Опубликовано 4 апреля 1912 г.

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА США, БЮРО ХИМИИ — БЮЛЛЕТЕНЬ № 148. Х. У. УАЙЛИ, начальник Бюро.

ТОКСИЧНОСТЬ КОФЕИНА: ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НА РАЗЛИЧНЫХ ВИДАХ ЖИВОТНЫХ.

АВТОРЫ:

УИЛЬЯМ САЛАНТ, начальник Фармакологической лаборатории Отдела лекарственных средств, И ДЖ. Б. РИГЕР, помощник химика.

ВАШИНГТОН: ГОСУДАРСТВЕННАЯ ТИПОГРАФИЯ. 1912.

СОПРОВОДИТЕЛЬНОЕ ПИСЬМО.

U. S. Department of Agriculture,        
Bureau of Chemistry,   
Washington, D. C., November 14, 1911.

Сэр: Имею честь представить на Ваше утверждение рукопись о токсичности кофеина, которая является первым из серии отчетов, подготовленных д-ром Салантом по фармакологии этого препарата; поэтому представленные здесь выводы в некоторых деталях следует рассматривать как предварительные. Полученные данные в первую очередь предназначены для применения закона о пищевых продуктах и лекарственных средствах, но могут иметь гораздо более широкое применение.

Выражаю признательность д-ру Джону Р. Молеру, начальнику Патологического отдела Бюро животноводства, и его сотрудникам за проведение вскрытий, зафиксированных в данном отчете. Рекомендую опубликовать эту рукопись в качестве Бюллетеня № 148 Бюро химии.

С уважением,

Х. У. Уайли, начальник.

Достопочтенному Джеймсу Уилсону, министру сельского хозяйства.

ДАННУЮ ПУБЛИКАЦИЮ можно приобрести у суперинтенданта документов, Государственная типография, Вашингтон, округ Колумбия, по цене 15 центов за экземпляр.

СОДЕРЖАНИЕ.

| Page.
Introduction | 5
Historical review of the literature on the toxicity of caffein | 9
Acute caffein intoxication | 18
    Experiments on rabbits | 18
        Subcutaneous injection | 18
        Administration by mouth | 26
        Injection into the peritoneal cavity | 28
        Intramuscular injection | 33
        Intravenous injection | 37
        Summary | 42
    Experiments on guinea pigs | 43
        Subcutaneous injection | 43
        Injection into the peritoneal cavity | 47
        Administration by mouth | 49
        Summary | 52
    Experiments on cats | 53
        Subcutaneous injection | 53
        Injection into the peritoneal cavity | 56
        Administration by mouth | 57
        Summary | 59
    Experiments on dogs | 60
        Administration by mouth | 60
        Subcutaneous injection | 60
        Experiments on puppies | 61
        Summary | 62
Chronic caffein intoxication | 63
    Experiments on rabbits | 63
    Experiments on dogs | 75
Discussion of results | 91
General summary and conclusions | 95
Bibliography | 97

ТОКСИЧНОСТЬ КОФЕИНА.

ВВЕДЕНИЕ.

Сравнительная физиология установила фундаментальный факт, что некоторые свойства являются общими для всех форм живой материи. Однако тот же метод исследования привел также к признанию заметных различий в физиологических процессах у различных видов животных. Среди наиболее важных исследований, способствовавших пониманию такого функционального разнообразия, можно выделить работы по сравнительному метаболизму. В настоящее время признано, что метаболизм в некоторых отношениях существенно различается у травоядных и плотоядных животных. Некоторые формы окисления протекают гораздо интенсивнее у кроликов, чем у кошек и собак. Метаболизм нуклеинов демонстрирует важные различия у кролика и человека, в то время как способ нейтрализации кислоты в организме можно привести в качестве еще одного примера вариативности метаболизма этих форм. Пожалуй, наиболее яркие примеры различий в метаболизме различных организмов дают результаты исследований судьбы определенных ядов, введенных в организм.

Классические эксперименты Бунге и Шмидеберга (15) по синтезу гиппуровой кислоты представляют интерес в этом отношении. Напомним, что у собаки синтез происходит в почках; кролик способен образовывать гиппуровую кислоту как в печени, так и в почках, в то время как лягушки могут синтезировать гиппуровую кислоту, даже если оба этих органа были удалены или исключены из кровообращения. Наблюдения за судьбой некоторых спиртов ряда жирных кислот также показали, что эти вещества могут соединяться с глюкуроновой кислотой у одних животных, но не у других. Согласно Тирфельдеру и фон Мерингу (84), третичные спирты соединяются таким образом у кролика, но не у собаки. Согласно Нейбауэру (64), первичные и вторичные спирты соединяются таким образом как у собаки, так и у кролика, но в большей степени у последнего.

Поль (73) обнаружил, что амиловый спирт в значительной степени выводится через легкие у кошек и собак. Протоколы его экспериментов показывают, что 65 процентов спирта, введенного этим животным, было обнаружено таким образом, в то время как в выдыхаемом воздухе кролика он обнаружил лишь 22 процента этого вещества. Исследование мочи показало наличие глюкуроновой кислоты. Работа Хофмейстера (37) с теллуром у собак представляет интерес в этой связи. Он сделал важное открытие, что некоторые животные обладают способностью к метилированию, а также к деметилированию. Эксперименты Абдергальдена и Брама (1) с пиридином показывают, что то же самое верно для молодых собак при мясной диете. Его эксперименты на кроликах с этим веществом дали отрицательный результат.

Метаболизм кофеина и теобромина служит еще одной иллюстрацией различий в физиологическом механизме животных. Хотя вещества, обнаруженные в моче человека, собаки и кролика после введения кофеина и теобромина, были одними и теми же, их количества значительно варьировались. Согласно Крюгеру и Шмидту (47), более 14 процентов теобромина, введенного кролику, выводится с мочой в виде 7-метилксантина. Собака выводит лишь около 0,67 процента. С другой стороны, количество выведенного триметилксантина составило лишь 3 процента у собаки и менее 1 процента у кролика.

Таким образом, из исследований сравнительного метаболизма, будь то эндогенного или экзогенного, следует, что у различных видов животных существуют четко выраженные физиологические и химические различия. То, что фармакологическое действие также может варьироваться у разных видов животных, показывают следующие исследования. Согласно Гинару (31), который провел исчерпывающее исследование морфина, реакция на этот алкалоид варьируется у разных форм жизни как качественно, так и количественно. Он установил его наркотический эффект у собаки, кролика, морской свинки, белых мышей и крыс, в то время как для кошки, лошади, быка, овцы, свиньи и козы он, напротив, является стимулятором. Более того, нет никаких доказательств церебрального эффекта. Стимулирующее действие морфина на нервную систему у некоторых животных также наблюдалось Ноэ (65) в экспериментах с этим веществом на ежах.

Гинар (29, 30) также показал, что морфин не оказывает наркотического действия на сурка, хотя это животное очень чувствительно к данному препарату. Было установлено, что два миллиграмма на килограмм являются безусловно смертельной дозой для этого животного. Его эксперименты по сравнительной токсичности морфина (30, 31) показывают значительный диапазон вариаций у разных видов. Так, смертельная доза для собаки составила 0,65 мг на килограмм, тогда как 7 мг на килограмм — смертельная доза для лошади. Около двойной дозы является смертельной для быка, а 0,2 мг на килограмм убивает свинью. Эксперименты с другими препаратами показали, что у животных разных видов существует значительный диапазон различий в устойчивости.

Исследования Ноэ (65) по сравнительной токсичности хлорала выявили интересный факт: кролик более устойчив к нему, чем еж, а последний более устойчив, чем морская свинка. Пожалуй, наиболее ярким примером различия в реакции на одно и то же вещество у сильно различающихся видов является пример апокодеина, хинина и йохимбина. Согласно Ганну (32), было обнаружено, что эти вещества вызывают вазодилатацию у теплокровных животных, но сужают кровеносные сосуды у лягушки.

Эксперименты с апоморфином также показывают, что реакция на это вещество варьируется у разных видов животных. Устойчивость кошки к этому препарату, согласно Гинару (31), в десять раз выше, чем у собаки, а последняя более чувствительна, чем кролик, к кристаллической форме апоморфина при внутривенном введении. Согласно Коберту (45), амигдалин не оказывает действия на собак, но ядовит для кроликов. Лапик (49) обнаружил, что токсичность кураре варьируется у разных видов лягушек: доза, необходимая для вызова паралича у Rana esculenta, в три раза больше, чем у Bufo vulgaris. Уир Митчелл (59) давно отметил, что черепахи переносят огромные дозы кураре. Эксперименты Шмидеберга с кофеином на Rana temporaria и Rana esculenta (а в последнее время — эксперименты Якоби и Головинского (42) с кофеином, теобромином и теофиллином) также представляют интерес в этой связи. Эти исследователи наблюдали четко выраженные различия в реакции на метилксантины у этих близкородственных форм.

Эксперименты с хинином показали, что действие этого вещества различается у некоторых животных. У морской свинки оно вызывает падение температуры сразу после введения, но у кроликов, собак и человека часто вызывает сначала повышение температуры, за которым следует незначительное падение.

Многочисленные исследования, проведенные в последние годы по влиянию атоксила, внесли большой вклад в сравнительную фармакологию этого вещества. Хотя симптомы и органические изменения, вызываемые этим веществом у различных животных, не представляют больших различий, было обнаружено, что устойчивость некоторых из них варьируется; согласно Кёстеру (46), оно более токсично для собак, чем для кроликов. Различные исследователи обнаружили, что токсичность ряда других веществ варьируется для разных видов животных. В качестве иллюстраций можно упомянуть кантаридин, фенол, атропин и стрихнин.

Фармакологические исследования на низших формах жизни также выявили заметные вариации в действии некоторых ядов. Наблюдения, сделанные Данилевским (18) с гидрохиноном, показывают, что растворы от 1 к 100 или 200 токсичны для кишечнополостных, вызывая паралич у этих организмов. Иглокожие погибают в течение одного или двух часов в растворе 1 к 1000 или 2000, в то время как у червей даже более слабые растворы вызывают столбняк и, в конечном итоге, паралич. Эксперименты Држевиной (19) с цианидом калия также интересны в этой связи. Костистые рыбы, помещенные в 100 куб. см морской воды, содержащей двадцати-нормальный цианид калия, проявляли признаки асфиксии и погибали через 10–20 минут. Актинии, помещенные в раствор морской воды, содержащий в пять раз больше цианида калия, были активны на тринадцатый день эксперимента. Аналогичные результаты были получены с другими морскими организмами.

Из этих данных очевидно, что токсичность вещества может значительно варьироваться у разных форм жизни. Также было показано некоторыми исследованиями, цитируемыми Салантом (78), что действие лекарств может изменяться под влиянием различных условий окружающей среды, а также состояния объекта эксперимента. Признание важности этих факторов при определении фармакологического действия внесло большой вклад в выяснение механизма, посредством которого лекарства и другие вещества вызывают физиологические эффекты в организме. Более того, такие знания часто повышали терапевтическую ценность фармакодинамических агентов и часто служили для предотвращения нежелательных эффектов у человека и домашних животных. Результаты, полученные на одном виде животных при определенных условиях, поэтому не допускают универсального применения. Кроме того, характер действия лекарства можно лишь частично изучить по проявлению его острых эффектов. Поэтому не менее важными, особенно в исследованиях токсичности, являются изменения, вызываемые при хронической интоксикации.

То, что острые эффекты вещества вряд ли можно считать правильной оценкой его токсичности, показывают данные, полученные в экспериментах по толерантности и кумулятивному действию лекарств; ибо токсичность вещества может уменьшаться, если вещество вводится постоянно в течение длительного времени, если организм приобретает к нему толерантность. Мышьяк, морфин и индийская конопля могут быть приведены в качестве примеров лекарств, токсичность которых снижается при повторных дозах, в то время как наперстянка и свинец проявляют тенденцию к повышенной токсичности при аналогичном введении. Более того, острые и хронические эффекты иногда качественно различаются. Согласно Игерсхаймеру (41), симптомами при острой интоксикации атоксилом являются тошнота, рвота и диарея. Эти симптомы отсутствуют при хронической интоксикации, при которой наблюдались трофические нарушения кожи и воспаление слизистых оболочек. То, что острое действие атоксила отличается от хронических эффектов, было также показано экспериментами на животных. Исследования фон Анрепа (5) по хронической интоксикации атропином представляют интерес в этой связи, так как он обнаружил, что после 10–15 инъекций атропина не наблюдается проявления симптомов, подобных тем, что наблюдаются при острой интоксикации, в то время как эффекты на кровообращение также менее выражены, а учащение пульса меньше, чем после такой же дозы у нормального субъекта, не привыкшего к его применению. Когда введение атропина продолжается в течение более длительного времени, его обычные эффекты на пульс исчезают вовсе; наблюдается, напротив, уменьшение частоты пульса. Если атропин вводился от двух до трех недель, дыхание также подвергается воздействию.

ИСТОРИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТОКСИЧНОСТИ КОФЕИНА.

Кофеин был открыт в 1820 году Рунге (77), Пельтье (60) и Робике (75) и впервые проанализирован Дюма и Пельтье (20), но его точный процентный состав был определен Пфаффом и Либихом (71, 72), а заслуга в установлении того, что он является основным, принадлежит Герцогу (13, 18). Штрекер (82) получил кофеин синтетическим путем, нагревая теобромин серебра и метилиодид в закрытой трубке в течение 24 часов. Вскоре после его открытия в кофе Удри (67) сообщил о наличии в чае вещества, которое он назвал «теином». Его идентичность с кофеином была установлена 15 лет спустя Джобстом (43), а также Малдером (62, 63). Согласно Бриллу (13), Малдер (1838) был также первым, кто провел эксперименты с кофеином на животных. После введения половины грана беременной крольчихе он наблюдал потерю аппетита и кифоз. У крольчихи произошел выкидыш, но она оправилась от воздействия кофеина. С тех пор он стал предметом многочисленных исследований, которые проводились на различных животных. Наблюдения с кофеином проводились также на человеке. Примерно через четыре года после того, как Малдер опубликовал свои результаты, Леман (51) (1842) сообщил об экспериментах на ряде людей, которым давали кофеин. Введение от 2 до 10 гранов алкалоида сопровождалось головной болью, сердцебиением, увеличением частоты и нерегулярностью пульса, шумом в ушах, фотопсией, бессонницей и даже бредом. Аналогичные эксперименты, о которых сообщил Фридрихс (25) (1846), показывают, что в дозах 25 гранов он может вызвать тяжелые симптомы примерно через 15 минут после введения. Он также наблюдал как циркуляторные, так и нервные симптомы, а также рвоту.

Согласно Альберсу (2) (1852), 4,5 грана цитрата кофеина, введенные подкожно в бедро кролика, вскоре сопровождались уменьшением движения и тремором оперированного бедра. Другими сообщенными симптомами были спазмы лицевых мышц, усиленные дыхательные движения и спутанность сознания. Интерес в этой связи представляют эксперименты Когсвелла (17) (1852) на лягушках. Он пришел к выводу, что по степени разрушительного действия на ткани кофеин значительно превосходит морфин и может быть сравним со стрихнином и кониином; он полагал, что его действие на нервную систему в основном ограничивается влиянием на головной и спинной мозг.

Леман (52) (1853) наблюдал увеличение частоты сердечных сокращений после введения 4 гранов, которые давались при нормальной диете взрослому человеку. Когда доза была удвоена, частота пульса еще больше увеличилась, сердечная деятельность стала сильнее, появились тремор и спутанность мыслей с возбуждением воображения. Также наблюдалось повышенное желание к мочеиспусканию.

Штульман и Фальк (83) (1857) первыми провели исследование токсичности кофеина на животных разных видов. Введение 0,5 грамма кофеина подкожно или ректально кроликам вызывало тремор, тонические и клонические судороги, паралич и сначала увеличение частоты дыхания, за которым следовала сильная одышка. При вскрытии он заметил полнокровие органов, а у двух из трех подопытных кроликов были обнаружены точечные кровоизлияния в мозг с полнокровием мозговых оболочек. У другого кролика наблюдалась анемия мозга. Эксперименты на кошках проводились путем подкожных, внутривенных и ректальных инъекций. Симптомы, наблюдавшиеся после введения 0,5–0,7 грамма кофеина, были такими же, как у кроликов, за исключением того, что у кошек развивалась диарея при введении кофеина, а при вскрытии анатомических поражений не было обнаружено. Влияние кофеина на собак показало, что у особей среднего веса доза 0,5 грамма, введенная через рот, может вызвать беспокойство и увеличение частоты дыхания, в то время как внутривенная инъекция такого же количества таким животным может вызвать смерть. Однако крупные, взрослые собаки выживали после внутривенной инъекции 2 граммов кофеина, проявляя симптомы некоординации, слюнотечения и частой дефекации. Эти исследователи также проводили наблюдения за кофеином, используя голубей и других птиц; 0,5–0,1 грамма, введенные в желудок, вызывали рвоту, диарею, тонические, но чаще клонические судороги, некоординацию, тремор, парез и паралич.

У некоторых, но не у всех птиц, сначала наблюдалось увеличение частоты дыхания, за которым следовала одышка и нарушения кровообращения. Эти количества кофеина оказались смертельными во всех экспериментах на птицах. Воспаление слизистой оболочки кишечника и полнокровие мозговых оболочек были единственными изменениями, обнаруженными при вскрытии. Штульман и Фальк также изучали действие кофеина на рыб и жаб. Митчерлих (60) (1858) скормил 0,4 грамма кофеина с хлебом кролику и заметил понижение температуры, усталость, судороги, сначала увеличенную, затем уменьшенную частоту дыхания, а при вскрытии — полнокровие всех внутренних органов. Он также сообщил о наблюдениях за двумя лягушками, одной из которых дали одну шестнадцатую грана кофеина в пилюле с хлебом. Другой лягушке его вводили в водном растворе, но способ введения не был опубликован. Наблюдавшиеся симптомы были в основном такими же, как у кроликов. У голубей 0,125 грамма, введенные в желудок, вызывали сильную рвоту, мышечную некоординацию, тоническую ригидность конечностей и запрокидывание головы. Частота дыхания была увеличена. Смерть наступила в течение 3 часов 15 минут.

Из серии экспериментов на лягушках, которые Хоппе (38) провел (1858), нанося одну четвертую грана кофеина на мышцы спины, он пришел к выводу, что кофеин вызывает паралич нервов, спинного и головного мозга, причем чувствительность парализуется раньше движения. Вредное действие кофеина исходит, согласно Хоппе, от спинного мозга. Это было основано на экспериментах на двух лягушках, Rana esculenta, у которых правая нога была ампутирована, нерв оставлен нетронутым, в то время как нерв другой ноги был перевязан. Через 30 минут паралич был более выражен на правой стороне, чем на левой. У другой лягушки того же вида он резецировал бедренный нерв с правой стороны; примерно через 1,5 часа после введения кофеина наблюдались судороги. Левая нога была ригидной, а правая — расслабленной.

Войт (85) (1860) перевязал сосуды правой нижней конечности, перерезал нервы левой ноги и ввел несколько капель раствора кофеина в желудок. Вскоре после этого при прикосновении к спине животного возник столбняк правой ноги; левая нога была неподвижна. Позже все тело проявило тетанические судороги. Из этого и подобных экспериментов Войт пришел к выводу, что кофеин действует сначала и главным образом на центральную нервную систему, и что кофеин также ядовит для нервных и мышечных волокон, так как они погибают при воздействии на них раствора кофеина. Действие кофеина, согласно Войту, во многом сходно с действием стрихнина. Эффект на кровеносные сосуды особенно интересен, так как Войт наблюдал расширение сосудов, обусловленное, как он полагал, мышечным параличом, а также транссудацию и полнокровие капилляров.

