не обладает никакими клетками Купфера, является аргументом в пользу моей гипотезы.

Определенные белые кровяные тельца, несомненно, часто принимали за клетки эпителиальной или соединительной ткани. Однако из этого не следует делать вывод, что эти элементы никогда не способны выпускать амебоидные отростки и поглощать инородные тела. Тем не менее было бы полезно собрать новые и неоспоримые доказательства точности этого тезиса. Несмотря на эту неопределенность, можно считать полностью доказанным, что некоторые фиксированные амебоидные клетки, такие как крупные элементы пульпы селезенки, лимфатических желез и сальника, играют важную роль в резорбции клеток. Именно там так часто обнаруживаются элементы, заполненные красными кровяными тельцами и белыми кровяными тельцами, находящимися в процессе разрушения.

[82]

Подобно тому как некоторые фиксированные клетки не функционируют как истинные фагоциты, эта функция, несомненно, отсутствует и у некоторых лейкоцитов. Несколько раз высказывалось предположение, что любой клеточный элемент, при условии, что он молодой, способен поглощать инородные тела. Исследование белых кровяных телец доказывает прямо противоположное. Более мелкие белые кровяные тельца, встречающиеся в довольно большом количестве в крови и лимфе и обычно называемые лимфоцитами или малыми лимфоцитами, представляют собой просто лейкоциты с очень малым количеством протоплазмы, которые в этом состоянии никогда не выполняют фагоцитарных функций. Только когда лимфоцит становится старше, когда его ядро, единственное и богатое хроматином, окружается обширным слоем протоплазмы, он становится способным поглощать и резорбировать инородные тела. Некоторые авторы, во главе с Эрлихом, до сих пор присваивают этим более крупным клеткам то же название — лимфоциты. Другие, однако, дают им название крупных мононуклеарных клеток. Таким образом, возможна путаница, тем более что Эрлих включает под этим же термином крупный мононуклеарный лейкоцит — очень редкую форму клетки в крови человека, которая отличается большей способностью ядра к окрашиванию. Чтобы избежать этого неудобства, я предлагаю обозначать крупные лимфоциты названием макрофагов крови и макрофагов лимфы (гемомакрофаги, лимфомакрофаги). Этот термин предпочтительнее термина мононуклеарные лейкоциты, тем более что в экссудатах мы часто встречаем макрофаги с двумя и даже несколькими четко разделенными ядрами. Гигантские клетки, более того, являются не чем иным, как полинуклеарными макрофагами. С другой стороны, лейкоциты, так часто обозначаемые названием полинуклеарных, в действительности содержат лишь одно ядро. Даже Эрлих, который ввел этот термин, признал его несовершенство, но сохранил его на некоторое время, поскольку он уже очень широко использовался и, по его мнению, не мог вызвать недопонимания. В своей превосходной работе об анемии, опубликованной совместно с Лазарусом [103], он теперь соглашается, что название «клетки с полиморфными ядрами» было бы более точным.

Эти полиморфно-ядерные лейкоциты очень многочисленны в крови и во многих экссудатах и отличаются большей избирательной аффинностью их ядра к основным анилиновым красителям и определенной склонностью протоплазмы окрашиваться кислыми анилиновыми красками, такими как эозин. Истинные макрофаги не имеют грануляций, но «полиморфно-ядерные» лейкоциты содержат их много. Эти грануляции иногда бывают «эозинофильными», «псевдоэозинофильными» (или «амфофильными») или даже «нейтрофильными» (как у человека и лошади).

[83]

Эти две основные группы лейкоцитов в целом распространены у позвоночных; и мы уже встречаем их у одной из низших форм позвоночных — Ammocoetes (личинки миноги). Макрофаги этой рыбы обладают всеми основными характеристиками группы, к которой они принадлежат (протоплазма без гранул, легко окрашивается метиленовым синим, крупное ядро, богатое ядерным соком). У «полинуклеарных» форм этого низшего позвоночного протоплазма не окрашивается метиленовым синим, а приобретает слабый розовый оттенок при воздействии эозина; единственное ядро разделено на несколько долей. У позвоночных, стоящих гораздо выше на эволюционной лестнице, эти характеристики меняются. Так, у каймана (Alligator mississipiensis), согласно исследованиям мадам Подвысоцкой, проведенным в моей лаборатории, две основные разновидности лейкоцитов легко обнаруживаются в крови, лимфе и экссудатах. Однако макрофаги, особенно в экссудатах, очень часто снабжены двумя или несколькими ядрами, в то время как малые лейкоциты обладают только одним ядром, которое не разделено на доли. Несмотря на эту особенность, две группы легко различаются. Реакции окрашивания макрофагов идентичны реакциям соответствующих телец у всех других позвоночных; в то время как малые лейкоциты, несмотря на отсутствие полиморфного ядра, легко распознаются по их эозинофильным грануляциям и по особой аффинности ядра к основным анилиновым красителям. При таких обстоятельствах было бы совершенно неуместно обозначать те лейкоциты, которые действительно являются полинуклеарными, то есть обладающими двумя или несколькими ядрами, названием «мононуклеарные», и резервировать название «полинуклеарные» для малых телец, которые обладают только одним ядром, не разделенным на доли. По этой причине гораздо рациональнее сохранить для этих так называемых полинуклеарных клеток предложенное мною название микрофаги. Более того, микрофаги являются истинными фагоцитами. Раньше считалось, что эозинофильные лейкоциты, такие как «тучные клетки (Mastzellen)» Эрлиха, которые идентичны клазматоцитам Ранвье, никогда не поглощают инородные тела. Но (особенно после исследований Месниля [104]) мы были вынуждены изменить наше мнение по этому вопросу. Истинные эозинофильные клетки способны пожирать инородные тела, особенно микроорганизмы, и поэтому должны рассматриваться как фагоциты, принадлежащие к группе микрофагов.

[84]

Особая заслуга Эрлиха и его школы состоит в том, что они тщательно установили факт, что, по крайней мере у млекопитающих, две основные группы белых клеток различаются, среди прочих характеристик, разнообразием своего происхождения. Лимфоциты и мононуклеарные клетки развиваются в селезенке и лимфатических железах, в то время как «полинуклеарные» клетки возникают из гранулярных мононуклеарных миелоцитов костного мозга. Это сейчас общепринято как применимое в подавляющем большинстве случаев. Однако у Ammocoetes обе основные разновидности лейкоцитов возникают из одного и того же органа, рассматриваемого некоторыми наблюдателями как своего рода примитивная селезенка, которая проходит вдоль кишечника и частично окружает его. Месниль любезно согласился сделать срезы этого примитивного органа, на которых можно продемонстрировать, что макрофаги и микрофаги у личинки миноги имеют одно и то же место происхождения. Головастики лягушек и хрящевые рыбы также обладают микрофагами, которые не возникают из костного мозга, поскольку у них эта ткань полностью отсутствует. Но даже у млекопитающих, по крайней мере при определенных патологических состояниях, Доминичи [105] в исследовании, выполненном с большой тщательностью и совершенной техникой, продемонстрировал миелогенную трансформацию, происходящую в селезенке. Так, у взрослого кролика, пораженного септицемией, вызванной брюшнотифозной палочкой, он обнаружил в селезенке центры развития амебоидных элементов, которые в норме, по-видимому, развиваются только в костном мозге, т.е. мегакариоциты, или крупные клетки с почкующимися ядрами, нейтрофильные миелоциты (амфофилы), базофилы и эозинофилы.

Мезобластические фагоциты позвоночных делятся, таким образом, на фиксированные фагоциты — макрофаги селезенки, эндотелия, соединительной ткани, нейроглии и мышечных волокон — и свободные фагоциты. Последние представляют собой иногда гемо- или лимфомакрофаги, иногда микрофаги. Фиксированные макрофаги и свободные макрофаги настолько похожи друг на друга, что очень часто крайне трудно, если не невозможно, их дифференцировать. По этой причине часто очень полезно, когда точное происхождение крупного фагоцита неизвестно, просто называть его «макрофагом».