Курзак (48) (1860) провел исследование сравнительной токсичности кофеина у лягушек и кроликов и пришел к выводу, что летальная доза для лягушек составляет около одной седьмой от дозы для кроликов. Цитрат кофеина в виде кристаллов вводился в обоих случаях через рот. Дозы, данные лягушкам, составляли 1–1,5 грана. Он наблюдал судороги и повышенную дыхательную активность вначале; через час дыхание уменьшилось, а произвольная мышечная активность исчезла. Даже на второй день иногда наблюдались судороги. Смерть наступила в конце первого или второго дня. Были сообщены эксперименты только на двух кроликах, 0,8 грамма цитрата кофеина вызвали смерть одного из них через 13 часов. Наблюдавшиеся симптомы были практически такими же, как у лягушек, но интересно отметить, что экхимоз слизистых оболочек желудка вблизи кардии был единственным поражением, обнаруженным при вскрытии. Несколько экспериментов, проведенных в разные дни на другом кролике, показали, что токсическая доза превышала 0,5 грамма, в то время как меньшие дозы вызывали лишь очень мягкие симптомы.

Согласно Жантильому (27) (1867), после кофеина рефлексы сначала уменьшаются, а затем исчезают вовсе. Смерть вызывается скованностью и неподвижностью всех мышц, особенно дыхательных мышц, что вызывает асфиксию. Он далее утверждал, что кофеин не оказывает влияния на сердечную или гладкую мышечную ткань, его действие специфично для произвольной мышечной ткани, сокращения которой он наблюдал под микроскопом, что полностью отличает его от стрихнина, который является нервным ядом.

Эти наблюдения, по-видимому, были подтверждены Праттом (74) (1868), который сообщил, что изолированные задние конечности и мышечные волокна жабы, помещенные в раствор кофеина (1 гран на бокал воды) на три минуты, сократились, в то время как контрольные образцы, помещенные в дистиллированную воду, расслабились. Этот эксперимент, конечно, дефектен, так как в обоих случаях следовало использовать нормальный солевой раствор. Когда мышечные волокна, предварительно погруженные в раствор кофеина, были помещены под микроскоп, наблюдались сильные сокращения. Тот же автор вводил от 2 до 18 гранов за дозу пяти здоровым молодым людям. После введения 12 гранов он заметил душевную тревогу, тремор рук и рук, а также бессонницу. Дозы менее 5 гранов не имели заметного эффекта, кроме уменьшения частоты пульса и бодрствования.

Примерно в то же время Эмори (4) (1868) опубликовал результаты своих исследований токсичности кофеина у кошек, собак, кроликов и голубей. Во всех случаях очень большие дозы вводились непосредственно в желудок с помощью временной желудочной фистулы. Десять гранов, данных с мясом собаке, вызвали беспокойство, но никаких других симптомов. Дозы 30 гранов и выше были неизменно смертельными. Семьдесят три грана, данные кошке, вызвали смерть в течение 20 минут.

На основании наблюдений за лягушками, морскими свинками, кроликами и одной собакой Левен (53) (1868) пришел к выводу, что кофеин, который он давал в виде цитрата в дозах от 10 мг лягушкам, от 150 до 200 мг морским свинкам и в три-четыре раза большее количество кроликам, стимулирует центральную нервную систему и произвольные, сердечные и гладкие мышцы. Он обнаружил, что 0,9 грамма кофеина были смертельны для кролика при подкожной инъекции, тогда как 1 грамм цитрата не был токсичен для собаки среднего размера. Кофеин, нанесенный непосредственно на мышечное волокно, вызывает столбняк и разрушает мышечную сократимость, в то время как нервное волокно, подвергшееся аналогичной обработке, теряет свою раздражимость.

Согласно Йохансену (44) (1869), кофеин действует непосредственно на мышечное волокно. После подкожной инъекции 0,02 грамма кофеина лягушкам он наблюдал сокращение мышц в месте инъекции, затем сокращение передних конечностей, и, наконец, задние конечности становились ригидными и вытянутыми. Йохансен наблюдал мышечную ригидность после кофеина даже после инъекции кураре, или после перевязки сосудов, или перерезания нервов, снабжающих мышцы. Он также заметил, что большие дозы кофеина уменьшают мышечную раздражимость. Когда сердечная мышца была отравлена кофеином, микроскопическое исследование показало, что исчерченность исчезла. Йохансен также утверждает, что рефлексы исчезают после отравления кофеином. Он никогда не наблюдал столбняка у лягушек, но сообщал о тонических и клонических судорогах в результате отравления кофеином у млекопитающих. Несколько иные эффекты кофеина у лягушек наблюдали Бухгейм и Эйзенменгер (14) (1870). После инъекции 2 процентов цитрата лягушки вскоре становились неактивными. Он также наблюдал мышечное подергивание конечностей, которое постепенно усиливалось, с ригидностью мышц и опистотонусом, в то время как дыхание становилось медленным и поверхностным, наконец, останавливаясь вовсе.

Обер (6) (1872) изучал токсичность кофеина у человека и других животных. После приема 0,36 грамма он наблюдал головокружение, но дозы 0,12 и 0,24 грамма не имели никакого видимого эффекта. С другой стороны, доза 0,5 грамма кофеина сопровождалась увеличением частоты пульса, которое вскоре исчезло. Через час он заметил головокружение и дрожь в руках, которые также вскоре прошли. Инъекция 0,16 грамма 2-процентного раствора кофеина в яремную вену кролика весом 1090 граммов вызвала столбняк и смерть через две с половиной минуты, а 0,12 грамма, введенные кролику весом 980 граммов, вызвали смерть через одну минуту. Однако гораздо большие дозы могли быть перенесены, когда прибегали к искусственному дыханию. Собака, которой дали 3 грамма кофеина, выжила, когда проводилось искусственное дыхание. Обер сообщает, с другой стороны, об аналогичном эксперименте с 0,25 грамма кофеина, который закончился смертельно.

То, что кофеин может вызывать различные эффекты у разных видов животных, было впервые замечено Беннеттом (9). Он изучал его действие на лягушках, мышах, кроликах и кошках и пытался определить минимальную смертельную дозу у кроликов и кошек. Он также сообщил об экспериментах с теином. В своем первом сообщении на эту тему он заявляет, что введение теина кроликам сначала увеличивало, а затем уменьшало частоту дыхания, в то время как частота пульса уменьшалась. Кофеин, который, по-видимому, он считал отличным от теина, вызывал увеличение частоты дыхания, в то время как пульс был заметно замедлен после предварительного ускорения. Он также заметил полнокровие ушей, мышечную некоординацию, столбняк, паралич, уменьшенные рефлексы и сужение зрачков. Беннетт сообщил, что минимальная смертельная доза кофеина для кролика весом 3,25 фунта составляет 5,25–5,5 грана. Симптомами у кошек после введения токсических доз теина или кофеина были сильное возбуждение, паралич, чередующийся с судорогами, и обильное слюнотечение. Минимальная смертельная доза для кошки весом 5 фунтов составляла, согласно Беннетту, 6 гранов кофеина и 5,5 грана теина. Сообщается только об одном эксперименте на мыши; введение 0,1 грана оказалось смертельным. Симптомы были такими же, как те, что наблюдались у кошек и кроликов после введения кофеина. Эксперименты на лягушках показывают, что симптомы были примерно такими же, как описанные ранее в случае теплокровных животных, за исключением того, что рефлексы почти полностью исчезают после подкожной инъекции доз от одной шестнадцатой до одной двенадцатой грана. Последняя доза была смертельной для лягушек. Было бы интересно узнать сравнительную токсичность кофеина для лягушек и млекопитающих, но, к сожалению, вес не был сообщен.

Шмидеберг (79) (1874) заметил, что введение 20 мг кофеина лягушкам весом около 45 граммов сопровождалось у Rana esculenta примерно через 25 минут увеличением рефлексов, а 7 минут спустя — столбняком. Произошло несколько приступов, но тонические спазмы никогда не наблюдались. Напротив, когда такое же количество кофеина давали Rana temporaria весом 45 граммов, он заметил заметное уменьшение рефлексов и тоническую ригидность мышц через 23 минуты; однако рефлексы были значительно увеличены примерно через 24 часа. Лягушки находились под наблюдением в течение трех дней, и, хотя симптомы все еще присутствовали в конце этого времени у особей обоих видов, столбняк никогда не наблюдался у Rana temporaria.

Исследования Перетти (70) (1875) по влиянию кофеина ограничивались главным образом наблюдениями за собаками. Он также проводил наблюдения за несколькими кроликами и сообщил об эксперименте на одной кошке, которой он ввел путем подкожной инъекции 0,18 грамма кофеина на килограмм и заметил увеличение частоты слезотечения и крика. Кошка была найдена мертвой на следующий день. Подкожная инъекция кролику, которому проводилось искусственное дыхание, 0,36 грамма кофеина на килограмм оказалась смертельной вскоре после инъекции без каких-либо проявлений симптомов. Малые дозы кофеина, 0,1 грамма, данные кролику весом 3670 граммов, не вызвали никаких видимых эффектов. Дозы менее 0,1 грамма на килограмм также не вызвали никаких симптомов у собак. Когда 0,1 грамма кофеина на килограмм давали через рот или подкожно, это сопровождалось беспокойством, слюнотечением, ригидностью задних ног и рвотой. В обоих случаях собаки выздоравливали. Симптомы были более тяжелыми, когда доза была увеличена до 0,185 грамма на килограмм, но даже в этом случае собака выздоровела. Доза 0,2 грамма на килограмм, однако, оказалась смертельной.

Эннеги (36) (1875) экспериментировал на трех лягушках, которым он ввел 0,01 грамма цитрата кофеина подкожно. Он наблюдал умеренную стимуляцию нервной системы и мышц, а также увеличение сердечной деятельности. Позже произвольное движение и дыхание исчезли, а ощущения уменьшились, но появились судороги конечностей. Сердечная деятельность затем уменьшилась, сердце в конечном итоге остановилось в систоле. Поскольку двигательные нервы сохраняли свою раздражимость даже после исчезновения рефлексов, он пришел к выводу, что потеря движения была обусловлена действием кофеина на нервные центры.

Бинц (11) (1878) сообщил об экспериментах на собаках, а также провел некоторые наблюдения за человеком с кофеином. Подкожные инъекции 0,2 грамма кофеина могут оказаться смертельными для собак, хотя некоторые выживают после такой дозы. Токсическая доза для человека варьируется от 0,5 до 1,5 грамма. Нарушение кровообращения, такое как сердцебиение и полнота пульса, беспокойство и диарея, были симптомами, которые он наблюдал.

Обширные исследования действия кофеина были проведены Леблоном (50) (1883), который изучал его влияние на кровообращение у человека и низших животных, а также его токсичность только у низших животных. От пяти до двадцати сантиграммов кофеина и 0,06–0,25 грамма салицилата натрия растворяли и вводили в мышцы бедра молодых морских свинок весом чуть более 300 граммов. В трех сообщенных экспериментах смерть животных наступила через 23 минуты, 40 минут и 1 час 20 минут. Симптомы появились через 10–15 минут после инъекции кофеина. Некоординация движений, судороги, как тонические, так и клонические, опистотонус, тремор, увеличение частоты дыхания, атаксия, паралич были наблюдаемыми симптомами. Стоит отметить, что появление пареза предшествовало судорогам. У одной свинки сообщалось об уменьшении чувствительности, но у других не наблюдалось ни сенсорных нарушений, ни рефлексов. Двум кроликам, один из которых получил 0,5, а другой около 0,3 грамма кофеина на килограмм с равными частями салицилата натрия, делали подкожные инъекции в бедро. Наблюдались уменьшение чувствительности, парез задних конечностей, гипервозбудимость, судороги, опистотонус, расширение вен уха. Смерть наступила через 1 час 23 минуты у одного кролика и через 3 часа 7 минут у другого.

Филене (22) (1886) экспериментировал с кофеином на Rana esculenta и Rana temporaria. Подкожная инъекция 7 мг кофеина Rana esculenta вызывала столбняк, в то время как 50 мг, данные через рот, вызывали тонические спазмы. Он далее заявил, что разница между Rana esculenta и Rana temporaria в отношении реакции на кофеин была только в степени.

Амат (3) (1889) сообщил об экспериментах на трех морских свинках, в которых 0,4–0,5 грамма на килограмм при подкожной инъекции оказались смертельными в течение 38 и 44 минут. Одна морская свинка, получившая 0,1 грамма кофеина на килограмм, выжила. Симптомами, наблюдавшимися в двух смертельных случаях, были общая мышечная ригидность и судороги.

Паризо (68) (1890) провел исследование токсичности кофеина на различных видах животных. В отличие от большинства своих предшественников, однако, он сообщил, по крайней мере в некоторых случаях, вес животных, на которых работал. После подкожных и внутримышечных инъекций от 5 до 20 мг кофеина Rana temporaria весом от 14 до 16 граммов он заметил сначала повышенную раздражимость; позже — потерю рефлексов, неспособность использовать мышцы, полную мышечную ригидность, напоминающую трупное окоченение, а также прекращение сердечной деятельности. Эффект кофеина, произведенный на зеленой лягушке, был аналогичен тому, что наблюдался при отравлении стрихнином. Паризо обнаружил, однако, что мышечная ригидность развивалась, хотя и очень постепенно, также у зеленой лягушки, но она наступала гораздо позже, чем у лягушек других видов, и без вытеснения клонических судорог. Согласно Паризо, мышечная ригидность после кофеина сохраняется после разрушения головного и спинного мозга, тем самым показывая, что она не имеет нервного происхождения. Он далее подчеркнул разницу в поведении этих двух видов лягушек по отношению к кофеину, заявив, что никогда не наблюдал тетанических судорог у красной лягушки. Его эксперименты также показывают, что зеленая лягушка более устойчива к кофеину, чем Rana temporaria, так как те же дозы, которые являются смертельными для последней, были лишь токсичными для Rana esculenta. Количество экспериментов, однако, слишком мало, чтобы оправдать положительный вывод по этому пункту. Паризо также провел некоторые эксперименты на черепахах. Полученные им результаты показывают, что кофеин по крайней мере так же токсичен для этих животных, как и для лягушек, на которых он экспериментировал, 0,33 грамма на килограмм (панцирь не включен в вес) оказались смертельными в течение 24 часов. Два эксперимента на одном голубе также были сообщены тем же наблюдателем; две дозы по 0,06 грамма на килограмм, данные с интервалом в четыре часа, вызвали психическую депрессию и мышечную ригидность, но голубь выжил.

Эксперименты с кофеином на человеке, проведенные Паризо, показали, что человек гораздо более восприимчив к этому веществу, чем другие животные, которых он исследовал. После приема 0,3 грамма кофеина появились симптомы интоксикации, указывающие на церебральное нарушение, которые становились более выраженными при увеличении размера доз.

Будет замечено, что характер действия кофеина, является ли он нервным или мышечным ядом, стал предметом нескольких исследований. Бинц (11) (1890) привел дополнительные доказательства в поддержку мнения, что кофеин действует прежде всего на ганглиозные клетки, а не непосредственно на мышцу. Это он показал, введя 0,5 грамма каждому из двух кроликов после перерезания седалищного нерва с одной стороны; в одном случае он также резецировал запирательный и бедренный нервы с той же стороны. Клонические спазмы развились у обоих субъектов вскоре после введения кофеина, но у каждого кролика оперированная сторона оставалась парализованной. Бальди (8) (1891) изучал действие кофеина на Rana esculenta. После инъекции от 4 до 20 мг наблюдался столбняк, подобный тому, что наблюдается при отравлении стрихнином. Фрёнер (26) (1892) провел наблюдения за сравнительной токсичностью кофеина у домашних животных. После введения 5 граммов салицилата натрия кофеина через рот собаке весом 10 кг он заметил слюнотечение, беспокойство, рвоту и судороги, как при отравлении стрихнином. Смерть наступила через три часа после введения препарата. При вскрытии он заметил легкое воспаление слизистых оболочек желудка и кишечника и отек легких; сердце было в диастоле. Доза 2 грамма салицилата натрия кофеина, введенная тому же животному подкожно двумя днями ранее, спровоцировала лишь очень слабые симптомы. Подкожная инъекция 10 граммов того же препарата свинье весом 30 кг вызвала смерть через два с половиной часа с проявлением симптомов нарушения нервной системы и желудочно-кишечного раздражения. Та же доза на килограмм веса тела, данная козе, также вызвала смерть через два с половиной часа после введения. Исследование при вскрытии выявило воспаление желудочно-кишечного тракта. Аналогичные поражения были найдены у лошади, убитой 100 граммами кофеина, у которой он также заметил кровоизлияние слизистой оболочки в дне желудка.

Гуревич (28) (1907) провел эксперименты с кофеином на кроликах, голубях и белых крысах. Из его протокола следует, что однократные дозы около 0,2–0,25 грамма кофеина на килограмм при подкожном введении оказались смертельными. Он заявляет, однако, что устойчивость к кофеину заметно снижалась при его ежедневном повторном введении, так как гораздо меньшие количества были достаточны, чтобы вызвать смерть у этих животных. Доза 120 мг кофеина на килограмм оказалась смертельной после третьей инъекции. Когда доза была увеличена до 170 мг на килограмм, животное погибло от воздействия кофеина после второй инъекции. Его эксперименты на других животных не указывают на степень устойчивости к кофеину, так как вес для некоторых не был указан, в то время как для других не было предпринято попыток определить минимальную токсическую или смертельную дозу.

Морель (55) (1907) изучал влияние различных методов введения на токсичность кофеина у лягушек и кроликов. Он определил минимальные токсические и летальные дозы гидробромида кофеина, который он использовал в 1–2-процентных растворах. Из своих экспериментов он пришел к выводу, что токсичность кофеина при введении через рот в два раза выше для лягушки, чем для кролика.

Совсем недавно Хейл (33) провел ряд экспериментов на морских свинках, в которых он определил токсичность кофеина, данного в виде цитрата и сделанного в пилюлю со слизью акации и крахмалом аррорута. После того как пилюля была высушена, ее скармливали животному, принимая надлежащие меры предосторожности, чтобы ничего не было потеряно во время кормления. Из экспериментов на морских свинках, которые получили дозы 0,3–0,6 грамма цитрата кофеина, были сообщены следующие данные: три дециграмма на килограмм, данные одной свинке, не были смертельными. Из трех свинок, которые получили 0,4 на килограмм, одна умерла, а две выжили. Точно такие же результаты были получены у трех других, которые получили 0,5 на килограмм. Две морские свинки, которые получили 0,55 и 0,6 на килограмм каждая, умерли через 15 и 7 часов соответственно, в то время как другое животное выжило после дозы 0,45 на килограмм.

Этот обзор литературы по токсичности кофеина, хотя и свидетельствует о значительных исследованиях и охватывает три четверти века, носит в основном качественный характер. Из экспериментов следует, что основной целью исследований было установление характера действия кофеина, является ли он мышечным или нервным ядом. Сравнительная токсичность у разных видов животных путем точного определения токсических и смертельных доз получила мало внимания. Чтобы заполнить пробел в наших знаниях о токсических эффектах кофеина, было предпринято настоящее исследование. Это, как будет видно, оказалось самой трудоемкой задачей, потому что в большом количестве экспериментов тщательные наблюдения показали, что особи одного и того же вида значительно варьировались в своей реакции на препарат. Многочисленные другие факторы, как будет показано, также играют важную роль в определении токсичности кофеина.

ОСТРАЯ ИНТОКСИКАЦИЯ КОФЕИНОМ.