[85]

Две основные группы фагоцитов — (1) фиксированные и свободные макрофаги, (2) микрофаги — различаются не только своими морфологическими характеристиками; они также проявляют очень заметные физиологические различия. Все фагоциты наделены амебоидным движением, которое позволяет им либо свободно перемещаться, либо просто выпускать протоплазматические отростки. Эти движения регулируются очень высокой чувствительностью, часто различной у двух групп. Помимо тактильного чувства, фагоциты обладают своего рода чувством вкуса или хемотаксисом, который позволяет им различать химический состав веществ, с которыми они вступают в контакт. Существование этого хемотаксиса можно было предвидеть с того момента, как амебоидным клеткам стали приписывать важную роль в жизни организма. Лебер [106], Массар и Шарль Борде [107], однако, продемонстрировали это путем строгого эксперимента. Следуя методу, использованному Пфеффером для демонстрации хемотаксиса растительных сперматозоидов и бактерий, эти исследователи вводили в тела высших (кролики и морские свинки) и низших (лягушки) позвоночных небольшие стеклянные трубки, заполненные различными растворами (пептон, бульон, соли, бактериальные продукты и т. д.). Лейкоциты, ведомые своим положительным хемотаксисом, проникали в трубки и образовывали там пробки, которые часто были очень объемными; когда, с другой стороны, химический состав растворов возбуждал их отрицательный хемотаксис, лейкоциты избегали трубок.

[86]

Получив информацию об основных характеристиках лейкоцитов, мы можем спросить: к какой группе относятся те амебоидные клетки, которые, согласно наблюдениям Лангханса и многих других исследователей, осуществляют резорбцию красных кровяных телец? Эта резорбция протекает быстрее и наблюдается гораздо лучше, если вместо введения крови того же вида в какую-либо часть тела мы вводим дефибринированную кровь или красные кровяные тельца, из которых сыворотка была удалена путем промывания, от другого вида позвоночных. Лучше всего вводить ядерные красные тельца низших позвоночных млекопитающим или (как уже было описано выше) вводить безъядерные красные кровяные тельца млекопитающих низшим позвоночным. Во всех этих случаях введение такой крови или телец вызывает асептическое воспаление, которое привлекает большое количество свободных фагоцитов к месту инъекции. В подкожных, перитонеальных или внутриглазных экссудатах, полученных при этих условиях, мы находим, помимо некоторого количества микрофагов, много макрофагов. В то время как первые поглощают введенные красные тельца лишь в единичных случаях, положительный хемотаксис макрофагов проявляется гораздо активнее. В резорбции красных кровяных телец более важная роль принадлежит макрофагу. Чтобы получить ясное представление о явлениях, сопровождающих эту резорбцию, возьмем конкретный пример. Введем дефибринированную кровь гуся в брюшную полость морских свинок [108]. В течение первых нескольких часов после инъекции овальные ядерные красные тельца обнаруживаются в интактном состоянии в жидкости перитонеальной лимфы. Плазма сама по себе не оказывает разрушающего или растворяющего действия на красные тельца гуся.

Сразу после инъекции лимфа брюшной полости начинает демонстрировать важные изменения. Белые тельца, которые в нормальном состоянии довольно обильны, исчезают почти полностью; некоторые малые лимфоциты, имеющие свой обычный вид, действительно могут быть найдены, но немногие оставшиеся макрофаги и микрофаги показывают признаки очень тяжелых поражений. Они теряют свою подвижность, слипаются в комки и становятся неспособными поглощать инородные тела. В этот момент фагоциты претерпевают критическое изменение, которое мы обозначили названием фаголиз. Это состояние длится около часа, иногда дольше, в зависимости от случая и обстоятельств, но после этого перитонеальная жидкость наполняется лейкоцитами, которые только что появились на сцене. Эти клетки проникают путем диапедеза через стенки переполненных сосудов брюшины. Возникает истинное асептическое воспаление, которое вызывает экссудацию большого количества белых кровяных телец, среди которых обнаруживаются микрофаги и еще более многочисленные макрофаги. Последние проявляют очень выраженный положительный хемотаксис по отношению к введенным красным тельцам гуся. Вскоре после их появления, то есть через два или три часа после инъекции крови, макрофаги выпускают очень маленькие протоплазматические отростки и прикрепляют их к поверхности красных телец. Происходит агрегация макрофагов морской свинки с красными тельцами гуся, и образуются характерные массы, в которых можно распознать оба вида клеток. Это соединение с помощью очень маленьких псевдоподий является первой стадией поглощения красных телец макрофагами (рис. 17). Красное тельце, захваченное амебоидными отростками, переходит внутрь макрофага. Этот макрофаг редко довольствуется поглощением одного красного тельца. Обычно он пожирает большое количество, и иногда можно увидеть огромные макрофаги, заполненные двумя десятками красных телец.