Целью этих экспериментов было определение устойчивости к кофеину у различных видов животных и при различных методах введения. Поэтому кофеин давали через рот и вводили подкожно, в брюшную полость, в мышцы и внутривенно. Насколько можно было судить по внешнему виду, для экспериментов отбирались здоровые животные, но поскольку невозможно с какой-либо степенью точности диагностировать состояние животного, пока оно живо, во многих случаях, когда исход эксперимента был смертельным, прибегали к посмертным исследованиям. Поскольку возраст животного может изменять токсичность, для этих экспериментов использовали как взрослых, так и молодых животных; диета, порода и сезон также играют важную роль в определении токсичности препарата, и эти факторы также учитывались в настоящем исследовании.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА КРОЛИКАХ.

Использовались животные разных пород, которым кофеин вводили всеми методами, указанными в предыдущем параграфе. Некоторые из кроликов, использованных в этих экспериментах, получали овес, другие получали диету исключительно из моркови в течение нескольких дней или недель до введения кофеина. Эксперименты проводились во все времена года.

ПОДКОЖНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Из изучения литературы по токсичности кофеина казалось, что около 150 мг на килограмм, вероятно, является летальной дозой для кролика при подкожной инъекции препарата. Поэтому были проведены предварительные наблюдения с такой дозой, но было обнаружено, напротив, что это количество на килограмм едва ли было достаточным, чтобы вызвать симптомы в подавляющем большинстве случаев.

Серия А.

[В этих экспериментах использовались дозы от 147 до 167 мг кофеина на килограмм.]

Rabbit 332. Belgian hare, female. Weight, 1,070 grams. Diet, oats.

25 марта: 8,5 куб. см 2-процентного кофеина (158 мг на килограмм) введено подкожно в 14:15; 16:00, рефлексы усилены; 17:45, усиление рефлексов еще более выражено.

26 марта: Кролик выглядел нормально; симптомов не наблюдалось.

Rabbit 331. Belgian hare, female. Weight, 1,170 grams. Diet, oats.

25 марта: 14:15, 9 куб. см 2-процентного кофеина (153 мг на килограмм) введено подкожно; 16:00, рефлексы усилены; 17:45, состояние то же.

26 марта: Кролик выглядит нормально; симптомов не наблюдалось.

Rabbit 328. Belgian hare, female. Weight, 1,200 grams. Diet, oats.

25 марта: 9 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно (150 мг на килограмм); 16:00, рефлексы усилены; 17:45, рефлексы усилены, но не значительно.

26 марта: Симптомов нет; кролик выглядит нормально.

Rabbit 322. White female. Weight, 1,065 grams. Diet, oats.

17 марта: 8 куб. см 2-процентного кофеина (150 мг на килограмм) введено подкожно в 11:55; 12:55, рефлексы усилены, но нет ни столбняка, ни каких-либо других симптомов.

18 марта: Кролик бегает по клетке; состояние, по-видимому, нормальное.

25 марта: Состояние кролика хорошее.

Rabbit 217. White. Weight, 1,355 grams. Diet, oats.

29 октября: 10 куб. см 2-процентного кофеина (147 мг на килограмм) введено подкожно в 13:51. 17:15, кролик жив; выжил.

Rabbit 219. Maltese. Weight, 1,820 grams. Diet, oats.

29 октября: 14 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в 13:40 (153 мг на килограмм); 17:15, кролик жив; выжил.

Rabbit 194. White female. Weight, 1,490 grams. Diet, oats.

14 октября: 13 куб. см 2-процентного кофеина (174 мг на килограмм) введено подкожно; наблюдались усиленные рефлексы и тремор.

15 октября: Состояние кролика хорошее; симптомов нет.

Rabbit 191. Brown male. Weight, 1,915 grams. Diet, oats.

14 октября: 16 см³ 2-процентного раствора кофеина (167 мг на килограмм) введено подкожно; рефлексы усилены, наблюдается тремор.

15 октября: Состояние кролика хорошее.

Изучение этой серии показывает, что около 150 мг кофеина на килограмм вызывали усиление рефлексов в течение одного-двух часов после инъекции. При увеличении дозы, как у кроликов 194 и 191, симптомы были более выраженными; 150 мг на килограмм можно считать минимальной дозой, вызывающей симптомы нервной раздражительности при подкожном введении кофеина. В связи с этим были проведены эксперименты с более высокими дозами для определения минимальной летальной дозы.

Серия B.

В этих экспериментах применялось примерно 0,2 грамма кофеина на килограмм. Диета и порода как возможные факторы, которые могут влиять на токсичность кофеина, стали предметом изучения в этих экспериментах, разделенных на две группы, как показано в таблице на странице 25.

Rabbit 95. Gray and white male. Weight, 1,478 grams. Diet, oats.

27 февраля: 11:30, 15 см³ 2-процентного раствора кофеина (210 мг на килограмм) введено подкожно; 14:20, симптомов нет, при прикосновении наблюдается тремор, но не выраженный, рефлексы слегка усилены, мышечной ригидности или других симптомов нет; 14:45, кролик внезапно стал очень беспокойным, спрыгнул со стола, начались судороги; 15:45, кролик умер, трупное окоченение наступило почти сразу после смерти.

Rabbit 96. Gray and white male. Weight, 1,585 grams. Diet, oats.

27 февраля: 16 см³ 2-процентного раствора кофеина (200 мг на килограмм) введено подкожно в 15:40; усиление рефлексов наблюдалось примерно через час после инъекции кофеина, других симптомов не было.

28 февраля: Кролик найден мертвым.

Rabbit 112. Black female. Weight, 875 grams. Diet, oats.

18 марта: 9 см³ 2-процентного раствора кофеина (205 мг на килограмм) введено подкожно в 15:00; 15:30, кролик стал беспокойным, рефлексы усилены, наблюдался тремор, других симптомов нет; 16:15, у кролика наблюдался тремор, при попытке взять его на руки тетанус не возник, 10 минут спустя произошел кратковременный тетанус с последующим восстановлением.

19 марта: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 119. Yellow white female. Weight, 1,060 grams. Diet, oats.

17 апреля: 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (188 мг на килограмм) введено подкожно в 14:10.

18 апреля: Кролик найден мертвым.

Rabbit 195. White female. Weight, 1,300 grams. Diet, carrots, since October 7.

14 октября: 13 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно в 11:15; 14:25, у кролика начались судороги, и он умер. Примечание: Было замечено изъязвление прямой кишки.

Rabbit 208. Gray. Weight, 1,068 grams. Diet, carrots, October 7-15, inclusive.

15 октября: 10 см³ 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в 11:00; 13:00, наблюдались усиление рефлексов и тремор; 15:45, тремор стал выраженным при прикосновении к кролику.

16 октября: Кролик найден мертвым. Примечание: Выглядел истощенным.

Rabbit 247. Belgian hare, female. Weight, 1,295 grams. Diet, oats last 10 days before experiment.

10 ноября: 11:00, моча, полученная из мочевого пузыря, была кислой по лакмусу и не содержала сахара или альбумина, введено подкожно 13 см³ 2-процентного раствора кофеина; 13:30, полученные 15 см³ мочи были заметно щелочными по лакмусу и восстанавливали реактив Фелинга; 14:30, восстановление мочи значительное, наблюдался выраженный тремор, но тетануса не было.

11 ноября: 10:30, собранные 95 см³ мочи дали умеренное восстановление реактива Фелинга, симптомов нет, состояние кролика казалось хорошим.

Rabbit 248. Belgian hare, female. Weight, 1,305 grams. Diet, oats the last 10 days before the experiment.

10 ноября: 11:00, моча заметно кислая по лакмусу, альбумина нет, сахара нет; введено подкожно 13 см³ 2-процентного раствора кофеина; 13:30, моча слегка щелочная по лакмусу, восстановления реактива Фелинга нет; 14:00, рефлексы усилены; 14:30, получено 2 см³ мочи из мочевого пузыря, сахар в избытке; 16:45, рефлексы усилены, как и прежде, но тетануса нет.

11 ноября: 10:30, собранная моча показала слабое восстановление реактива Фелинга; в остальном состояние кролика хорошее; кролик не проявил никаких эффектов кофеина.

Rabbit 337. Belgian hare. Weight, 1,040 grams. Diet, carrots, March 31 to April 6, inclusive.

6 апреля: 15:00, 11 см³ 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в область спины (0,211 на килограмм); 16:30, рефлексы значительно преувеличены.

7 апреля: 8:15; состояние хорошее, симптомов нет.

Rabbit 336. Belgian hare. Weight, 1,040 grams. Diet, carrots, March 31 to April 6, inclusive.

April 6: 3 p. m., 11 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously into tissues of the back.

7 апреля: 8:15, симптомов нет, состояние хорошее.

Хотя симптомы у кроликов группы I (см. таблицу на стр. 25) появились примерно через то же время после введения кофеина, что и у кроликов предыдущей серии, все они погибли в период от 2¼ до 24 часов после введения. Двух из этих кроликов (№ 195 и 208) в течение нескольких дней перед инъекцией кофеина кормили морковью, остальных — овсом. Поскольку симптомы и смерть у этих двух кроликов наступили примерно в то же время, что и у остальных в этой группе, можно сделать вывод, что кофеин не менее токсичен при кормлении морковью, чем при исключительной диете из овса. Но поскольку кролик № 208 был истощен, а у № 195 наблюдалось изъязвление прямой кишки, вполне возможно, что кофеин мог бы быть менее токсичным для нормальных кроликов на этой диете. Это было проверено на кроликах № 336 и 337, которые не имели отклонений и были хорошо упитаны. Поскольку эти кролики выжили и проявили лишь слабые симптомы интоксикации, можно предположить, что морковная диета снижает токсичность кофеина.

Однако было высказано предположение, что причиной большей устойчивости к кофеину у этих двух кроликов мог быть другой фактор, а именно порода. Это было проверено на кроликах 247 и 248, оба — бельгийские зайцы. Поскольку токсичность кофеина для этих двух кроликов была такой же, как для № 336 и 337, диету как фактор острой интоксикации кофеином можно не учитывать. Большая устойчивость к кофеину у этих четырех кроликов, по всей вероятности, обусловлена различием пород. Это предположение получило дополнительное подтверждение в экспериментах следующей серии.

Серия C.

Целью этих экспериментов было определение минимальной летальной дозы для серого кролика и получение дополнительных данных о токсичности кофеина для различных пород кроликов. Было проведено восемь экспериментов, в которых вводилось от 236 до 252 мг на килограмм. Белые кролики, в количестве трех особей, получили 250, 242 и 238 мг на килограмм. Все остальные (бельгийские зайцы) получили от 236 до 252 мг на килограмм. Двух белых кроликов в течение недели перед инъекцией кофеина кормили морковью. Третьего кормили овсом. Трое бельгийских зайцев находились на диете из овса, двух кормили морковью за неделю до эксперимента с кофеином.

Rabbit 122. White, female. Weight, 2,060 grams. Diet, oats.

14 апреля: 25 см³ 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм) в водном растворе введено подкожно в область спины в 13:35; 16:30, тремор, рефлексы усилены, в остальном состояние хорошее.

16 апреля: 9:00, найден мертвым в клетке. Вскрытие: Печень сильно полнокровна; почки полнокровны в корковом и мозговом слоях; в желудке обнаружены небольшие геморрагические участки, прободные язвы в пилорической части; на слизистой оболочке тонкой кишки петехии; легкие и селезенка в норме.

Rabbit 234. White, female. Weight, 1,650 grams. Diet, November 2-9, carrots.

November 9: 10.45 a. m., 20 cc 2 per cent caffein (242 mg per kilo) administered subcutaneously.

10 ноября: 21:00, найден мертвым.

Rabbit 335. Gray hare, female. Weight, 1,170 grams. Diet, March 31 to April 7, carrots.

7 апреля: 9:30, 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (240 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 10:30, рефлексы значительно усилены, кролик крайне чувствителен.

8 апреля: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Печень была полнокровной и содержала несколько узлов кокцидиоза; желудок растянут довольно сухой пищевой массой; слизистая оболочка демонстрировала легкое катаральное воспаление; слизистая оболочка кишечника также слегка воспалена.

Rabbit 249. Belgian hare, female. Weight, 1,185 grams. Diet, oats.

11 ноября: Моча, 5 см³, из мочевого пузыря кислая по лакмусу, сахара нет, альбумина нет; 11:50, 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (236 мг на килограмм) введено подкожно; 15:45, рефлексы усилены, гиперестезия выражена, но тетануса нет, даже при прикосновении; 30 см³ мочи собрано в 16:00, восстановление реактива Фелинга значительное.

12 ноября: 10:00, собрано 8 см³ мочи, восстановление сильное, из мочевого пузыря получено лишь несколько кубических сантиметров, сахара не содержала, общее состояние кролика хорошее, симптомов интоксикации кофеином нет.

Rabbit 321. Yellow, female. Weight, 1,135 grams. Diet, oats.

16 марта 1910 г.: 11:50, 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (246 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:00, рефлексы усилены, очень чувствителен, начал бегать, когда его поставили на пол, никаких манипуляций, кроме необходимых для извлечения и возвращения в клетку, не проводилось, фекалии мягкие.

17 марта: 9:30, состояние хорошее, кролик поставлен на пол, походка нормальная, но ходить не хочет.

18 марта: 9:00, ходит, когда его ставят на пол, аппетит хороший, состояние кажется нормальным.

25 марта: 11:00, кролик все еще жив, состояние хорошее.

Rabbit 250. Belgian hare, female. Weight, 1,435 grams. Diet, oats at least two days before the experiment.

11 ноября: 11:00, моча, полученная из мочевого пузыря, кислая по лакмусу, альбумина нет, сахара нет; 11:10, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (252 мг на килограмм); 15:45, рефлексы и гиперестезия, тетануса нет; 16:00, 60 см³ мочи, выраженное восстановление реактива Фелинга.

12 ноября: 10:00, состояние кролика хорошее, симптомов интоксикации кофеином нет, собрано 80 см³ мочи, сахара много, из мочевого пузыря получено лишь несколько кубических сантиметров мочи, восстановления реактива Фелинга нет.

Rabbit 834. Belgian hare, female. Weight, 1,270 grams. Diet, carrots, March 31 to April 7.

7 апреля: 9:30, 15 см³ 2-процентного раствора кофеина (240 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 10:30, рефлексы значительно усилены, кролик крайне чувствителен.

8 апреля: 9:00, состояние хорошее, симптомов нет.

Rabbit 233. White, male. Weight, 1,675 grams. Diet, carrots, November 2 to 9.

9 ноября: 10:50, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (238 мг на килограмм) введено подкожно, симптомов не наблюдалось до 17:00, когда были замечены усиление рефлексов и гиперестезия, но тетануса не было.

10 ноября: 9:00, паралич задних конечностей; умер в 13:00.

Анализ результатов, полученных в экспериментах этой серии, и осмотр таблицы I на странице 25 показывают, что все четыре кролика, пережившие дозы от 236 до 252 мг кофеина на килограмм, были бельгийскими зайцами. Из четырех погибших только один был бельгийским зайцем. Остальные трое были белыми кроликами. Двух из них кормили овсом; двое других получали морковь в течение семи дней перед введением кофеина. Таким образом, эта диета, по-видимому, не является фактором токсичности кофеина. Более того, можно заметить, что кролик № 122, которого кормили овсом, погиб после получения 250 мг на килограмм, в то время как кролик № 250 получал ту же диету и пережил ту же дозу кофеина на килограмм.

Эксперименты 234 и 334 дают еще одну иллюстрацию того, что токсичность кофеина не зависит от диеты, поскольку обоих кроликов кормили морковью, но одна и та же доза кофеина вызвала лишь симптомы у одного, в то время как для другого оказалась фатальной. Очевидно, что разница в устойчивости к кофеину, проявленная в этих экспериментах, по всей вероятности, обусловлена породой: бельгийский заяц более устойчив к кофеину, чем кролики других разновидностей. Кролик № 335, по-видимому, является исключением, но посмертное исследование показало наличие кокцидиоза печени. Как будет показано позже, везде, где преобладало это состояние, даже меньшие дозы кофеина оказывались фатальными.

Серия D.

Целью этой серии экспериментов было получение дополнительных данных относительно устойчивости различных пород кроликов к кофеину и установление наименьшей дозы, которая является безусловно фатальной для серого кролика или бельгийского зайца. Диета во всех случаях состояла из овса, который давался ad libitum, за исключением кролика № 235, который получал морковь в течение одной недели перед инъекцией кофеина. Введенные дозы варьировались от 267 до 300 мг на килограмм и вводились взрослым кроликам разных пород.

Rabbit 253. Brown and black, male. Weight, 1,600 grams. Diet, oats, November 9 to 12.

12 ноября: 11:30, моча из мочевого пузыря кислая, альбумина нет, сахара нет; 11:35, 22 см³ 2-процентного раствора кофеина (275 мг на килограмм) введено подкожно; 11:45, кролик спрыгнул со стола, начались судороги, запрокидывание головы и опистотонус, общий тремор, передние конечности вытянуты, задние конечности почти нормальные, частые подергивания; умер в 12:15.

Rabbit 252. Black, female. Weight, 1,335 grams. Diet, oats, November 9 to 12.

12 ноября: 11:30, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (270 мг на килограмм) введено подкожно. Моча, полученная из мочевого пузыря перед инъекцией, кислая, альбумина нет, сахара нет, цвет нормальный, тремор и сильное возбуждение замечены около 12:00; 16:30, при прикосновении проявил необычное беспокойство и возбуждение, за которыми последовали судороги с опистотонусом; периодические подергивания, состояние плохое. Умер в 16:35.

Rabbit 327. White, female. Weight, 820 grams. Diet, oats, March 8 to 16.

16 марта: 11:45, 12 см³ 2-процентного раствора кофеина (292 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:00, найден мертвым, но был еще теплым. Вскрытие: Геморрагический участок в месте инъекции в спинные мышцы; подкожная область брюшной полости демонстрировала обширный участок творожистого гнойного материала; печень и селезенка были полнокровны; мочевой пузырь наполнен; кишечник в норме.

Rabbit 340. White and brown male. Weight, 1,465 grams. Diet, oats.

March 30: 3.20 p. m., 20 cc of 2 per cent caffein (273 mg per kilo) injected subcutaneously in back.

31 марта: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 341. White and brown. Weight, 1,450 grams. Diet, oats.

30 марта: 15:20, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (270 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:40, найден в умирающем состоянии, были судороги; 16:45, мертв.

Rabbit 326. White, male. Weight, 1,645 grams. Diet, oats, March 8 to 16.

16 марта 1910 г.: 12:00, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (243 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:00, тремор выражен, гиперчувствительность, начал бегать, когда его поставили на пол; кролик не подвергался никаким манипуляциям, кроме необходимых для извлечения из клетки и возвращения в нее.

17 марта: 9:30, тремор все еще присутствует и выражен, в остальном общее состояние хорошее; других симптомов нет.

18 марта: 9:30, аппетита нет, тремор все еще присутствует, общее состояние плохое; умер около 14:00.

Rabbit 235. Belgian hare, male. Weight, 1,870 grams. Diet, carrots, November 2 to 9.

10 ноября: 11:05, 25 см³ 2-процентного раствора кофеина (267 мг на килограмм) введено подкожно; рефлексы усилены и тремор, но тетануса не наблюдалось; найден мертвым на следующее утро.

Rabbit 316. Belgian hare, female. Weight, 860 grams. Diet, oats, March 8 to 16.