[87]

Если количество крови гуся, введенной морской свинке, велико (5–7 куб. см), поглощение красных телец макрофагами продолжается в течение значительного периода — часто от трех до четырех дней. В течение всего этого времени некоторое количество красных телец остается свободным в перитонеальной плазме, но, несмотря на это длительное пребывание, ни одно из них не подвергается внеклеточному растворению.

Рис. 17. Макрофаг морской свинки в процессе пожирания и переваривания красных кровяных телец гуся.

Рис. 18. Макрофаг морской свинки в акте поглощения и переваривания красных телец гуся. Прижизненное окрашивание нейтральным красным.

[88]

Красные кровяные тельца, закрепленные амебоидными отростками макрофагов, сначала имеют нормальный вид. Позже их мембрана начинает морщиться, но как только они проходят внутрь фагоцитов, морщины исчезают, и тельца восстанавливают свой нормальный вид. Если добавить немного раствора нейтрального красного к капле перитонеального экссудата (рис. 18), мы заметим, что ядро поглощенного красного тельца и даже его содержимое окрашиваются в красный цвет, в то время как красные тельца, прилипшие к поверхности фагоцитов, сохраняют свой нормальный желтый цвет. Эта реакция позволяет нам увидеть, что красные тельца захватываются макрофагами, пока они еще находятся в нормальном состоянии, но претерпевают изменение сразу после того, как были поглощены. Мало-помалу поглощенные тельца перевариваются внутри фагоцитов. Гемоглобин диффундирует в содержимое макрофага через строму, которая стала проницаемой; ядро поглощенного красного тельца также окрашивается гемоглобином. Часть этого красящего вещества выводится фагоцитом. Тело красного тельца довольно быстро переваривается, но ядро, пропитанное гемоглобином, сохраняется гораздо дольше. Оно делится на несколько фрагментов, узнаваемых по их желтому цвету, и в некоторых случаях эти остатки красных телец могут встречаться неделями внутри макрофагов. Эти макрофаги не остаются постоянно в перитонеальной жидкости. Через 3–4 дня после инъекции лимфа брюшины содержит только лейкоциты, которые только что появились и которые не содержат ни красных телец, ни их остатков. Мы должны вскрыть морскую свинку, чтобы найти макрофаги, которые пожирали красные тельца. Они встречаются в большом количестве в железистой части сальника, в брыжеечных железах, в печени и в селезенке. Они довольно легко распознаются по характерному виду обломков красных кровяных телец. Пожирая красные тельца, макрофаги покидают перитонеальную жидкость, и пищеварение завершается в местах, только что упомянутых. В печени они видны как крупные мононуклеарные клетки, часто с высокоразвитыми отростками. В этом состоянии они напоминают звездчатые клетки Купфера — факт, который навел меня на мысль, что эти элементы являются не чем иным, как белыми кровяными тельцами, которые иммигрировали в сосуды печени.

Прослеживая судьбу макрофагов, которые резорбировали красные кровяные тельца, мы находим их в крупных печеночных сосудах, в нижней полой вене и даже в крови сердца. Но в этих последних местах они содержат лишь несколько едва различимых следов своей добычи. Эти фагоциты, которые покинули кровь во время воспаления, последовавшего за инъекцией красных телец гуся, возвращаются в нее, выполнив свою функцию, в течение финального периода резорбции. Эту резорбцию, несомненно, следует рассматривать как внутриклеточное пищеварение. Когда мы сравниваем основные явления, происходящие внутри макрофагов, содержащих красные кровяные тельца, с теми, которые мы описали в кишечных фагоцитах планарий или актиний после еды, аналогия между ними становится очень очевидной. В обоих случаях красные кровяные тельца претерпевают заметное изменение, которое приводит к диффузии гемоглобина. Мембрана и ядро красных кровяных телец сохраняются дольше, но в конечном итоге они также перевариваются. Выделение гемоглобина из фагоцитов, только что упомянутое в случае макрофагов морской свинки, наблюдается также у актиний, чья кишечная полость окрашена раствором розового цвета.