16 марта 1910 г.: 11:40, 12 см³ 2-процентного раствора кофеина (267 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 14:15, рефлексы несколько усилены, но не значительно; ходил, когда его поставили на пол; походка неуклюжая и медленная; наблюдался тремор головы; 14:35, кролик лежит в клетке, задние конечности вытянуты и ригидны, передние конечности согнуты, голова запрокинута; все еще дышит; наблюдались периодические спазмы. Кролик умер в 15:00. Вскрытие: Поражений в месте инъекции в дорсальных спинных мышцах нет; печень и селезенка полнокровны; кишечник инъецирован; другие органы, по-видимому, в норме.

Rabbit 395. Belgian hare, male. Weight, 1,410 grams.

18 августа: 13:00, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (283 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:00, рефлексы значительно усилены; 17:00, рефлексы примерно такие же, но тетануса нет.

19 августа, 9:15: Рефлексы значительно усилены.

August 21, weight, 1,215 grams. Given 275 mg per kilo of caffein; no symptoms observed.

23 августа, найден мертвым. Вскрытие: Печень сильно полнокровна; желудок довольно хорошо растянут, слизистая оболочка в состоянии легкого воспаления; содержимое тонкой кишки жидкое по своей природе, но ее стенки выглядели нормальными; другие органы нормальны на вид.

Rabbit 396. Belgian hare, female. Weight, 1,475 grams. Diet, oats.

18 августа: 13:00, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (272 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:00, рефлексы значительно усилены; 17:00, рефлексы значительно усилены, но тетануса нет.

19 августа: 10:30, рефлексы все еще очень значительно усилены; кролик подпрыгивает при прикосновении.

21 августа: Вес 1245 граммов. Введено подкожно 275 мг кофеина на килограмм; рефлексы усилены, задние конечности стали жесткими через час.

22 августа: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Грудные органы нормальны на вид; желудок растянут, слизистая оболочка поражена катаральным воспалением; содержимое желудка было покрыто блестящей слизью; содержимое тонкой кишки жидкое и окрашено желчью; печень показала кокцидиозную инвазию; почки и селезенка нормальны на вид.

Rabbit 397. Belgian hare, male. Weight, 1,375 grams. Diet, oats.

August 19: 10.30 a. m., 20 cc 2 per cent caffein (290 mg per kilo) injected subcutaneously in the back.

22 августа: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Желудок растянут содержимым; слизистая оболочка демонстрировала катаральное воспаление с чрезмерными выделениями; большая часть кишечника показала состояние, аналогичное состоянию желудка, содержимое состояло в основном из блестящей слизи; печень увеличена; другие органы, по-видимому, в норме.

Rabbit 398, Belgian hare, female. Weight, 1,570 grams. Diet, oats.

19 августа: 10:30, 23 см³ 2-процентного раствора кофеина (293 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; 16:00, найден мертвым. Вскрытие: Грудные органы, по-видимому, нормальны; слизистая оболочка желудка демонстрировала катаральное воспаление в целом; толстая кишка несколько уплотнена, но стенки выглядели нормальными; другие органы в норме.

Rabbit 399, Belgian hare, male. Weight, 1,725 grams. Diet, oats.

19 августа: 10:30, 26 см³ 2-процентного раствора кофеина (300 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; найден мертвым в 16:30. Вскрытие: Легкие слегка полнокровны; печень полнокровна и хрупкая; желчный пузырь хорошо наполнен; желудок демонстрировал катаральный гастрит; инъекция брыжейки и кишечника; почка показала выраженное корковое полнокровие.

Результаты экспериментов этой серии также указывают на то, что бельгийский заяц более устойчив к кофеину, чем кролики других разновидностей. Так, из четырех серых кроликов (№ 235, 316, 395 и 396), которые получили от 267 до 283 мг кофеина на килограмм, двое погибли и двое выжили, один из которых, 396, показал наличие кокцидиоза печени. С другой стороны, можно заметить, что черно-белые кролики, которые получили от 270 до 275 мг кофеина на килограмм, все погибли от воздействия препарата; один в течение 1 часа 25 минут и другой в течение 50 часов после введения кофеина, в то время как № 340 умер ночью. Более того, следует отметить, что из последних трех кроликов этой серии, которые были бельгийскими зайцами и получили 290, 293 и 300 мг кофеина, двое погибли через шесть часов после инъекции, в то время как другой, № 397, прожил три дня. Минимальная летальная доза кофеина для бельгийских зайцев составляет, таким образом, около 290–300 мг на килограмм при подкожном введении, что примерно на 50 процентов больше, чем для кроликов других разновидностей.

Серия E.

В серии A было показано, что 0,15 кофеина на килограмм вызывало симптомы интоксикации. Однако, прежде чем сделать вывод, что это наименьшая доза, вызывающая симптомы отравления, был проведен ряд экспериментов с меньшими дозами. Было обнаружено, что в подавляющем большинстве случаев 0,1 кофеина на килограмм может вызывать диурез, но не нервные или мышечные симптомы. У некоторых кроликов, однако, даже такая доза оказывалась фатальной. Посмертные исследования в этих случаях показали наличие кокцидиоза печени, и следует напомнить, что подобные наблюдения делались ранее. Вполне возможно, поэтому, что кокцидиоз печени является важным фактором в снижении устойчивости к кофеину. Эксперимент 551 (стр. 25) показывает, что другие состояния могут также повышать токсичность кофеина.

Rabbit 325. White, female. Weight, 1,065 grams. Diet, oats.

17 марта: 11:00, 6 см³ 2-процентного (112 мг на килограмм) раствора кофеина введено подкожно в область спины. Около 5 см³ мочи выдавлено из мочевого пузыря перед введением кофеина.

17 марта: 13:00, задние лапы скрещены и вытянуты, передние лапы также вытянуты; кролик лежит, вытянувшись на животе.

17 марта: 17:40, кролик все еще жив, состояние несколько улучшилось.

18 марта: 9:00, найден мертвым, жестким и холодным. Вскрытие: Геморрагический участок в месте инокуляции; подкожная область обоих бедер представляла геморрагическую инфильтрацию тканей; печень содержала очаги кокцидиоза; другие органы, по-видимому, в норме.

Rabbit 330. Belgian hare, female. Weight, 935 grams; poorly nourished.

18 марта: 15:35, 5 см³ 2-процентного раствора кофеина (107 мг на килограмм) введено в подкожные ткани спины; 17:30, симптомов нет.

19 марта: 9:00, симптомов нет.

March 25: Weight, 825 grams.

Rabbit 329. Belgian hare, male. Weight, 775 grams; poorly nourished. Received March 18.

18 марта: 15:30, 4 см³ 2-процентного раствора кофеина (103 мг на килограмм) введено в подкожные ткани спины; 17:30, симптомов нет.

19 марта: 9:00, симптомов нет.

March 25: Rabbit alive in good condition; weight, 825 grams.

Rabbit 320. Black, male. Weight, 1,040 grams. Diet, oats.

17 марта: 11:00, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина (115 мг на килограмм) введено подкожно в область спины; перед введением кофеина из мочевого пузыря получено лишь несколько капель мочи; 13:00, кролик очень беспокоен; убежал, когда его поставили на пол; пищал, когда его коснулись кусочком бумаги; тремора не наблюдалось, но кролик стал истощенным и не мог ходить; лапы вытянуты; после бега в течение примерно минуты одышка была очень выраженной, но кролик вскоре поднялся на лапы; 17:40, кролик стоит на лапах.

18 марта: 9:00, найден мертвым, но все еще теплым. Вскрытие: Легкие усеяны мелкими серовато-белыми узлами, спайки с реберной плеврой; вероятно, очаги кокцидиоза; печень усеяна узлами кокцидиоза. Кровоизлияния в месте инокуляции.

Кролик 551. Серый, самка. Вес 26 января 1650 граммов. Диета: овес; с 26 по 31 января ежедневно получал 20 см³ 25-процентного спирта.

31 января: Вес 1450 граммов; 10:20, температура 101,6°; 10:45, температура 101,6°; получил 7 см³ 2-процентного раствора кофеина подкожно в спину; 11:15, кратковременные судороги; поднялся на задние лапы, передние лапы широко расставлены; 16:10, выглядел нормально, не гиперчувствителен; 16:30, состояние казалось хорошим.

1 февраля: 9:00, найден мертвым, был жив в 17:30 предыдущего дня. Вскрытие: Обнаруженные поражения затрагивали в основном грудную полость; легкие были гепатизированы, а фибропластический экссудат вызвал их сращение с реберной плеврой; печень полнокровна и выглядела жирной; выраженных поражений, затрагивающих пищеварительный тракт, нет, легкий катар желудка был единственной заметной особенностью; почки и селезенка в норме.

Таблица 1. — Подкожные инъекции кофеина — кролики.

SERIES A.
No. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in | Duration of life. | Diet. | Remarks.
| Grams. | Mg. |  |  |  |
332 | 1,070 | 158 | 1 hour 45 minutes | Survived | Oats | Gray.
331 | 1,170 | 153 | do. | do. | do. | Do.
328 | 1,200 | 150 | do. | do. | do. | Do.
322 | 1,065 | 150 | 1 hour | do. | do. | White.
217 | 1,355 | 147 |  | do. | do. | Do.
219 | 1,820 | 153 |  | do. | do. | Maltese.
194 | 1,490 | 174 |  | do. | do. | White.
191 | 1,915 | 167 |  | do. | do. | Light brown.
SERIES B, GROUP I.
95 | 1,478 | 210 | 2 hours 50 minutes | 3 hours 10 minutes | Oats | White.
96 | 1,585 | 200 | 1 hour | About 18 hours | do. | Gray white.
112 | 875 | 205 | 30 minutes | do. | do. | Black.
119 | 1,060 | 188 |  | do. | do. | Yellow white.
195 | 1,300 | 200 |  | 3 hours 10 minutes | Carrots | White.
208 | 1,068 | 188 | 2 hours | About 24 hours | do. | Gray.
SERIES B, GROUP II.
247 | 1,295 | 200 | 2.5 hours | Survived | Oats | Gray.
248 | 1,305 | 200 | 3 hours | do. | do. | Do.
337 | 1,040 | 211 | 1.5 hours | do. | Carrots | Do.
336 | 1,045 | 211 | do. | do. | do. | Do.
SERIES C.
122 | 2,060 | 250 | 2 hours 55 minutes | 1.5 days | Oats | White.
234 | 1,650 | 242 |  | About 24 hours | Carrots | Do.
335 | 1,170 | 240 | 1 hour | do. | do. | Gray coccidiosis.
249 | 1,185 | 236 | 4 hours | Survived | Oats | Gray.
321 | 1,135 | 246 | 2 hours 10 minutes | do. | do. | Yellow.
250 | 1,435 | 252 | 4 hours 35 minutes | do. | do. | Gray.
334 | 1,270 | 240 | 1 hour | do. | Carrots | Do.
233 | 1,675 | 238 | 6 hours 10 minutes | 26 hours | do. | White.
SERIES D.
253 | 1,600 | 275 | 10 minutes | 35 minutes | Oats | Brown and black.
252 | 1,335 | 270 | 30 minutes | 4 hours 55 minutes | do. | Black.
327 | 820 | 292 |  | 2 hours 15 minutes | do. | White.
340 | 1,465 | 273 |  | About 18 hours | do. | White and brown.
341 | 1,450 | 270 |  | 1 hour 25 minutes | do. | Do.
326 | 1,645 | 243 | 2 hours | 50 hours | do. | White.
235 | 1,875 | 267 |  | 20 hours | Carrots | Gray.
316 | 860 | 267 | 2 hours 45 minutes | 3 hours 20 minutes | Oats | Do.
395 | 1,410 | 283 | 3 hours | Survived |  | Do.
395 | 1,215 | 275 | do. | About 2 days | Oats | Do.
396 | 1,475 | 272 | do. | Survived | do. | Do.
396 | 1,245 | 275 | 1 hour | About 18 hours | do. | Do.
397 | 1,375 | 290 |  | 3 days | do. | Do.
398 | 1,570 | 293 |  | 5.5 hours | do. | Do.
399 | 1,725 | 300 |  | 6 hours | do. | Do.
SERIES E.
325 | 1,065 | 112 | 2 hours | Less than 22 hours | Oats | White female.
330 | 935 | 107 | None | Survived |  | Gray.
329 | 775 | 103 | do. | do. |  | Gray male.
320 | 1,040 | 115 | 2 hours | 46 hours | Oats | Black male.
551 | 1,450 | 100 | 30 minutes | Less than 24 hours | do. | Gray female.

ВВЕДЕНИЕ ЧЕРЕЗ РОТ.

Эти эксперименты проводились на двух разновидностях кроликов, белых и серых. Диета состояла преимущественно из овса, но в нескольких случаях морковь составляла исключительную диету. Пища и вода давались ad libitum. 2-процентный раствор кофеина вводился через желудочный зонд. Поскольку принято считать, что устойчивость к большинству лекарств выше при приеме через рот, чем при введении любым другим путем, в серии предварительных экспериментов вводились дозы от 175 до 200 мг на килограмм; все они были выполнены на серых кроликах весом от 865 до 1135 граммов, которых в течение нескольких дней перед экспериментом кормили морковью. Трое кроликов выжили, двое без проявления каких-либо симптомов; в другом случае через пять часов после получения кофеина наблюдался паралич задних конечностей, и на следующее утро он был найден мертвым. К сожалению, вскрытие не проводилось. Низкая устойчивость этого животного к кофеину, вероятно, была обусловлена каким-то аномальным состоянием, развившимся примерно во время эксперимента, поскольку двумя неделями ранее этот кролик получил 325 мг кофеина на килограмм, и в результате этого воздействия наблюдалось лишь усиление рефлексов. Следовательно, 200 мг кофеина на килограмм нельзя считать токсичной дозой при введении через рот. Поэтому в следующих экспериментах вводились более высокие дозы.

Серия A.

Rabbit 248. Belgian hare. Weight, 1,170 grams. Diet, oats.

17 ноября: 13:20, 19,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (330 мг на килограмм) введено через рот; 16:30, несколько гиперчувствителен.

19 ноября: Симптомов нет; в 9:00 собрана моча, восстановления реактива Фелинга нет; кролик выжил.

Rabbit 241. White male. Weight, 1,380 grams. Diet, oats.

17 ноября: 13:15, 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (290 мг на килограмм) введено через рот; 16:30, некоторая гиперчувствительность, но других симптомов нет.

18 ноября: 9:00, собрана моча, восстановления реактива Фелинга нет; симптомов нет; кролик выжил.

Rabbit 249. Belgian hare. Weight, 890 grams. Diet, oats.

17 ноября: 13:30, введено 14,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (325 мг на килограмм); 16:30, гиперчувствительность; других симптомов нет.

18 ноября: 10:00, симптомов нет; собрана моча, восстановления нет; кролик выжил.

Серия B.

Целью этих экспериментов было определение минимальной летальной дозы кофеина для двух разновидностей кроликов, белых и серых. Все выбранные животные были примерно одного веса.

Rabbit 239. Belgian hare, male. Weight, 935 grams. Diet, oats.

19 ноября: 16:00, 17 см³ 2-процентного раствора кофеина (363 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 10 см³ 0,9-процентного солевого раствора.

20 ноября: Моча исследована, сахара не обнаружено, никаких симптомов после инъекции не замечено.

Rabbit 254. Belgian hare, female. Weight, 975 grams. Diet, oats.

19 ноября: 16:05, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (369 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 10 см³ 0,9-процентного солевого раствора.

20 ноября: 9:00, кролик найден мертвым.

Rabbit 267. White. Weight, 1,050 grams. Diet, oats.

23 ноября: 12:10, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (342 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 18 см³ солевого раствора; 13:00, усиление рефлексов, тремор выражен, но тетануса нет; 13:05, кролик растянулся на животе, задние конечности в вытянутом положении и парализованы, вскоре начались клонические судороги, которые повторялись примерно каждую минуту; 13:14, тетанус и смерть. Вскрытие: Печень показала жировую дегенерацию; легкое воспаление желудка и кишечника; другие органы в норме.

Rabbit 268. White. Weight 1,100 grams. Diet, oats.

23 ноября: 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (363 мг на килограмм) введено через рот, с последующим введением 20 см³ солевого раствора; 13:15, несколько гиперчувствителен; 16:30, тремор довольно выражен, моча не отходила, из мочевого пузыря получено около 2 см³ мочи кровавого вида, которая содержала альбумин и значительное количество гликогена; кролик умер.

Rabbit 419, Belgian hare, male. Weight, 1,600 grams. Diet, oats.

26 сентября: 10:00, 28 см³ 2-процентного раствора кофеина (350 мг на килограмм) введено через рот; рефлексы усилены в 16:00; 18:00, рефлексы все еще усилены, других симптомов нет.

27 сентября: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Легкие, печень и почки полнокровны; другие органы в норме.

Rabbit 420. Belgian hare, male. Weight, 1,250 grams. Diet, oats.

26 сентября: 10:00, 22 см³ 2-процентного раствора кофеина (352 мг на килограмм) введено через рот; 11:35, судороги; 12:00, найден мертвым. Вскрытие: Печень показала очень обширный кокцидиоз; других поражений нет.

Rabbit 421. Belgian hare, male. Weight, 1,485 grams. Diet, oats.

26 сентября: 10:00, 26 см³ 2-процентного раствора кофеина (351 мг на килограмм) введено через рот; 16:00, рефлексы усилены; 18:00, рефлексы как прежде, тетануса не наблюдалось.

27 сентября: 9:00, кролик найден мертвым. Вскрытие: Полнокровие легких и почек; печень полнокровна и слегка жирная.

Rabbit 424. White, male. Weight, 1,295 grams. Diet, oats.

26 сентября: 14:00, 19 см³ 2-процентного раствора кофеина (293 мг на килограмм) введено через рот; 16:00, рефлексы усилены, других симптомов нет; 18:00, изменений с 16:00 нет.

27 сентября: 12:00, судороги и смерть. Вскрытие: Полнокровие легких; других поражений нет.

Rabbit 423. White, male. Weight, 1,205 grams. Diet, oats.

26 сентября: 14:00, 18 см³ 2-процентного раствора кофеина введено через рот; 16:00, рефлексы усилены, тетануса нет; 18:00, состояние без изменений с 16:00.

27 сентября: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Легкие, печень и почки полнокровны; другие органы в норме.

Rabbit 422. White, male. Weight, 1,440 grams. Diet, oats.

September 26: 2 p. m., 21 cc 2 per cent caffein (291 mg per kilo) given by mouth; reflexes increased at 4 p. m.

27 сентября: 15:00, жив, симптомов нет; 16:00, судороги с последующим восстановлением, вскоре последовал сильный приступ тетануса, который длился около минуты и сменился параличом; кролик умер в 16:30. Вскрытие: Печень слегка полнокровна; небольшая часть кишечника показала полнокровие и отек; другие органы в норме.

Изучение этих экспериментов показывает также значительную вариативность токсичности кофеина при введении через рот. В некоторых случаях доза 300 мг на килограмм и даже меньше вызывала смерть, как у кроликов 423 и 424. У других кроликов, однако, примерно такие же дозы кофеина вызывали только усиление рефлексов. Те же симптомы были вызваны у № 248 и 249 после введения 325–330 мг кофеина на килограмм, в то время как другой кролик (№ 239) пережил дозу 363 мг на килограмм. Однако то, что это исключение, видно из результатов следующих экспериментов на кроликах № 419, 420 и 421, все из которых погибли после получения 350 мг кофеина на килограмм, и кроликах 267 и 268, для которых дозы 363 и 342 мг на килограмм соответственно оказались фатальными. Далее следует заметить, что серые кролики более устойчивы к кофеину, чем белые животные, так как 350 мг на килограмм были наименьшей летальной дозой для кроликов 419, 420 и 421, все из которых были серыми кроликами, в то время как доза 290 мг на килограмм была фатальной для некоторых белых кроликов. Опять же, будет замечено, что из двух серых кроликов, № 254 и 239, которые получили наибольшие дозы в этих экспериментах, а именно 369 и 363 мг соответственно, один выжил. Наибольшие дозы, данные белым кроликам, составляли 363 и 342 мг кофеина на килограмм. Оба погибли от воздействия препарата. Можно сделать вывод, что минимальная токсичная доза для серого кролика составляет около 325 мг кофеина на килограмм, а минимальная летальная доза — не менее 350 мг на килограмм. В этой связи следует отметить, что посмертное исследование показало обширный кокцидиоз у кролика 420 и жировую печень у № 421, в то время как макроскопическое исследование органов № 424 и 423 не выявило наличия таких аномалий. Поскольку, как наблюдалось в разделе о подкожной инъекции и в других местах этого исследования, патологические изменения склонны снижать устойчивость к кофеину, вполне возможно, что 350 мг на килограмм не является минимальной летальной дозой для нормального кролика. Действительно, эксперимент на кролике 239 подтверждает эту точку зрения, тем самым предоставляя дополнительные доказательства различия в устойчивости к кофеину у двух разновидностей кроликов.

Таблица 2. — Введение кофеина через рот.

SERIES A.
Rabbit No. | Weight. | Caffein per kilo | Symptoms. | Duration of life. | Diet. | Remarks.
| Grams. | Mg. |  |  |  |
248 | 1,170 | 330 | 3 hours | Survived | Oats | Gray.
241 | 1,380 | 290 | 2 hours | do. | do. | White male.
249 | 890 | 325 | 3 hours | do. | do. | Gray male.
SERIES B.
239 | 935 | 363 |  | Survived | Oats | Gray male.
254 | 975 | 369 |  | About 2 days | do. | Gray female.
267 | 1,050 | 342 | 50 minutes | 1 hour | do. | White.
268 | 1,100 | 363 |  | About 3 hours | do. | Do.
419 | 1,600 | 350 | 6 hours | Less than | do. | Gray male.
420 | 1,250 | 352 | 1 hour | 2 hours | do. | Do.
421 | 1,485 | 351 | 6 hours | Less than | do. | Do.
424 | 1,295 | 293 | 2 hours | 22 hours | do. | White male.
423 | 1,205 | 300 | do. | Less than | do. | Do.
422 | 1,440 | 291 | do. | 2½ hours | do. | Do.

ИНЪЕКЦИЯ В БРЮШНУЮ ПОЛОСТЬ.

В ряде экспериментов кофеин вводился в брюшную полость. Для этой цели использовались кролики разных пород, получавшие диету из овса или моркови; пища и вода давались ad libitum. Были определены минимальные дозы, необходимые для вызова симптомов или смерти у этих животных; тесты с кофеином также проводились на молодых кроликах для изучения влияния возраста на устойчивость к этому веществу. Результаты показаны в следующих экспериментах:

Серия A.

В этой серии вводились большие дозы, приближающиеся к 0,3 грамма на килограмм.

Rabbit 71. Gray female. Weight, 1,659 grams.

20 января: 14:20, 25 см³ водного раствора 2-процентного кофеина (300 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 15:45, когда открыли дверцы клетки, у кролика был кратковременный спазм.

21 января: Кролик найден мертвым.

Rabbit 72. Gray and white. Weight, 1,402 grams.

21 января: 11:17, 20,2 см³ (водного раствора) 2-процентного кофеина (300 мг на килограмм) введено в брюшную полость из бюретки; 11:25, паралич; 11:30, у кролика начались судороги, когда его подняли с пола, за которыми позже последовали несколько спазмов; 11:35, типичный тетанус; 12:30, найден мертвым.

Rabbit 61. Black female. Weight, 2,143 grams.

19 января: 40 см³ 2-процентного раствора кофеина, водный раствор (300 мг на килограмм), введено в брюшную полость из бюретки; тетанус, когда было введено около 30 см³; при извлечении из держателя — повторяющиеся и сильные судороги, закончившиеся смертью.

Серия B.

Целью этих экспериментов было определение минимальной летальной дозы; кроликам этой серии вводилось от 0,2 до 0,15 грамма кофеина на килограмм.

Rabbit 69. White female. Weight, 1,714 grams.

20 января: 10:15, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина, водный раствор, введено в брюшную полость. Симптомов нет, под наблюдением в течение 45 минут, кролик дефецировал довольно обильно; фекалии были мягкими; 11:00, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина, водный раствор, введено в брюшную полость, симптомов нет, под наблюдением в течение 40 минут; 11:40, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина введено в брюшную полость; 11:45, кролик беспокоен, рефлексы усилены.

Rabbit 70. Gray and white female. Weight, 1,487 grams.

20 января: 13:30, 15 см³ 2-процентного водного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 14:20, симптомов нет.

30 января: Около 14:00 кролик умер.

1 февраля: Вскрытие: Цирроз печени; энтерит тонкой кишки; желудок и почки в норме.

Rabbit 93. Maltese, male. Weight, 1,197 grams.

2 марта: 11:30, 12 см³ 2-процентного раствора кофеина (200 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 11:35, во время освобождения из держателя произошел тетанус, позже повторяющиеся приступы, клонические судороги с тонической ригидностью задних конечностей во время приступов, а также в интервалах, передние конечности были расслаблены в интервалах между приступами, наблюдались опистотонус шейного отдела, но кифоз в поясничном отделе, слюнотечения или расширения зрачков не было; 14:00, кролик умер.

Rabbit 92. Yellow female. Weight, 1,388 grams.

25 февраля, 16:15, 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 16:20, беспокойство и усиление рефлексов, кролик найден растянувшимся в клетке, но снова поднялся на лапы; 16:45, общий тремор при прикосновении.

26 февраля: 9:00, кролик найден мертвым. Вскрытие: Кровоизлияние в брюшные мышцы в месте инъекции; кровоизлияние также в стенках желудка напротив аналогичного места в брюшной стенке.

Rabbit 309. Belgian hare, female. Weight, 1,500 grams. Diet, oats.

2 марта: 14:05, 2-процентный раствор кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 14:25, найден мертвым, в мочевом пузыре мочи не обнаружено.

Rabbit 307. Belgian hare, female. Weight, 1,320 grams. Diet, oats.

2 марта: 12:00, моча получена из мочевого пузыря, прозрачная янтарного цвета, альбумина нет, восстановления нет; 12:06, 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,151 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 13:30, кролик поставлен на пол, бегает, но передние и задние конечности вскоре вытянулись, в тоническом состоянии; 14:25, рефлексы усилены, паралич конечностей, одышка; 16:50, собрано около 100 см³ мочи, альбумина нет, восстановление реактива Фелинга умеренное.

3 марта: 9:30, задние конечности вытянуты и ригидны, передние конечности парализованы, дыхание менее частое и глубже нормального. Кролик умер в 11:50; моча, собранная с 16:50 предыдущего дня, дала очень сильное восстановление реактива Фелинга. Вскрытие: Животное в хорошем состоянии; в левой подмышечной области наблюдалось кровоизлияние в подкожную и мышечную ткань этой области. Вентральная часть толстой кишки, соприкасающаяся с вентральной брюшной стенкой, показала геморрагический участок длиной около полудюйма, такой, какой мог быть вызван проколом или ушибом кишки через брюшную стенку. Небольшая часть тонкой кишки, прилегающая к толстой, была поражена аналогичным образом. Все внутренние органы были, по-видимому, нормальными.

Rabbit 308. Belgian hare, female. Weight, 1,350 grams. Diet, oats.

2 марта: 11:45, моча получена из мочевого пузыря, альбумина нет, восстановления нет; 11:50, 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,15 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 13:30, не очень активен, других аномальных симптомов нет; 15:30, кролик выглядел подавленным, делал очень мало попыток двигаться, оставался в одном положении большую часть времени, когда его ставили на пол; 16:30, собрано 180 см³ мочи, альбумина нет, восстановление реактива Фелинга умеренное.

3 марта: 9:30, кролик выглядит нормально, способен ходить, но легко утомляется, когда его заставляют ходить или когда кладут на бок, за чем следует паралич передних конечностей, задние конечности, по-видимому, нормальны, около 90 см³ мочи, собранной в полдень, были свободны от альбумина, не восстанавливали реактив Фелинга.

4 марта: 11:00, лежит на боку в клетке, передние конечности вялые, задние конечности вытянуты и ригидны, находится в умирающем состоянии.

5 марта: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: Печень полнокровна; селезенка полнокровна, но не увеличена; почки, некоторое полнокровие в корковом слое; желудок наполнен, слизистая оболочка утолщена и легко снимается; петехиальные кровоизлияния на серозной оболочке толстой кишки.

Серия C.

Эксперименты этой серии были проведены для определения минимальной токсичной дозы.

Rabbit 295. Belgian hare, female. Weight, 1,205 grams. Diet, carrots.

1 марта: 10:40, 6 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; около 2 см³ мочи получено перед введением кофеина; 14:00, собрано 100 см³ мочи кровавого вида, присутствует умеренное количество альбумина, восстановления нет; 15:40, симптомов нет.

4 марта: 14:00, кролик выглядит хорошо.

Rabbit 293. Belgian hare, female. Weight, 1,605 grams. Diet, carrots.

1 марта: Моча из мочевого пузыря прозрачная, щелочная; 11:55, 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 15:00, собрано 90 см³ мочи нормального цвета, альбумина нет, восстановления нет; 15:40, симптомов нет.

4 марта: 13:15, кролик выглядит нормально.

Rabbit 292. Belgian hare, male. Weight, 1,595 grams. Diet, carrots.

1 марта: 10:10, 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 10:40, кролик помочился, рефлексы усилены, но других симптомов нет; 10:50, мочи из мочевого пузыря не получено; 14:00, собрано 105 см³ прозрачной бледной мочи; альбумина нет, восстановления нет; 15:40, симптомов нет.

4 марта: 14:00, кролик выглядит хорошо, моча собрана, сахара не содержала.

Rabbit 298. Belgian hare, female. Weight, 1,205 grams. Diet, carrots.

1 марта: 16:06, 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,125 грамма на килограмм) введено в брюшную полость, моча получена из мочевого пузыря сразу после инъекции, альбумина нет, восстановления нет; 17:30, рефлексы усилены, кролик был способен бегать, но вскоре парализовался; 17:40, кролик снова способен бегать.

3 марта: 10:00, передние конечности парализованы, способен использовать задние конечности.

4 марта: 13:00, кролик выглядит нормально.

Rabbit 223. Belgian hare, male. Weight, 1,165 grams. Diet, carrots.

1 марта: 15:50, моча, полученная из мочевого пузыря, прозрачная, янтарного цвета, без белка и сахара; 15:52, в брюшную полость введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (125 мг на килограмм); 17:40, кролик почти не пытается бежать, когда его ставят на пол, выражена слабость конечностей.

4 марта: 13:15, кролик в норме.

Серия D.

Целью экспериментов этой серии было изучение влияния возраста на устойчивость к кофеину. Поэтому в следующих экспериментах использовались кролики среднего возраста.

Rabbit 310. Belgian hare, female. Weight, 880 grams. Diet, oats.

March 2: 3.25 p. m., 9 cc 2 per cent caffein (0.2 gram per kilo) injected into peritoneal cavity.

3 марта: 9:30, симптомов нет, кролик выглядит нормально.

4 марта: 11:00, задние конечности отведены, при помещении на пол ходил, не пытался сменить позу, когда его положили на бок, оставался в этом положении некоторое время.

5 марта: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: печень показала участки дегенерации; почки — застой крови и петехиальные кровоизлияния на коре; тонкий и толстый кишечник — выраженное воспаление; мочевой пузырь растянут.

Rabbit 75. Gray and white, female. Weight, 842 grams.

25 января: 15:00, в брюшную полость введено 8,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 15:15, передние конечности слабые, рефлексы усилены.

27 января: кролик парализован, но способен перевернуться, если его положить на спину.

Rabbit 74. Gray and white, female. Weight, 692 grams.

25 января: 15:00, в брюшную полость введено 7 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 15:15, рефлексы усилены, передние конечности парализованы.

27 января: кролик оправился и может ходить по комнате.

Rabbit 312, maltese, female. Weight, 740 grams. Diet, oats.

3 марта: 11:47, моча, полученная из мочевого пузыря, нормального вида, белка нет, реакция с реактивом Фелинга отрицательная; 11:50, в брюшную полость введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 14:30, передние конечности парализованы, задние конечности ригидны и вытянуты; около 17:00 кролик умер.

Rabbit 311. Belgian hare, female. Weight, 650 grams. Diet, oats.

3 марта: 11:26, моча, полученная из мочевого пузыря, нормального вида, значительное содержание белка, реакция с реактивом Фелинга отрицательная; 11:27, в брюшную полость введено 6 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 14:30, кролик казался нормальным, симптомы не развились; собранная моча содержала большое количество сахара, реакция была очень сильной, но белка не обнаружено.

4 марта: 11:00, состояние хорошее, передвигается, когда его ставят на пол; походка нормальная.

Кролик 78. Желто-белый. Вес 659 граммов.

26 января: 13:30, в брюшную полость введено 8,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм), под наблюдением остаток дня, симптомов нет.

27 января: 16:00, симптомы не развились.

Кролик 317. Бельгийский заяц, самка. Вес 635 граммов. Диета: овес.

15 марта: 10:35, в брюшную полость введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,252 грамма на килограмм); 12:00, выраженное отведение задних ног, не мог ходить после небольшого усилия, кролик умер между 12:30 и 12:50. Вскрытие: правое легкое гепатизировано и имело спайки с реберной и медиастинальной плеврой; печень усеяна узелками кокцидиоза; селезенка полнокровна; желудок наполнен, слизистая оболочка в норме; кишечник инъецирован; серозная оболочка толстой кишки в вентральной области, вблизи места инъекции, геморрагична; почки в норме.

Кролик 323. Белый, самка. Вес 820 граммов. Диета: овес.

15 марта: 10:45, в брюшную полость введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм); 12:00, рефлексы усилены, задние ноги отведены, но может ходить, симптомы легкие; 13:40, тремор, слабость, отведение головы и ног гораздо более выражены, чем в 12:00.

16 марта: состояние хорошее.

17 марта: состояние хорошее, выздоровление, по-видимому, полное.

Поскольку эксперименты серии А, задуманные как предварительные испытания, показали, что 0,3 грамма кофеина на килограмм при введении в брюшную полость быстро всасывается и является смертельным, в последующих испытаниях препарата использовались гораздо меньшие дозы. Это показано в серии B, которую можно разделить на две группы. Группа I, состоящая из кроликов 69, 70, 92, 93 и 309, которые получили 0,2 грамма кофеина на килограмм, и Группа II, № 307 и 308, которым вводили 0,15 грамма кофеина на килограмм. Три кролика из Группы I (№ 92, 93, 309) умерли от воздействия кофеина; кролик 309 через двадцать минут после инъекции, а кролики № 92 и 93 — через двадцать часов и два с половиной часа соответственно после введения кофеина. У обоих этих кроликов симптомы появились в течение пяти минут после инъекций. Следует отметить, что кролики 69 и 70 выжили после введения такого же количества кофеина пропорционально массе тела, какое было дано другим членам этой группы. Усиленная перистальтика и распределение дозы могут объяснить большую устойчивость кролика № 69. Случай с кроликом № 70, очевидно, является примером исключительной устойчивости к кофеину, поскольку оба кролика из Группы II умерли от воздействия гораздо меньшей дозы, а именно 0,15 грамма кофеина на килограмм. Более того, макроскопическое исследование при вскрытии № 307 и 308 не выявило никаких поражений, которые могли бы способствовать снижению устойчивости к кофеину.

Таким образом, из результатов экспериментов серии C, в которых меньшие дозы (0,125 грамма кофеина на килограмм) вызывали лишь легкие симптомы, в то время как 0,1 грамма на килограмм редко вызывали какие-либо симптомы, следует, что доза 0,15 грамма на килограмм, по всей вероятности, является минимальной смертельной дозой для кролика при введении в брюшную полость. Можно отметить, что кроликов серии C кормили морковью, тогда как кролики № 307 и 308 получали овес. Их устойчивость к кофеину может быть разной, но, как было указано ранее в этом исследовании, диета, по-видимому, не влияет на токсичность разовой дозы кофеина. Дозы 150 мг и от 100 до 125 мг на килограмм при введении в брюшную полость можно считать, соответственно, минимальной смертельной и минимальной токсической дозами для серого кролика. Анализ экспериментов в серии D показывает гораздо большую устойчивость к кофеину, чем у других кроликов, получавших его внутрибрюшинно. Так, после введения 0,2 грамма на килограмм каждому из пяти кроликов, в двух случаях (№ 310, 311) никакого эффекта не наблюдалось, в то время как у двух других (№ 74, 75) развились симптомы, но они выжили. Только один кролик, № 312, умер от воздействия этой дозы; вскрытие показало наличие дегенерации печени и петехиальных кровоизлияний на коре почек у № 310, что, вероятно, и стало причиной смерти, а не кофеин.

Таким образом, два дециграмма кофеина нельзя считать смертельной дозой для кроликов. Это дополнительно подтверждается результатами, полученными в экспериментах с большими дозами. Кролик 78, получивший 257 мг на килограмм, не проявил никаких симптомов. Такое же количество пропорционально массе тела у № 323 вызвало лишь легкие симптомы, в то время как быструю смерть кролика № 317 после такой же дозы кофеина можно объяснить поражением, обнаруженным при вскрытии, что дает дополнительные доказательства того, что болезнь может снижать устойчивость к кофеину. Можно заметить, что все члены этой серии были молодыми кроликами, и, как будет показано позже, молодые животные других видов также более устойчивы к кофеину, чем взрослые особи. Аналогичные результаты были получены фон Анрепом, который наблюдал, что атропин менее токсичен для молодых животных, чем для взрослых.

Также проводились наблюдения за диуретическим эффектом кофеина при введении в брюшную полость. Результаты, представленные в следующей таблице, указывают на стимулирующее влияние на почечную секрецию независимо от того, состояла ли диета из овса или моркови. Моча некоторых кроликов содержала умеренное количество сахара после введения от 0,2 до 0,15 грамма кофеина на килограмм; белок наблюдался в одном случае, но ни в одном из других. У кролика № 311 белок был обнаружен до инъекции кофеина, но отсутствовал в моче, собранной через три часа после введения кофеина.

Влияние кофеина на почечную секрецию.

No. | Weight. | Caffein per kilo. | Urine. | Time. | Diet.
| Grams. | Gram. | cc. |  |
307 | 1,320 | 0.150 | 100 | 4.5 hours | Oats.
308 | 1,305 | .150 | 180 | do. | Do.
295 | 1,205 | .100 | 100 | 2 hours 20 minutes | Carrots.
293 | 1,605 | .100 | 90 | 3 hours | Do.
292 | 1,595 | .100 | 105 | 4 hours | Do.

Примечание. Количество мочи, выделенной за три часа контрольными кроликами на морковной диете, варьировалось от 35 до 50 см³, при этом средний вес животных был немного выше 1600 граммов. Секреция мочи на овсяной диете была значительно меньше за тот же период времени.

Таблица 3. Внутрибрюшинные инъекции.