[89]

Мы видели, что у актиний внутриклеточное пищеварение происходит в отчетливо кислой среде, в то время как в кишечных клетках планарий оно происходит в среде, которая является лишь слабокислой. Макрофаги морской свинки во время резорбции красных кровяных телец гуся осуществляют процесс пищеварения в среде, которая показывает еще более слабую кислотность. При поглощении гранул синего лакмуса изменения цвета не происходит. Также не дает никакой реакции ализаринсульфокислота, вероятно, из-за того, что она оказывает токсическое действие на протоплазму макрофагов. Если, однако, мы добавим к капле перитонеального экссудата морской свинки, содержащего макрофаги, заполненные красными кровяными тельцами гуся, немного 1% раствора нейтрального красного Эрлиха, кирпично-красный оттенок сразу появляется в содержимом этих фагоцитов. Эта окраска идентична той, что описана у амеб, которые переваривают бактерии, или в кишечных фагоцитах планарий. Ее можно, таким образом, рассматривать как индикатор слабой кислотности. Эта окраска сохраняется в течение нескольких часов, после чего уступает место полному обесцвечиванию — явлению, которое должно быть приписано, как и во многих других случаях, нейтрализации кислоты щелочной протоплазмой, которая мацерировалась в жидкости после смерти макрофагов.

Пример, который мы выбрали — разрушение красных кровяных телец гуся макрофагами морской свинки — может служить прототипом резорбции форменных элементов в целом. Если вместо красных кровяных телец гуся мы введем в брюшную полость морской свинки кровь голубя или курицы, основные явления будут теми же. Красные кровяные тельца всегда будут вызывать положительный хемотаксис, особенно макрофагов, которые, в свою очередь, будут поглощать ядерные красные тельца. Может быть, в некоторых случаях, когда вводится кровь курицы, содержащая красные тельца, которые не очень устойчивы, некоторое количество телец немедленно подвергается частичному растворению в перитонеальной жидкости [109]. Здесь также стромы и ядра всех красных кровяных телец, а также многие тельца, на которые не подействовала плазма фаголизированного экссудата, подвергаются перевариванию внутри макрофагов.

[90]

Когда вместо крови мы вводим белые тельца из костного мозга, селезенки или лимфатических желез животных в брюшную полость, мы все еще можем наблюдать их окончательное исчезновение в макрофагах. Сперматозоиды человека или различных млекопитающих (быка, кролика, морской свинки и т. д.) при введении в брюшную полость морской свинки или кролика хорошо подходят для этого направления исследований. Здесь опять же непосредственным результатом инъекции является очень выраженный фаголиз лейкоцитов. Это явление уступает место экссудативному воспалению, которое приносит в брюшную полость некоторое количество фагоцитов. Они, особенно макрофаги и в гораздо меньшей степени микрофаги, пожирают сперматозоиды, которые ни в коем случае не растворяются, даже частично, в плазме экссудата. Макрофаг захватывает сперматозоиды, которые иногда, благодаря активным движениям своих жгутиков, проявляют большую жизнеспособность. Через несколько часов все сперматозоиды обнаруживаются внутри фагоцитов, где они полностью разрушаются. Жгутик переваривается первым, но головка и средняя часть вскоре постигает та же участь. Нейтральный красный выявляет слабокислую реакцию, возможно, даже с большей отчетливостью, чем в случае с красными кровяными тельцами.

Резюме исследования Лангханса, приведенное в этой главе, заставило бы нас ожидать, что резорбция в подкожной ткани будет следовать тем же правилам, что и происходящая в брюшной полости. На самом деле, кровь, введенная в это место, вызывает диапедез фагоцитов, которые поглощают красные кровяные тельца. Лишь в некоторых случаях происходит частичное растворение этих телец в жидкости подкожного экссудата. Именно по этой причине кровь гуся, введенная под кожу морской свинки, вызывает жидкий экссудат, окрашенный в ярко-розовый цвет растворенным гемоглобином. Этот гемоглобин происходит из красных кровяных телец, которые повреждаются сывороткой крови гуся, добавленной к плазме экссудата. Строма и ядра красных кровяных телец, однако, не могут быть растворены в этой жидкости. Они подвергаются той же участи, что и красные тельца, которые остались интактными, то есть они поглощаются макрофагами, которые иммигрируют в подкожную ткань и которые в конечном итоге переваривают все эти элементы. Клетки, менее хрупкие, чем некоторые красные тельца, в подкожной ткани, как и в брюшной полости, разрушаются исключительно внутри фагоцитов.