SERIES A.
No. | Weight. | Caffein per kilo | Time of appearance of symptoms in | Duration of life. | Remarks.
| Grams. | Gram. |  |  |
71 | 1,659 | 0.3   | 85 minutes | 24 hours | Gray.
61 | 2,143 | .3   |  | At the end of injection | Black.
72 | 1,402 | .3   | 8 minutes | 1.25 hour | Gray and white.
SERIES B, GROUP I.
70 | 1,487 | 0.2 |  | 10 days | Gray and white.
93 | 1,492 | .2   | 5 minutes | 2.5 hours | Maltese; given second dose after 3 days, died 2.5 hours later.
69 | 1,492 | .2   | About 5 minutes | Survived | White.
92 | 1,388 | .2   | 5 minutes | 24 hours | Yellow.
309 | 1,500 | .2   |  | 20 minutes | Belgian; oats.
SERIES B, GROUP II.
308 | 1,350 | 0.15  | 3 hours and 40 minutes | About 2.5 days | Belgian; oats.
307 | 1,320 | .15  | 1 hour 24 minutes | 24 hours | Do.
SERIES C.
223 | 1,165 | 0.125 | 2 hours | Survived | Belgian; carrots.
293 | 1,605 | .1   |  | do. | Do.
295 | 1,205 | .1   |  | do. | Do.
292 | 1,595 | .1   |  | do. | Do.
298 | 1,205 | .125 | 1.5 hours | do. | Do.
SERIES D.
310 | 880 | 0.2   | 2 days¹ | About 2.5 days¹ | Belgian; oats.
311 | 650 | .2   |  | Survived | Do.
312 | 740 | .2   | 40 minutes | 4.5 hours | Maltese; oats.
78 | 659 | .257 | 15 minutes | Survived | Yellow and white; oats.
75 | 842 | .2   | do. | do. | Gray and white.
74 | 692 | .2   | do. | do.
317 | 635 | .252 | 1 hour 25 minutes | About 2 hours | Belgian; oats.
323 | 820 | .25  | 1 hour 15 minutes | Survived | White; oats.

1 Не связано с кофеином.

ВНУТРИМЫШЕЧНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Для этих экспериментов использовались хорошо откормленные кролики, получавшие исключительно овсяную диету. Инъекции производились в поясничные или ягодичные мышцы.

Серия A.

В этой серии кофеин вводился в ягодичные мышцы.

Rabbit 284. Brown and white, female. Weight, 1,100 grams.

14 декабря: 14:00, в ягодичные мышцы введено 11 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм), под наблюдением до 17:00, наблюдались частые судороги; в 17:00 в коматозном состоянии. Кролик был найден мертвым на следующее утро.

Rabbit 286, white and black, female. Weight, 1,315 grams.

15 декабря: 14:30, в ягодичные мышцы введено 13 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1977 грамма на килограмм), в течение следующих двух часов наблюдались тремор и усиление рефлексов, но других симптомов не было.

17 декабря: кролик жив.

Rabbit 285, yellow and white, female. Weight, 1,385 grams.

14 декабря: 10:15, в ягодичные мышцы введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм), общий тремор, но судорог не наблюдалось. Кролик выжил.

17 декабря: кролик все еще жив.

Rabbit 287. Belgian hare, female. Weight, 1,140 grams.

15 декабря: 14:15, в ягодичные мышцы введено 11 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:30, тонические сокращения задних конечностей. Паралич и смерть в 14:40.

Серия B.

В серии B кофеин вводился в поясничные мышцы.

Rabbit 307. Belgian hare, female. Weight, 1,175 grams.

16 февраля: 11:05, в поясничные мышцы введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,136 грамма на килограмм); под наблюдением до 16:00, симптомов нет; 16:00, разрешено ходить по полу; после прохождения небольшого расстояния — потеря координации и паралич задних конечностей; 17:20, найден мертвым.

Rabbit 306. Belgian hare, female. Weight, 1,860 grams.

16 февраля: 11:00, в поясничные мышцы введено 12,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 12:00, симптомов нет; 14:00, прошел около 10 футов, истощение и паралич; 15:00 найден мертвым.

Rabbit 181. Belgian hare. Weight, 1,230 grams. (Was experimented on some time previously.)

16 февраля: 10:55, в поясничные мышцы введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,130 грамма на килограмм); 12:00, симптомов нет; 14:00, симптомов нет; 15:00, помещен на пол, прошел около 10 футов и был истощен, задние конечности парализованы; 16:00, найден мертвым.

Серия C.

Осенью того же года были проведены дополнительные эксперименты с дозами от 100 до 200 миллиграммов кофеина на килограмм, которые вводились в поясничные мышцы. Результаты приведены в следующих сокращенных протоколах:

Rabbit 425. Belgian hare. Weight 1,520 grams.

27 сентября: 10:30, в поясничные мышцы введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:00, рефлексы усилены.

28 сентября: кролик в норме.

5 октября: вес 1620 граммов; 14:50, в поясничные мышцы введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:05, рефлексы усилены.

13 октября: вес 1520 граммов; 10:30, введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (131 мг на килограмм); 11:00, симптомов нет; 11:30, рефлексы значительно усилены.

14 октября: жив, симптомов нет.

Rabbit 426. Belgian hare, female. Weight, 1,425 grams.

27 сентября: 7 см³ 2-процентного раствора кофеина введено в поясничные мышцы в 10:30; 14:00, рефлексы усилены.

28 сентября: кролик в норме.

5 октября: вес 1425 граммов; 14:55, в поясничные мышцы введено 9 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:05, рефлексы усилены.

13 октября: вес 1405 граммов; 10:30, введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (142 мг на килограмм); 11:00, симптомов нет; 11:30, рефлексы усилены.

14 октября: кролик жив, симптомов нет.

Rabbit 427. Belgian hare, female. Weight, 1,780 grams.

27 сентября: в поясничные мышцы введено 9 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:00, рефлексы усилены.

28 сентября: кролик в норме.

5 октября: вес 1850 граммов; 15:00, в поясничные мышцы введено 11,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:10, рефлексы усилены.

13 октября: вес 1830 граммов; 10:40, в поясничные мышцы введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (153 мг на килограмм); 11:00, симптомов нет; 11:30, рефлексы усилены.

14 октября: кролик жив, симптомов нет.

Rabbit 453. Belgian hare, male. Weight, 1,160 grams.

12 октября: 15:45, в поясничные мышцы введено 11,5 см³ 2-процентного водного раствора кофеина; 16:15, рефлексы усилены; 16:30, парализован.

13 октября: 9:00, найден мертвым. Вскрытие: слизистая оболочка желудка геморрагична; печень потемнела; другие органы в норме.

Rabbit 455. Belgian hare, gray, female. Weight, 1,185 grams.

12 октября: 15:30, в поясничные мышцы введено 11,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 16:00, рефлексы усилены.

13 октября: кролик весил 1070 граммов, симптомов отравления кофеином нет, рефлексы нормальные; 10:30, в поясничные мышцы введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина; 11:30, спрыгнул со стола, случился приступ судорог, и он умер. Вскрытие: результаты те же, что и у № 453.

Rabbit 428. Belgian hare, gray, male. Weight, 1,650 grams.

5 октября: 16:00, в поясничные мышцы введено 14,8 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,18 грамма на килограмм).

6 октября: найден мертвым.

Rabbit 429. Belgian hare, male. Weight, 1,340 grams.

5 октября: 16:00, в поясничные мышцы введено 13,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм).

8 октября: кролик найден мертвым.

Серия D.

В этой серии были проведены дальнейшие эксперименты с инъекциями как в поясничные, так и в ягодичные мышцы.

Rabbit 577. Gray male. Weight, 1,380 grams.

14 февраля: 15:00, в ягодичные мышцы правой стороны введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:10, беспокоен, спрыгнул со стола и ходил, рефлексы усилены; 15:45, выделил 30 см³ прозрачной мочи соломенного цвета; 16:45, разрешено ходить, пробежал через комнату около 20 футов, выглядел уставшим, растянулся на полу, затем поднялся и ходил, не проявляя нарушений походки.

15 февраля: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 578. Gray, female. Weight, 1,670 grams.

14 февраля: 15:05, в ягодичные мышцы правой стороны введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина; 15:15, рефлексы усилены, но беспокойства нет; 17:00, разрешено ходить, симптомов не наблюдалось.

15 февраля: найден мертвым.

Rabbit 579. White and gray, male. Weight, 1,490 grams.

14 февраля: 15:15, в ягодичные мышцы правой стороны введено 15 см³ 2-процентного раствора кофеина; помещен в клетку; 15:30, рефлексы усилены; 17:00, вынут из клетки и разрешено ходить по комнате, особых симптомов не замечено.

23 февраля: все еще жив.

Rabbit 580. Gray male. Weight, 1,510 grams.

February 14: 3.35 p. m., 15 cc 2 per cent caffein solution injected into lumbar muscles.

23 февраля: все еще жив, в хорошем состоянии.

Rabbit 581. Gray female. Weight, 1,680 grams.

14 февраля: 15:45, в поясничные мышцы правой стороны введено 17 см³ 2-процентного раствора кофеина; 16:00, рефлексы усилены; 16:15, спрыгнул со стола и начались сильные судороги, стал очень беспокойным, ходил по лаборатории; 16:25, периодически случались судороги; 16:30, конечности вытянуты и довольно ригидны; 16:35, судороги и смерть.

Rabbit 582. Gray male. Weight, 1,870 grams.

14 февраля: 16:15, в поясничные мышцы правой стороны введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина; 17:00, рефлексы усилены; ходил по комнате, затем отдыхал; 17:15, при прикосновении случился короткий спазм.

23 февраля: жив; хорошее состояние.

Данные, представленные в этих экспериментах, показывают, что токсичность кофеина при введении в мышцы поясничной области такая же, как и при введении в ягодичные мышцы. Кролики серии A получили примерно 0,2 грамма кофеина на килограмм, и двое умерли в результате этой процедуры. Остальные двое выжили, но наблюдались симптомы интоксикации кофеином.

В серии B меньшие дозы оказались смертельными, из чего можно было бы сделать вывод, что кофеин более токсичен при введении в поясничные мышцы. Однако дальнейшие наблюдения не подтвердили результаты, полученные в этой серии. Так, в серии C 130–150 мг кофеина на килограмм при введении в поясничные мышцы вызывали лишь легкие симптомы. Эксперименты с большими дозами показали, что 0,180 грамма кофеина на килограмм могут вызвать смерть. С другой стороны, будет замечено, что кролик № 455 выжил после дозы 0,2 грамма на килограмм. Поэтому были проведены новые эксперименты, в которых в поясничные мышцы вводились такие же количества кофеина пропорционально весу животных, как и в ягодичные мышцы. Как показано в экспериментах серии D, один кролик (№ 581) умер вскоре после введения кофеина в поясничные мышцы; двое выздоровели. Двое из трех, получивших инъекции в ягодичные мышцы, были найдены мертвыми на следующий день; один выздоровел. Патологоанатомическое исследование не выявило наличия каких-либо отклонений. Таким образом, скорость всасывания кофеина из ягодичных и поясничных мышц, по-видимому, одинакова или различается незначительно. В этой связи интересны наблюдения Ауэра и Мельцера. Согласно их исследованиям, адреналин быстрее всасывается из поясничных мышц, чем из ягодичных. Это, по всей вероятности, связано с большей чувствительностью теста, который они использовали (поскольку они судили о скорости всасывания по влиянию адреналина на кровяное давление), а также с гораздо большей активностью этого вещества.

Таблица 4. Внутримышечные инъекции.

SERIES A.
No. | Weight. | Caffein per kilo | Symptoms after— | Duration of life. | Site of injection. | Remarks.
| Grams. | Gram. |  |  |  |
284 | 1,100 | 0.200  | 3 hours | Less than 20 hours | Gluteal | White and brown female.
286 | 1,315 | .1977 | 2 hours | Survived | do. | White and black female.
285 | 1,385 | .200  | Present | do. | do. | Yellow and white female.
287 | 1,140 | .210  | 15 minutes | 25 minutes | do. | Gray female.
SERIES B.
307 | 1,175 | 0.136 | 5 hours | 6 hours, 20 minutes | Lumbar | Gray female.
306 | 1,860 | .134 | 3 hours | 4 hours | do. | Do.
181 | 1,230 | .130 | 4 hours | 5 hours | do. | Gray.
SERIES C.
425 | 1,520 | 0.131 | 1 hour | Survived | Lumbar | Gray.
426 | 1,405 | .142 | 30 minutes | do. | do. | Gray female.
427 | 1,830 | .153 | 50 minutes | do. | do. | Do.
453 | 1,160 | .200 | 30 minutes | Less than 20 hours | do. | Gray male.
455 | 1,185 | .200 | do. | Survived | do. | Gray female.
428 | 1,650 | .180 |  | Less than 20 hours | do. | Gray male.
429 | 1,340 | .200 |  | do. | do. | Do.
SERIES D.
577 | 1,380 | 0.200 | 10 minutes | Less than 18 hours | Gluteal | Gray male.
578 | 1,670 | .210 | do. | do. | do. | Do.
579 | 1,490 | .200 | 15 minutes | Survived | do. | White and gray male.
580 | 1,510 | .200 |  | do. | Lumbar | Gray male.
581 | 1,680 | .200 | 15 minutes | 50 minutes | do. | Do.
582 | 1,870 | .192 | 45 minutes | Survived | do. | Do.

Изучение таблицы 4 показывает, что 14 кроликов получили от 180 до 210 мг кофеина на килограмм. Появление симптомов у этих кроликов варьировалось весьма значительно. У некоторых усиление рефлексов можно было заметить через 10–15 минут после инъекции кофеина; у других оно задерживалось на 2–3 часа. Можно добавить, что начало симптомов во многих случаях происходило очень скоро после введения препарата — в среднем примерно через 10–30 минут после инъекции. После введения меньших доз путем инъекции в поясничные мышцы появление симптомов в некоторых случаях задерживалось на несколько часов. Продолжительность жизни этих 14 кроликов варьировалась значительно. Восемь из них умерли в течение 1–20 часов; шестеро выжили. Около 0,2 грамма кофеина на килограмм можно считать минимальной смертельной дозой, в то время как минимальная токсическая доза находится где-то между 130 и 150 мг на килограмм.

ВНУТРИВЕННАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Эти эксперименты проводились на хорошо откормленных взрослых серых кроликах. Диета в течение нескольких дней, предшествующих экспериментам, состояла из овса или моркови, которые давались ad libitum. Инъекции производились в ушные вены из бюретки или с помощью шприца, температура раствора кофеина составляла около 40° C. Также было обращено внимание на влияние скорости инъекции и концентрации на токсичность. Минимальные токсические, а также летальные дозы были определены, как показано в следующих экспериментах.

Серия A.

В этих экспериментах скорость инъекции составляла около 1 см³ 2-процентного раствора кофеина в минуту.

Rabbit 194. White, female. Weight, 1,310 grams.

19 октября: в ушную вену введено 7,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (115 мг на килограмм). Кролик проявил скованность; вскоре после этого появился паралич конечностей. Кролик выжил.

Rabbit 556. Gray, female. Weight, 1,635 grams.

31 января: 14:00, в ушную вену введено 11 см³ 2-процентного раствора кофеина (134 мг на килограмм) примерно за 11 минут; 14:10, судороги, кролик оставался лежать на боку; в течение оставшегося часа у него периодически случались судороги; 15:20, судороги и смерть. Кролик не мочился после инъекции кофеина.

Rabbit 557. Gray, female. Weight, 1,580 grams.

31 января: с 14:30 до 14:37 введено 7 см³ 2-процентного раствора кофеина из бюретки со скоростью 1 см³ в минуту; 14:37, поток жидкости прекратился, вены были переполнены и свободно кровоточили, инъекция была продолжена с помощью шприца; введено 2 см³ 2-процентного кофеина за две минуты; инъекции прекращены, так как появились судороги; 14:50, кролик поднялся, но упал; 15:10, кролик принял нормальную позу, ходил по полу, не проявляя никаких признаков воздействия кофеина; 16:30, ходил, походка нормальная, состояние казалось хорошим.

1 февраля: 14:00, состояние хорошее, аппетит хороший, общее количество введенного кофеина — 9 см³ 2-процентного раствора, или 114 мг на килограмм.

Rabbit 558. Gray, female. Weight, 1,590 grams.

31 января: 15:00, введено 8 см³ 2-процентного кофеина за восемь минут; 15:10, сильные судороги; 15:20, кролик был растянут на животе, конечности вытянуты, мочился; 16:30, выглядел нормально; мог ходить.

1 февраля: 14:00, состояние хорошее, аппетит хороший.

Rabbit 292. Belgian hare, male. Weight, 1,770 grams.

18 февраля: с 16:26 до 16:39 в ушную вену введено 12,5 см³ теплого раствора кофеина (0,141 грамма на килограмм), после введения этого количества последовала судорога, вскоре после этого — тоническая ригидность конечностей; 16:52, состояние без изменений, кролик на полу, конечности вытянуты, лежит на животе.

Rabbit 294. Belgian hare, female. Weight, 1,350 grams. Carrot diet for about 10 days before the experiment.

19 февраля: 12:20, в ушную вену введено 5 см³ 2-процентного кофеина (74 мг на килограмм) за пять минут, отек уха, использовано другое ухо, введено 3,5 см³ за 10 минут, повторные судороги; 13:25, кролик все еще жив, частые приступы судорог; 14:30, найден мертвым. Общее количество, введенное за 15 минут, 8,5 см³, или 0,126 грамма на килограмм.

В предыдущих экспериментах будет замечено, что симптомы тяжелой интоксикации присутствовали у всех шести кроликов, но только двое из них (№ 294 и 556) умерли от воздействия кофеина. Из тех, кто выжил, трое получили дозы от 100 до 114 мг кофеина на килограмм, а другой (№ 292) получил 141 мг кофеина на килограмм. Смерть кроликов № 294 и 556 можно, следовательно, рассматривать как случай исключительно низкой устойчивости к кофеину.

Серия B.

В этих экспериментах использовались дозы от 160 до 200 мг кофеина на килограмм. Скорость инъекции составляла 1 см³ в минуту, за исключением эксперимента 254, в котором 10,8 см³ 2-процентного кофеина были введены за 17 минут 25 секунд.

Rabbit 562. Gray female. Weight, 1,650 grams. Diet, oats.

1 февраля: инъекция началась в 15:00, введено 10 см³ за 12 минут; с 15:01 до 15:09 введено 3 см³, судороги; с 15:09 до 15:14 введено 3 см³, за которыми последовали сильные судороги, выраженный опистотонус; 16:30, кролик умер; общее количество введенного раствора — 16 см³.

Rabbit 561. Gray female. Weight, 1,450 grams. Diet, oats.

1 февраля: инъекция началась в 11:40; 11:48, кролик боролся, введено 7 см³ 2-процентного кофеина; 11:50, судороги, всего введено 10 см³ 2-процентного кофеина; 11:55, инъекции остановлены; инъекции возобновлены в 11:58, сильные судороги, инъекции прекращены, общее количество полученного раствора — 14,5 см³ 2-процентного кофеина; 13:30, найден мертвым, не мочился, в мочевом пузыре обнаружено 25 см³ мочи.

Rabbit 560. Gray male. Weight, 1,620 grams. Diet, oats.

1 февраля: инъекция началась в 11:00; 11:10, введено 7 см³ 2-процентного кофеина, кролик боролся; в течение следующих трех минут был введен 1 см³, кролик боролся, но судорог не было, инъекция остановлена; возобновлена в 11:15 и продолжалась 10 минут, за это время введено 8 см³ 2-процентного кофеина; общее количество введенного кофеина — 16 см³; рефлексы заметно усилены; 12:00, тетанические судороги время от времени до 14:00, затем оставался растянутым на животе, конечности вытянуты.

2 февраля: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 559. Gray female. Weight, 1,875 grams. Diet, oats.

31 января: 16:00, судороги после инъекции 9 см³ 2-процентного кофеина за 14 минут; 16:08, судороги после инъекции 7 см³ кофеина за 8 минут; с 16:10 до 16:12 введено еще 2 см³, кролик лежит растянувшись на животе, конечности вытянуты; общее количество введенного кофеина — 18 см³ (190 мг на килограмм).