[91]

Аналогия между модификациями, претерпеваемыми красными кровяными тельцами и другими клетками внутри макрофагов, и изменениями, которые происходят в кишечных клетках планарий и актиний, предполагает, что резорбцию форменных элементов, несомненно, следует рассматривать как истинное внутриклеточное пищеварение. Однако было бы очень важным делом иметь возможность подтвердить этот вывод еще более убедительными доказательствами. Изучение искусственного пищеварения, которое наблюдается in vitro в случае мацерированных мезентериальных нитей актиний, предоставило очень ценный аргумент в пользу ферментативной природы внутриклеточного пищеварения. Животные экссудаты не очень хорошо подходят для этого специального направления исследований. Мы можем получить их только в результате инъекции различных веществ, твердых или жидких, которые жадно поглощаются фагоцитами. Если мы собираем экссудаты в момент, когда количество этих клеток все еще значительно, мы должны извлечь вместе с ними много пищеварительных веществ, которые мешают нашему наблюдению. Поэтому мы можем с выгодой обратить наше внимание на массы фагоцитов, собранные в органах. Поскольку именно макрофаги осуществляют резорбцию клеток, очевидно, что мы должны выбрать центры, где они образуются, чтобы исследовать пищеварительные ферменты. Возьмем, таким образом, лимфатические железы брыжейки, железистую часть сальника и селезенку — три преимущественно макрофагальных органа — и посмотрим, можно ли с их экстрактом, приготовленным на физиологическом солевом растворе (0,75% хлорида натрия), получить какой-либо пищеварительный эффект.

Мацерируйте три упомянутых органа морской свинки и смешайте полученные таким образом экстракты с красными кровяными тельцами гуся — тельцами, которые уже дали нам информацию в связи с явлениями резорбции в живом организме. Почти у всех морских свинок можно наблюдать растворение красных кровяных телец гуся экстрактом железистой части сальника. Брыжеечные железы также дают экстракт, который в большинстве случаев обладает растворяющим действием. Экстракт из селезенки активен лишь в ограниченном числе случаев. Во всех этих примерах экстракты из макрофагальных органов вызывают растворение гемоглобина, но оставляют интактными мембрану и ядро телец. В этом отношении существует, таким образом, определенное различие между этим процессом и перевариванием красных телец в макрофагах экссудатов, где мембрана и даже ядро в конце концов полностью растворяются. Это различие может быть объяснено тем фактом, что при приготовлении экстракта в физиологическом солевом растворе может высвободиться только одна часть растворимого пищеварительного фермента.

[92]

Растворяющее действие экстрактов макрофагальных органов должно, по сути, быть приписано присутствию растворимого фермента в клетках, из которых состоят эти органы. Поскольку диастазы отличаются, в общем, своей большой чувствительностью к теплу, мы испытали действие наших экстрактов после предварительного нагревания, когда было обнаружено, что температура 56° C, примененная в течение трех четвертей часа, полностью отменяет растворяющее действие экстрактов на красные кровяные тельца гуся. Растворимый фермент макрофагальных органов, которому мы предлагаем дать название макроцитаза [110] или фермент макрофагов, во многих отношениях аналогичен актино-диастазе Месниля, описанной в предыдущей главе.

С целью получения более полной информации о цитазах я предложил Тарасевичу провести их детальное изучение; это он осуществил в моей лаборатории. Он продемонстрировал, что макрофагальные органы других млекопитающих, помимо морской свинки, особенно кролика и собаки, оказывают такое же растворяющее действие на красные кровяные тельца. Он также установил факт, что это действие распространяется не только на красные тельца гуся, но также охватывает тельца нескольких других птиц и млекопитающих. Тарасевичу удалось подтвердить вредное действие тепла на макроцитазу. Экстракты макрофагальных органов, которые содержат много обломков во взвешенном состоянии, при нагревании в течение часа при 55,5° C в определенных случаях теряют свое растворяющее свойство для красных кровяных телец; иногда эта температура вызывает лишь ослабление макроцитазы. Чтобы уничтожить ее наверняка и полностью, суспензии должны быть нагреты при 58,5–62° C в течение часа. Если, однако, вместо нагревания всей суспензии мы сначала пропустим ее через фильтровальную бумагу, прозрачный жидкий фильтрат лишается своего диастатического действия даже после того, как он был нагрет при 55,5° C в течение трех четвертей часа.

[93]

Из всех других органов, экстракты которых хранились в длительном контакте с красными кровяными тельцами птиц, только поджелудочная железа показала очень хорошо выраженное пищеварительное действие. Экстракты слюнных желез оказывали слабое растворяющее действие на определенное количество красных телец. Другие органы, такие как печень, почки, мозг, спинной мозг, яичник, яички, надпочечники и плацента, не оказывали такого действия. Даже костный мозг, в согласии с моими результатами, опубликованными несколько лет назад, показал себя совершенно неактивным.

Сыворотка крови морских свинок, которую я использовал в своих исследованиях, а также сыворотка животных, исследованных Тарасевичем, не показала себя способной растворять красные кровяные тельца гуся, хотя макрофагальные органы растворяют их легко. Однако давно известно, что сыворотка крови многих животных разрушает красные тельца другого вида. Эта демонстрация была проведена в период, когда предпринимались попытки переливать дефибринированную кровь млекопитающих, особенно овцы, человеку. От этой практики пришлось отказаться вследствие трудностей, возникающих в результате растворения красных телец человека. Позже Даремберг [111] и Бухнер [112] взялись за систематическое изучение этого гемолитического действия сывороток. Они обнаружили, что оно обусловлено особым веществом, которому Бухнер дал название алексин или защитное вещество. Неопределенного химического состава, это вещество родственно альбуминоидным веществам. Оно разрушается при нагревании до 55–56° C и действует только в присутствии определенных солей. Когда эти соли удаляются из сыворотки путем диализа, она теряет свою гемолитическую силу; но как только соли заменяются в надлежащей пропорции, эта сила вновь появляется. Позже Бухнер [113] сравнил действие алексина с действием растворимых ферментов и отнес его к категории пищеварительных диастаз. По его словам, тот же алексин способен растворять красные кровяные тельца нескольких видов позвоночных. Борде [114] в серии исследований, проведенных в Институте Пастера, подтвердил этот взгляд. Он пришел к заключению, что алексины различных видов животных отличаются друг от друга. Так, алексин сыворотки крови кролика не тот же самый, что находится в сыворотке морской свинки или собаки. Тем не менее каждый из этих алексинов способен оказывать растворяющее действие на красные кровяные тельца нескольких видов.

[94]

[95]