1 февраля: 14:00, состояние хорошее, ходил, аппетит хороший, выделил 155 см³ темной, красновато-коричневой мочи с 17:30 предыдущего дня.

Rabbit 279. Gray and white female. Weight, 1,320 grams.

24 февраля: 10:09, 6 см³ 2-процентного кофеина быстро введены в яремную вену; 10:15, непроизвольное подергивание мышц ног, но других симптомов нет; с 10:23 до 10:26 введено 3 см³ 2-процентного кофеина; с 10:27 до 10:28 введено 2 см³ 2-процентного кофеина, судороги; 10:29, судороги прекратились; 10:32, судороги; 11:00, кролик лежит на боку, передние конечности парализованы, задние конечности сокращены, клонических судорог нет, дышал глубже и медленнее, чем обычно; 11:10, кролик умер, судорог непосредственно перед смертью не было; количество введенного кофеина — 11 см³ 2-процентного раствора, или 0,166 грамма на килограмм.

Rabbit 254. Belgian hare, female. Weight, 1,285 grams. Diet, oats.

12 ноября: с 13:30 1/3 до 14:47 3/4 в ушную вену введено 10,8 см³ 2-процентного кофеина из бюретки, после инъекции 6,2 см³ — одышка, 6,7 см³ — борьба, судороги; в 13:50 1/2 освобожден от держателя, паралич особенно выражен в передних конечностях; 13:50, оправился, выжил; общее количество введенного раствора — 10,8 см³ 2-процентного кофеина за 17 минут 25 секунд, или 0,16 грамма кофеина на килограмм.

Rabbit 255. Belgian hare, male. Weight, 1,105 grams. Diet, oats.

12 ноября: с 14:31 3/4 до 14:35 1/4 получено 3,7 см³; с 14:37 1/6 до 14:46 1/6 введено 5 см³; после инъекции 6,1 см³ — судороги, сопровождающиеся одышкой, затем непрерывная борьба; когда было введено 8,3 см³, у кролика случился еще один приступ судорог; 14:47, тоническое сокращение передних конечностей; введено 8,7 см³ (158 мг на килограмм) за 15 минут 35 секунд.

Кролик 567. Серая самка. Диета: овес.

6 февраля: инъекция началась в 16:11; 16:18, судороги после инъекции 5 см³ 2-процентного кофеина; 16:21, судорога после общего введения 8 см³; 16:24, инъекция возобновлена и введено еще 2 см³; 16:28, судороги, введено еще 2 см³; всего введено кофеина 12 см³, или 162 мг на килограмм; 16:40, у кролика парализованы задние конечности; 17:00, найден мертвым.

В восьми экспериментах, составляющих серию B, кролики № 567, 254, 279 и 255, которые можно обозначить как Группу II, получили дозы 162, 160, 166 и 158 мг соответственно. № 562, 561, 560 и 559, которые можно обозначить как Группу I, получили около 200 мг кофеина на килограмм. В Группе II, получившей меньшие дозы, один (№ 254) выжил. Это можно считать исключением, поскольку, как было показано в экспериментах предыдущей серии, даже меньшие дозы могут быть смертельными. Таким образом, около 160 мг на килограмм является наименьшей безусловно смертельной дозой. Это можно было бы рассматривать как противоречие результатам, полученным для кролика № 559, но будет замечено, что в этом случае диурез был очень выраженным. Результаты экспериментов № 294 и 255 интересны в этой связи, поскольку они указывают на то, что умеренная разница в скорости инъекции не оказывает никакого влияния на токсичность кофеина. Большая устойчивость к кофеину кролика № 559, по всей вероятности, связана, следовательно, с усиленным диурезом.

Серия C.

В этих экспериментах была определена минимальная токсическая доза. Условия были такими же, как в экспериментах других серий.

Rabbit 293. Belgian hare, female. Weight, 1,610 grams. Diet, oats.

18 февраля: с 15:40 до 15:43 в ушную вену введено 4 см³ 2-процентного теплого раствора кофеина, судороги при введении 3 см³, повторные приступы; 16:00, поднялся на ноги, но сразу упал и лежал растянувшись на животе.

19 февраля: 9:00, кролик выглядел нормально, по-видимому, оправился.

Rabbit 227. White male. Weight, 2,320 grams.

26 октября: с 15:29 1/4 до 15:37 1/2 в ухо из бюретки введено 6,7 см³ 2-процентного кофеина, симптомов нет; эксперимент прекращен; выжил.

Rabbit 563. Gray female. Weight, 1,650 grams. Diet, oats.

6 февраля: инъекция началась в 13:02, введено 3,5 см³ 2-процентного кофеина (42 мг на килограмм) за четыре минуты, еще 0,6 см³ в течение следующих двух с половиной минут, общее количество введенного раствора 4,1 см³; 13:10, повышенная чувствительность, некоторое нарушение мышечной координации; беспокойство; 13:35, рефлексы снижены, мочился и ходил, походка нормальная. Под наблюдением в течение нескольких дней; симптомов не отмечено.

Rabbit 564. Gray female. Weight, 1,515 grams.

6 февраля: инъекция началась в 13:26, введено 3,5 см³ 2-процентного кофеина (46 мг на килограмм) со скоростью 1 см³ в минуту; 13:30, рефлексы усилены; 13:34, выраженный парез конечностей, кролик растянулся на животе, ноги отведены и частично вытянуты, может прыгать, но походка нарушена, нежелательных симптомов не замечено, под наблюдением в течение нескольких дней после эксперимента.

Rabbit 565. Gray female. Weight, 1,545 grams. Diet, oats.

6 февраля: начал вводить в 15:40, получил 2,5 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за две минуты, или 32 мг на килограмм, под наблюдением весь день, симптомов нет.

Rabbit 566. Gray female. Weight, 1,900 grams. Diet oats.

6 февраля: инъекция началась в 15:05, получил 3 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за три минуты, или 31 мг на килограмм, симптомов не наблюдалось.

Эти эксперименты показывают, что доза около 50 мг на килограмм при внутривенном введении вызывает легкие симптомы, такие как усиление рефлексов. В четырех экспериментах с таким количеством кофеина эти эффекты наблюдались в каждом случае. В экспериментах, где внутривенно вводились меньшие количества (30 мг на килограмм), проявления симптомов не было. Таким образом, дозу не более 50 мг на килограмм можно считать минимальной токсической дозой при внутривенном введении в указанных условиях.

Серия D.

В этих экспериментах использовался 0,5-процентный раствор кофеина, чтобы проверить влияние концентрации на его токсичность; скорость инъекции составляла 1 см³ в минуту.

Rabbit 569. Gray male. Weight, 1,475 grams. Diet, oats.

6 февраля: с 11:50 до 12:01 введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина; с 12:03 до 12:12 введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина; с 12:13 до 12:26 введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина, общее количество введенного раствора — 30 см³; 12:20, выделил 35 см³ мочи; 12:30, усиление рефлексов, но судорог нет; 16:00, рефлексы усилены.

11 февраля: жив, состояние хорошее.

Rabbit 574. Gray female. Weight, 1,555 grams. Diet, oats.

8 февраля: с 10:25 до 10:33 введено 4 см³ 0,5-процентного кофеина в солевом растворе, инъекция прекращена на пять минут; с 10:38 до 11:10 введено 30 см³, общее количество полученного раствора кофеина — 34 см³; 11:55, очень чувствителен; рефлексы заметно усилены.

9 февраля: жив, состояние хорошее.

Rabbit 571. Gray female. Weight, 1,530 grams. Diet, oats.

7 февраля: инъекция с 15:18 до 15:50, получил 30 см³ за 32 минуты, не гиперчувствителен; 15:55, беспокойство и слабость конечностей; 16:10, контроль передних конечностей нарушен, отчетливо паретичен, но пытался ходить, умер в тот же день.

Rabbit 568. Gray male. Weight, 1,605 grams. Diet, oats.

7 февраля: инъекция с 10:53 до 11:01, введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина; 11:03, инъекция возобновлена после двухминутного интервала; 11:14, получил 10 см³ 0,5-процентного кофеина внутривенно за 11 минут; 11:16, инъекция возобновлена; 11:35, получил 12 см³ 0,5-процентного кофеина, общее количество полученного раствора кофеина — 32 см³; 12:30, выделил 14 см³ кровавой мочи; 12:55, судороги и смерть через несколько минут. Вскрытие показало застой крови во внутренних органах, но других поражений не было.

Rabbit 570. Gray female. Weight, 1,225 grams. Diet, oats.

7 февраля: с 14:06 до 14:35 введено 24,5 см³ 0,5-процентного кофеина, рефлексы усилены, но судорог нет, парез особенно выражен в передних конечностях; 15:00, выделил мочу, нормальную по внешнему виду, рефлексы не усилены, но кролик был слаб.

9 февраля: найден мертвым. Вскрытие: печень, селезенка и почки полнокровны; толстый кишечник геморрагичен; сальник полнокровен и показал наличие мелких казеозных узелков; печень показала спайку с диафрагмой; внутренние органы имели вид внутрибрюшной инфекции.

Из пяти кроликов этой серии трое умерли в результате введения кофеина. Остальные двое, которые выжили, проявили лишь легкие симптомы, такие как усиление рефлексов, но никаких признаков тяжелого отравления, подобных тем, что наблюдались после инъекции таких же доз кофеина в серии A, когда вводился 2-процентный раствор кофеина. Судороги были замечены только в одном случае (№ 568); парез — в двух случаях (№ 570 и 571). Нервные симптомы даже в этой группе, следовательно, были гораздо мягче, чем в серии A. Процент смертности, однако, был выше, чем в серии A, в которой концентрация кофеина была в четыре раза выше. Вполне вероятно, что нагрузка на сердце из-за внезапного увеличения объема крови и ее разбавления может быть важным фактором в увеличении токсичности кофеина. Вполне возможно, что дозы, как раз достаточно большие, чтобы угнетать нормальное сердце, могут вызвать паралич уже перенапряженного органа.

Серия E.

В двух экспериментах этой серии была протестирована скорость инъекции как возможный фактор, влияющий на токсичность кофеина. 2-процентный раствор кофеина вводился со скоростью 1 см³ за две с половиной — три минуты.

Rabbit 572. Gray male. Weight, 1,770 grams. Diet, oats.

8 февраля: инъекция началась в 15:00, прекращена в 15:37 и возобновлена в 15:38; кролик был беспокоен; инъекция закончена в 15:52. Общее количество полученного раствора — 17,4 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за 52 минуты; периодически боролся во время инъекции; передние ноги парализованы.

9 февраля: найден мертвым.

Rabbit 573. Gray male. Weight, 1,810 grams. Diet, oats.

8 февраля: начал вводить в 13:35 и прекратил в 14:27; получил 18 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за 52 минуты; рефлексы заметно усилены вскоре после этого; 14:45, выделил кровавую мочу; 16:30, рефлексы усилены; других симптомов нет.

9 февраля: 9:00, найден мертвым.

Будет замечено, что некоторая задержка в появлении симптомов была вызвана более медленной инъекцией, но конечный результат был таким же, как при более быстрой инъекции. Вполне вероятно, следовательно, что гораздо более медленная скорость инъекции может значительно снизить токсичность кофеина.

Из результатов экспериментов по внутривенной инъекции, суммированных в таблице, следует, что минимальная токсическая доза для кроликов 2-процентного раствора кофеина, введенного со скоростью 1 см³ в минуту, составляет около 50 мг на килограмм. Двойная доза вызывает тяжелые симптомы и может быть смертельной; 160 мг на килограмм — безусловно смертельны. Если скорость инъекции уменьшается, токсичность кофеина снижается, но этот эффект не выражен, если инъекции не очень медленные. Разбавление раствора кофеина в некоторой степени подавляет нервные симптомы, но токсичность, напротив, по-видимому, увеличивается.

Таблица 5. Внутривенные инъекции.

SERIES A.
No. | Weight. | Caffein per kilo | Symptoms. | Duration of life. | Diet. | Remarks.
| Grams. | Mg. |  |  |  |
194 | 1,310 | 114 | Present | Survived | Oats | White female.
556 | 1,635 | 134 | 10 minutes | 20 minutes | do. | Gray female.
557 | 1,580 | 114 | Present | Survived | do. | Do.
558 | 1,590 | 100 | do. | do. | do. | Do.
292 | 1,770 | 141 | do. | do. | do. | Do.
194 | 1,350 | 126 | do. | 10 minutes | Carrots | Do.
SERIES B, GROUP I.
562 | 1,650 | 200 |  | 1½ hours | Oats | Gray female.
561 | 1,450 | 200 |  | do. | do. | Do.
560 | 1,620 | 200 | Present | Less than 24 hours | do. | Do.
559 | 1,875 | 190 | do. | Survived | do. | Do.
SERIES B, GROUP II.
279 | 1,320 | 166 |  | 1 hour |  | Gray and white female.
254 | 1,285 | 160 |  | Survived | Oats | Gray female.
567 |  | 162 |  | About 45 minutes |  | Do.
255 |  | 158 |  | Died |  |
SERIES C.
293 | 1,610 | 500 | Present | Survived | Oats | Gray female.
227 | 2,320 | 570 | None | do. |  | White male.
563 | 1,650 | 500 | Present | do. | do. | Gray female.
564 | 1,515 | 460 | do. | do. |  | Do.
565 | 1,545 | 320 | None | do. | do. | Do.
566 | 1,900 | 310 | do. | do. | do. | Do.
SERIES D.
569 | 1,475 | 100 | Present | Survived | Oats | Gray male.
574 | 1,555 | 112 | do. | do. | do. | Gray female.
571 | 1,530 | 100 | do. | About 2 hours | do. | Do.
568 | 1,605 | 100 |  | 20 minutes | do. | Gray male.
570 | 1,225 | 100 |  | Less than 20 hours | do. | Do.
SERIES E.
572 | 1,770 | 200 | Present | About 24 hours | Oats |
573 | 1,810 | 200 |  | do. | do. |

РЕЗЮМЕ.

Результаты экспериментов на кроликах демонстрируют значительную вариативность токсичности однократной дозы. Индивидуальные различия в устойчивости к данному препарату были настолько велики, что одни и те же эксперименты приходилось повторять многократно для каждого способа введения, прежде чем можно было сделать удовлетворительные выводы. Это наглядно иллюстрируется экспериментами с внутривенной инъекцией, при которых доза почти 0,2 грамма на килограмм не была летальной. Аналогичные случаи исключительной устойчивости или чувствительности к кофеину наблюдались и при других способах его введения. Сравнение токсичности кофеина при различных методах введения в данном исследовании показывает четко выраженные различия в его активности, хотя они не столь значительны, как в аналогичных экспериментах с другими алкалоидами, описанных рядом исследователей. Токсичность кофеина в этих экспериментах на кроликах указывает на то, что она максимальна при внутривенном введении и минимальна при введении через рот. Отношение минимальных токсических доз при этих двух способах введения кофеина составляло около 7,1; отношение минимальных летальных доз составляло около 3,1. Токсичность при подкожном введении примерно на 15–20 процентов выше, чем при введении через рот. Разница между внутримышечной и подкожной инъекцией еще более заметна. Токсичность кофеина при введении в мышцы занимает промежуточное положение между токсичностью при подкожном и внутрибрюшинном введении и составляет примерно половину от токсичности при внутривенной инъекции. Мельцер и Ауэр (58), экспериментировавшие с рядом препаратов, обнаружили, что внутримышечный метод введения столь же эффективен, как и внутривенный, причем флуоресцеин, согласно их наблюдениям, является единственным исключением. В экспериментах Соллмана и Брауна (81) с спорыньей эффект был совершенно иным, чем полученный Мельцером и Ауэром (58) с использованными ими препаратами. Вполне возможно, что результат, полученный со спорыньей, лишь иллюстрирует различие в поведении различных веществ в этом отношении. Это представляется вероятным из-за разницы в скорости всасывания различных веществ. Так, согласно Ашару, Гайяру и Рибо (Compt. rend. Soc. biol., 1907, 62: 90), всасывание из брюшной полости варьируется в зависимости от концентрации раствора и размера молекулы. Чем меньше молекула и выше концентрация, тем быстрее всасывание. То, что скорость всасывания из внутримышечных тканей неодинакова и варьируется для разных веществ, следует из экспериментов Мельцера и Ауэра (58). Разница была весьма заметной между внутримышечным и подкожным введением кураре или адреналина; результаты были несколько иными с морфином и флуоресцеином. Как показано в их протоколах, начало симптомов после внутримышечной инъекции морфина наступало быстрее, чем после подкожной инъекции, но со временем разница уменьшается и исчезает вовсе. Всасывание флуоресцеина происходит гораздо быстрее при использовании внутримышечного пути, чем при подкожном введении, но авторы отмечают, что скорость значительно уступает внутривенному введению. Разница в токсичности, которую мы наблюдали между кормлением через рот и подкожной инъекцией, хотя и отчетлива, была не очень велика. Она была намного меньше, чем та, которую Морель (55) получил с гидробромидом кофеина у кролика. Является ли эта разница между его результатами и нашими следствием использования чистого алкалоида в наших экспериментах и гидробромида, применявшегося Морелем, в настоящее время с какой-либо степенью точности утверждать нельзя. Есть надежда, что работа, проводимая в лаборатории, прольет некоторый свет на этот вопрос в ближайшем будущем. Однако эксперименты Мореля (56) показывают, что различные вещества ведут себя по-разному в этом отношении. Так, токсичность стрихнина, по его словам, в три раза выше при подкожном введении, чем при введении через рот, и в шесть раз превышает минимальную летальную дозу при внутривенном введении. Можно заметить, однако, что изучение его данных показывает, что его дозы слишком велики для кролика. В экспериментах с другими препаратами было замечено мало различий или их отсутствие между двумя способами введения. Так, дигиталин был лишь немного активнее при подкожном введении, чем через рот, в то время как токсичность гидрохлорида эметина была точно такой же, независимо от того, какой из этих методов введения вещества использовался. Различия в токсичности веществ также наблюдались между подкожным и внутривенным способами введения, но и здесь различия для разных веществ были неодинаковыми.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА МОРСКИХ СВИНКАХ.

Токсичность кофеина изучалась на большом количестве особей. Эксперименты проводились на взрослых животных и выполнялись в разное время года различными способами. Особое внимание уделялось диете как возможному фактору, влияющему на устойчивость к кофеину, а также влиянию различных способов введения на токсичность. Поэтому некоторых животных кормили овсом, некоторых морковью, другие получали как сено, так и овес. Кофеин вводили подкожно, внутрибрюшинно и через рот.

ПОДКОЖНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Серия A.

Предварительные эксперименты, проведенные на трех морских свинках, которые получили 360, 300 и 290 мг кофеина на килограмм подкожно, показали, что такие дозы были быстро летальными. Двое животных были охвачены судорогами через полчаса после введения кофеина и погибли во время приступа. У третьего через две минуты после инъекции кофеина начался столбняк. Последовали повторяющиеся приступы, которые закончились смертью животного два с половиной часа спустя. Летальные и токсические дозы, следовательно, должны быть значительно ниже 0,3 грамма кофеина на килограмм при введении этим путем, поэтому вводились меньшие дозы. Результаты показаны в экспериментах следующей серии.

Серия B.

Эксперименты с 2 дециграммами на килограмм составили эту серию.

Guinea pig 20. Female. Weight, 497 grams. Diet, oats.

2 апреля: 5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в 11:30 утра; 13:50, спазм кратковременного характера. Погибла в 15:00, через три с половиной часа после инъекции.

Guinea pig 38. Brown male. Weight, 570 grams. Diet, carrots and oats week previous to injection.