Эрлих и Моргенрот [115] в серии мемуаров о растворении красных кровяных телец опровергли идею о том, что в одной и той же сыворотке существует только один алексин. Более того, они утверждают, что алексин всегда требует для своего действия помощи другого вещества, и что дела обстоят гораздо сложнее, чем кажется на первый взгляд. Они утверждают, что в каждой нормальной сыворотке обнаруживается ряд различных веществ, каждое из которых атакует только один вид красных кровяных телец. Они указывают, что растворение красных телец нормальной сывороткой происходит через комбинированное действие двух различных веществ и приводят несколько случаев, когда нормальная сыворотка, после нагревания до 55° C и, таким образом, лишенная своей гемолитической силы, снова становится способной растворять красные тельца, когда к ней добавляется немного нормальной сыворотки от другого вида, которая сама по себе лишена растворяющего свойства. Приведем пример от Эрлиха и Моргенрота. Нормальная сыворотка козы легко растворяет красные кровяные тельца кролика и морской свинки, но если ее нагреть в течение получаса при 55° C, она теряет эту силу. С другой стороны, нормальная сыворотка многих лошадей оказывается бессильной растворять красные тельца этих грызунов. Вот, значит, две сыворотки, одинаково неспособные осуществить растворение красных телец кролика и морской свинки. Тем не менее, когда они смешиваются вместе и к ним добавляется несколько капель крови одного из упомянутых грызунов, гемолиз происходит легко. Нагретая козья сыворотка, таким образом, сохранила в себе нечто, что сопротивляется температуре 55° C, вещество, которое само по себе оставляет красные кровяные тельца интактными; но которое, будучи комбинированным со вторым веществом, присутствующим в сыворотке лошади, вызывает их растворение. Эрлих дает первому веществу, то есть тому, что найдено в нагретой козьей сыворотке, название промежуточного тела («Zwischenkörper»). Второе вещество, присутствующее в ненагретой лошадиной сыворотке, обозначается им как комплемент. Чтобы нормальная сыворотка могла растворить красные тельца, недостаточно, чтобы она обладала одним веществом, алексином Бухнера. Она должна, чтобы оказать это действие, содержать два различных вещества, которые очень часто встречаются вместе в одной и той же нормальной сыворотке. Ненагретая козья сыворотка была способна растворять красные кровяные тельца кролика только потому, что присутствовали и определенный комплемент, и промежуточное вещество. Лишенная своего комплемента при 55° C, сыворотка является растворяющей только тогда, когда мы добавляем к ней другое вещество, которое содержится в нормальной сыворотке другого вида (лошади). Продолжая свои исследования в этом направлении, Эрлих и Моргенрот пришли к заключению, что нормальная сыворотка одного вида может содержать несколько промежуточных веществ, каждое из которых действует на один вид красных кровяных телец. Далее, что нормальная сыворотка должна содержать несколько или даже много различных комплементов.

[96]

Эрлих и Моргенрот проводили исследования промежуточных веществ в нормальных сыворотках и обнаружили несколько в дополнение к уже упомянутому. Сыворотка нормальной собаки легко растворяет красные кровяные тельца морской свинки. При нагревании до 57° C она теряет это свойство; но с добавлением нормальной сыворотки морской свинки свойство восстанавливается. В сыворотке нормальной собаки существует, таким образом, помимо комплемента, по крайней мере одно промежуточное вещество. Тот же результат может быть получен с несколькими комбинациями сывороток нормальных млекопитающих, нагретых или неизмененных [116]. Тем не менее часто случается, как сами Эрлих и Моргенрот указывают, что демонстрация присутствия промежуточного вещества в нормальных сыворотках сопровождается заметными трудностями. Борде, который также очень тщательно изучал этот вопрос, часто терпел полную неудачу в своих попытках сделать нормальные сыворотки, которые были неспособны вызывать гемолиз, активными путем добавления нагретых сывороток других видов животных. Так, он наблюдал, что нормальная сыворотка курицы легко растворяет красные тельца кролика. При нагревании до 55–56° C эта сыворотка теряет свою гемолитическую силу, которая не может быть восстановлена добавлением никакой нормальной сыворотки. Он думает поэтому, что в этом примере гемолиз производится исключительно алексином, без помощи какого-либо промежуточного вещества в сыворотке нормальной курицы. П. Мюллер [117], подтверждая экспериментальные результаты Борде, считает, что в этом случае также имеет место вмешательство промежуточного вещества. Когда он смешивал нагретую сыворотку курицы с небольшим количеством неизмененной сыворотки курицы, растворение красных телец кролика не происходит. Когда, однако, вместо добавления немного ненагретой нормальной сыворотки курицы он добавил такое же количество сыворотки от курицы, предварительно обработанной физиологическим солевым раствором, красные тельца кролика растворялись без всякого труда. Мюллер объясняет это различие тем фактом, что сыворотка обработанной курицы содержит больше комплементарного вещества, чем сыворотка нормальной курицы.

Мы видим, таким образом, из этого примера, что анализ явлений, происходящих при растворении красных телец нормальными сыворотками, сопряжен с очень большими трудностями. По этой причине гораздо выгоднее проводить исследования в этом направлении, используя более активные сыворотки, где демонстрация двух веществ может быть сделана просто и точно. Это пожелание было удовлетворено Ж. Борде, когда он был препаратором в нашей лаборатории; он описал простой метод увеличения гемолитической силы сывороток.