11 февраля: 15:50, 6 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину (210 мг на килограмм); 16:15, рефлексы усилены, при беспокойстве наблюдались кратковременные судороги; 16:45, при прикосновении — повторяющиеся судороги и паралич; 17:00, морская свинка лежит на боку, дыхание затрудненное и тяжелое.

February 11: 5.05 p. m., guinea pig found dead, 2 hours and 15 minutes after injection.

Guinea pig 37. Male. Weight, 820 grams. Diet, carrots and oats during week preceding the injection of caffein.

11 февраля: 15:35, 8,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину; 17:00, свинка очень чувствительна, передние конечности парализованы при прикосновении, частые спазмы задних конечностей, до 17:00 симптомов не замечено, хотя наблюдение велось постоянно; 17:05, морская свинка на ногах и выглядит нормально. При прикосновении приступа нет.

12 февраля: 9:00, найдена мертвой; погибла в течение 18 часов.

Guinea pig 13. Female. Weight, 618 grams. Diet, oats.

March 29: 2.45, 6 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously (0.194 grams per kilo).

March 30: Died at 4 p. m., 25 hours after injection.

Guinea pig 36. Male. Weight, 850 grams. Fed oats and carrots for one week previous to injection.

11 февраля: 15:30, 8,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину; 17:00, несколько более чувствительна, чем обычно, других симптомов нет, реакции на прикосновение нет; 17:05, симптомов нет.

12 февраля: 9:00, найдена мертвой, примерно через 18 часов после инъекции.

Результаты этих экспериментов, наблюдавшиеся у пяти морских свинок, показывают, что два дециграмма кофеина на килограмм веса животного вызывают симптомы в течение от получаса до примерно двух с четвертью часов после инъекции. Смерть наступила у двух морских свинок через 70 минут – 1 час после первых проявлений симптомов. Две другие погибли ночью, в то время как одна прожила 25 часов после инъекции кофеина. Таким образом, даже 2 дециграмма кофеина на килограмм веса могут быть летальными для морской свинки. Однако эксперименты, проведенные позже, показали, что устойчивость к кофеину у некоторых морских свинок заметно выше. Это подтверждается следующими экспериментами, в которых дозы от 0,2 до 0,24 грамма кофеина на килограмм вводились тем же путем.

Серия C.

Guinea pig 66. Yellow and dark brown male. Weight, 510 grams. Diet, oats.

4 октября: 5 куб. см 2-процентного кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно в спину в 15:00; 17:00, симптомов нет.

5 октября: 9:00, жива; состояние хорошее.

9 октября: Найдена мертвой. Вскрытие: Застойные явления в печени, почках и тонкой кишке.

Guinea pig 65. White and black male. Weight, 510 grams. Diet, oats.

4 октября: 5 куб. см 2-процентного кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно в спину в 15:00; 17:00, симптомов нет.

5 октября: 9:00, состояние хорошее.

Guinea pig 60. White and gray female. Weight, 320 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:25, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина (0,219 грамма на килограмм) введено подкожно в спину; 15:40, судороги с последующим восстановлением; 15:50, частые спазмы с параличом, особенно передних конечностей; 17:30, столбняк при извлечении из клетки и помещении на пол.

4 октября: 8:50, найдена мертвой. Вскрытие: Застойные явления в тонких кишках, легких, печени.

Guinea pig 57. White and gray female. Weight, 350 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:15, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину (0,2 грамма на килограмм); 15:40, судороги с последующим восстановлением; 17:30, выраженных симптомов нет.

4 октября: 8:50, жива, активна.

6 октября: Найдена мертвой в 9:00. Вскрытие: Застойные явления в легких и печени; почки с петехиями; тяжелый гастроэнтерит.

Guinea pig 68. Yellow male. Weight, 785 grams. Diet, oats.

6 октября: 11:35, 7,8 куб. см 2-процентного кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно; 12:00, рефлексы заметно усилены; 16:20, рефлексы такие же, как в 12:00.

7 октября: 9:00, мертва. Вскрытие: Легкие полнокровны; печень полнокровна и жирно перерождена; селезенка полнокровна, почка с геморрагическими пятнами; слизистая оболочка желудка некротизирована; небольшой участок тонкой кишки воспален.

Guinea pig 69. White male. Weight, 585 grams. Diet, oats.

6 октября: 11:40, 5,8 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно; 12:00, рефлексы усилены, но не так сильно, как у № 68; 16:20, морская свинка гиперчувствительна, рефлексы усилены больше, чем в 12:00.

7 октября: 9:00, жива.

15 октября: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 61. Brown and black female. Weight, 330 grams. Diet, oats.

3 октября: 16:00, 4 куб. см 2-процентного кофеина (240 мг на килограмм) введено подкожно; 17:30, рефлексы усилены; бегает, но волочит задние конечности.

4 октября: 8:50, найдена мертвой.

Guinea pig 62. White, yellow, and black female. Weight, 335 grams. Diet, oats.

3 октября: 16:05, 4 куб. см 2-процентного кофеина (238 мг на килограмм) введено подкожно в спину; 17:00, судороги; 17:20, судороги, чередующиеся с параличом передних и задних конечностей.

4 октября: 8:50, найдена мертвой.

Guinea pig 70. White and brown male. Weight, 545 grams. Diet, oats.

7 октября: 15:00, 6,5 куб. см 2-процентного кофеина (238 мг на килограмм) водного раствора введено подкожно; 15:50, рефлексы усилены.

9 октября: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 71. Brown and white male. Weight, 540 grams. Diet, oats.

7 октября: 15:00, 6,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина (0,24 грамма на килограмм) введено подкожно; 15:45, рефлексы усилены, столбняк.

9 октября: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 72. Brown and white male. Weight, 560 grams. Diet, oats.

7 октября: 15:00, 6,5 куб. см 2-процентного кофеина (0,232 грамма на килограмм) водного раствора введено подкожно; 15:35, рефлексы усилены.

October 10: found dead. Autopsy: Nos. 70, 71, 72 showed congestion of organs.

Реакция на кофеин в экспериментах этой серии (C) показала значительную вариативность. Появление симптомов, а также конечный исход экспериментов заметно различались в ряде случаев, несмотря на то, что условия были одинаковыми; так, введение 0,2 грамма на килограмм морским свинкам, которые получали одинаковый рацион, не вызвало симптомов у двух животных (№ 66 и 65), в то время как у четырех других наблюдались выраженные симптомы; у двух из них симптомы появились через час пятнадцать минут после инъекции, а у двух других (№ 68 и 69) легкие симптомы появились только через 20 или 25 минут. Последние две находились под наблюдением еще 4 часа, но видимых изменений в их состоянии не было. Продолжительность жизни всех этих морских свинок, как указано в таблице, также варьировалась. Две (№ 60 и 68) погибли в ночь после получения кофеина, одна выжила (№ 65), а три другие (№ 57, 66 и 69) прожили соответственно 2,5, 5 и 9 дней. Эксперименты с большими дозами также показали различия в поведении этих животных по отношению к кофеину, но они были не столь выражены. Как показано в таблице, симптомы появлялись через 35 минут – 1,5 часа после инъекции. Продолжительность жизни составляла менее 1 дня у двух свинок, примерно вдвое дольше у двух других, и в одном случае – от 2 до 3 дней.

Сравнение с результатами, полученными в предыдущей серии, показывает поразительную разницу в устойчивости к кофеину. Поскольку 2 дециграмма на килограмм оказались более быстро летальными для морской свинки, чем большие дозы, использованные в более поздних экспериментах, эта разница в устойчивости к кофеину может быть обусловлена несколькими факторами. Как отмечалось в экспериментах на кроликах, возраст может быть важным фактором, влияющим на токсичность кофеина. К сожалению, точных данных о возрасте морских свинок не было, но все они были, по-видимому, взрослыми, хотя и значительно различались по весу. Разница в их возрасте, по всей вероятности, была невелика. Более того, можно заметить, что устойчивость в сериях B и C различалась у животных примерно одинакового веса. Это очевидно при сравнении экспериментов № 20, 38 и 13 серии B с № 65, 66 и 69 следующей серии. Опять же, дальнейший осмотр и анализ этих таблиц не показывают разницы в токсичности, хотя может существовать значительная разница в весе, из чего можно сделать вывод, что животные были примерно одного возраста или что это не играет никакой роли в устойчивости к кофеину у морской свинки.

Диета — еще один фактор, который следует учитывать в этой связи. Недавняя работа Ханта (39) указывает на то, что это может влиять на устойчивость животных к некоторым ядам. Наши эксперименты, однако, не показывают никакой разницы в токсичности кофеина у морских свинок, независимо от того, получали ли они овес, морковь или и то, и другое, поскольку на одной и той же диете были получены разные результаты, и, по-видимому, не было никакой разницы в токсичности кофеина при разной диете. Напрашиваются другие объяснения полученных результатов. Сезонные изменения были названы рядом исследователей причиной вариативности устойчивости к лекарственным препаратам. Согласно Фоке (24), лягушки более восприимчивы к дигиталису весной, чем летом, в то время как Мошкович (61) и Эдмундс (21) сообщили о прямо противоположных результатах. Наблюдения Шмидеберга (80) за строфантином у лягушек согласуются с наблюдениями Эдмундса (21) и Мошковича (61). Аналогичные результаты были получены при работе с морскими свинками. Эксперименты Харрингтона (34) показывают, что стимуляция блуждающего нерва менее эффективна с октября по январь, чем с февраля по апрель, когда они также гораздо более восприимчивы к оперативным вмешательствам. Хант обнаружил, что устойчивость морских свинок к ацетонитрилу примерно в два раза выше в летние месяцы, чем в январе и феврале.

Порода также может считаться важным фактором в этой связи. Поскольку морские свинки, использовавшиеся в разное время года, относились к нескольким разновидностям, нет оснований полагать, однако, что разновидности, с которыми экспериментировали летом, были более устойчивы, чем те, что использовались зимой и весной. Поэтому весьма вероятно, что большая устойчивость к кофеину морских свинок серии C по сравнению с серией B была обусловлена сезонными изменениями.

Дозы от 0,20 до 0,24 грамма кофеина на килограмм веса, следовательно, могут рассматриваться как минимальная летальная доза для морской свинки, в зависимости от сезона. Поскольку 0,2 грамма на килограмм оказались быстро летальными в серии B, это количество, возможно, не было минимальной летальной дозой для морской свинки в сезон, когда проводились эксперименты. Поэтому в феврале и марте были проведены дополнительные тесты с меньшими дозами. Результаты показаны в серии D.

Серия D.

Guinea pig 49. Male. Weight, 510 grams. Diet, oats for 1 month previous to experiment.

17 марта: 15:00, 4 куб. см 2-процентного кофеина (0,16 грамма на килограмм) введено подкожно; 16:40, рефлексы усилены; 17:40, симптомов нет.

18 марта: 9:00, найдена мертвой, погибла менее чем за 18 часов. Вскрытие: Кровоизлияние в брюшную полость; печень и селезенка чрезмерно полнокровны; кишечник инъецирован; геморрагическая область в месте инъекции.

Guinea pig 40. Male. Weight, 630 grams. Diet, oats and carrots one week previous to injection.

February 12: 11 a. m., 5 cc 2 per cent caffein (0.158 gram per kilo) injected subcutaneously into back.

13 февраля: 13:00, все еще жива.

14 февраля: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 45. Female. Weight, 435 grams. Diet, oats for about one month previous to injection.

17 марта: 15:00, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину (0,160 грамма на килограмм); 16:35, симптомов нет; 17:40, симптомов нет.

Guinea pig 39. Male. Weight, 820 grams. Diet, oats and carrots.

February 12: 11 a. m., 6 cc (0.15 gram per kilo) 2 per cent caffein injected subcutaneously in back.

14 февраля: 9:00, жива; казалось, в хорошем состоянии; найдена мертвой в 13:00.

Guinea pig 41. Weight, 660 grams. Diet, oats and carrots one week previous to injection.

February 12: 11 a. m., 5 cc (0.15 gram per kilo) 2 per cent caffein injected subcutaneously.

14 февраля: 14:00, свинка жива; по-видимому, нормальна.

18 февраля: Морская свинка все еще жива и, по-видимому, в хорошем состоянии.

Guinea pig 46. Female. Weight, 470 grams. Diet, oats about one month previous to experiment.

17 марта: 15:15, 4 куб. см (0,170 грамма на килограмм) 2-процентного кофеина введено в спину подкожно; 16:35, рефлексы усилены, тремор при прикосновении выражен; 17:40, без изменений, симптомы примерно такие же, как раньше.

18 марта: 14:30, симптомов нет.

Эксперименты этой серии (D) также показали значительную разницу в устойчивости отдельных морских свинок. № 41, 45 и 46 выжили; остальные свинки погибли в течение от 18 часов до 2 дней после введения кофеина. Поскольку вскрытие проводилось только у одной, невозможно установить причину вариативности токсичности кофеина у этих морских свинок, так как диета и другие условия, в которых проводились эксперименты, были одинаковыми. В экспериментах на кошках и кроликах было обнаружено, что наличие болезненных процессов имеет тенденцию увеличивать токсичность кофеина. Наблюдения Офюльса (66) представляют интерес в этой связи. Он обнаружил спонтанные поражения почек и печени у большой доли исследованных морских свинок. Большая восприимчивость к кофеину морских свинок № 39, 40, 49, вероятно, обусловлена каким-то патологическим изменением, которое увеличило его токсичность. Таким образом, от 0,2 до 0,24 грамма на килограмм можно рассматривать как минимальную летальную дозу для нормальной морской свинки при подкожном введении кофеина, при этом минимальная токсическая доза составляет около 150–160 мг на килограмм.

Также были проведены эксперименты по определению наибольшей дозы, которая не вызывает никаких видимых эффектов. В ряде тестов с дозировкой от 100 до 120 мг кофеина на килограмм (серия E, см. табл. 6, стр. 51) не наблюдалось ни проявлений нервных или мышечных нарушений, ни каких-либо отклонений от нормы в дыхательной активности. Такие количества можно рассматривать как наибольшие дозы, которые безусловно безопасны для этих животных. Вполне возможно, следовательно, что большая вариативность токсичности кофеина, наблюдаемая в этих экспериментах, обусловлена болезненными состояниями. Более того, существуют некоторые доказательства того, что кофеин увеличивает токсичность некоторых ядов, как показал Хейл (33) для ацетанилида. Невозможно ли, что кофеин может аналогичным образом подвергаться воздействию ядов, циркулирующих в организме? Действительно, недавняя работа Леба (23) делает это предположение весьма вероятным. Этот исследователь обнаружил, что кофеин и адреналин, введенные вместе, вызывают миокардит у кролика. Вполне вероятно, что комбинированное действие кофеина и какого-либо уже существующего яда может вызвать изменения, которые заканчиваются смертью животного. Отсроченная смерть морских свинок после введения кофеина, наблюдаемая в этой и других сериях, вероятно, может быть объяснена таким образом.

Эксперимент 57 дает некоторое подтверждение этой точке зрения. Состояние почек и наличие тяжелого гастроэнтерита достаточны, чтобы объяснить смерть в этом случае. Опять же, частая связь гастроэнтерита и застойных явлений в органах при интоксикации кофеином, обнаруженная у разных животных, делает весьма вероятным, что эти поражения были вызваны кофеином.

ВВЕДЕНИЕ В БРЮШНУЮ ПОЛОСТЬ.

Эксперименты проводились с различными дозами. Все морские свинки в этой серии содержались на однообразной диете, состоящей из овса. Большинство из них были среднего размера, и не было больших различий в их весе. Эксперименты серии A с наименьшими дозами проводились в марте и апреле; все остальные эксперименты, как можно заметить, были сделаны в октябре.

Серия A.

Guinea pig 41. Weight, 700 grams. Diet, oats.

1 апреля: 15:30, 4,5 куб. см 2-процентного кофеина (130 мг на килограмм) введено в брюшную полость. 17:35, симптомы присутствуют, но столбняка нет.

2 апреля: Найдена мертвой около 14:00, продолжительность жизни около 22 часов. Вскрытие: Подкожное кровоизлияние в месте инокуляции; серозный экссудат на висцеральной и париетальной брюшине с выраженным воспалением брюшины; участки кишечника показали легкий энтерит.

Guinea pig 49. Male. Weight, 370 grams. Diet, oats.

1 апреля: 15:15, 2,5 куб. см 2-процентного кофеина (135 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 17:30, симптомы присутствуют; рефлексы усилены, но столбняка нет. Морская свинка выжила.

Guinea pig 47. Female. Weight, 550 grams. Diet, oats since about February 4.

17 марта: 15:30, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина (127 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 16:35, повышенная раздражительность присутствует, но не выражена; 17:40, симптомы примерно такие же, как раньше.

18 марта: 14:30, состояние хорошее; симптомов нет. Выжила.

Guinea pig 50. Female. Weight, 290 grams. Diet, oats.

1 апреля: 15:30, 2 куб. см 2-процентного кофеина (138 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 17:35, симптомы присутствуют; рефлексы значительно усилены, но столбняка нет. Выжила.

Серия B.

Guinea pig 51. Yellow female. Weight, 415 grams.

1 октября: 9:50, 3 куб. см (144 мг на килограмм) 2-процентного кофеина введено в брюшную полость; 16:30, симптомов нет, хотя находилась под наблюдением весь день.

3 октября: 14:00, жива.

Guinea pig 52. White male. Weight, 450 grams.

1 октября: 9:45, 3,5 куб. см, 2-процентного кофеина (155 мг на килограмм), введено в брюшную полость; 16:30, с момента инъекции симптомы не развились.

3 октября: 14:00, жива.

Guinea pig 58. Brown and white male. Weight, 490 grams.

1 октября: 9:45, 4 куб. см, 2-процентного кофеина (163 мг на килограмм), введено в брюшную полость; 16:30, с момента инъекции симптомы не развились.

3 октября: 14:00, жива.

8 октября: Найдена мертвой. Вскрытие: Застойные явления в легких, селезенке, печени, почках и тонкой кишке.

Серия C.

Guinea pig 59. Gray and white. Weight, 375 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:00, 3,75 куб. см (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 14:15, рефлексы усилены, но не выраженно; 16:00, рефлексы еще более усилены; других симптомов нет; 17:30, симптомов нет.

4 октября: 8:50, морская свинка жива и активна.

Guinea pig 58. Brown and white. Weight, 380 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:00, 3,8 куб. см кофеина (0,2 грамма на килограмм), 2-процентного раствора, введено в брюшную полость; 14:10, задние ноги вытянуты, затем столбняк; приступ длился несколько секунд, после чего свинка поднялась на ноги, но рефлексы остались сильно преувеличенными; с 16:00 до 17:30 симптомов интоксикации кофеином нет.

4 октября: 8:50, морская свинка жива и активна.

Guinea pig 56. Gray and white male. Weight, 440 grams. Diet, oats.

1 октября: 11:30, получила 4,6 куб. см 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) в брюшную полость; 11:45, скованность и ригидность задних конечностей, рефлексы усилены; 12:30, задние ноги парализованы, рефлексы усилены; 16:35, симптомов нет, морская свинка в хорошем состоянии.

3 октября: Все еще жива в хорошем состоянии.

14 октября: Погибла. Вскрытие: Передняя доля правого легкого гепатизирована. Небольшой участок тонкой кишки отечен. Другие органы в норме.

Guinea pig 55. White and yellow male. Weight, 690 grams. Diet, oats.

1 октября: 11:30, получила 6,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина (188 мг на килограмм) в брюшную полость; 11:40, скованность во всех конечностях, рефлексы заметно усилены; 12:30, рефлексы усилены, передние и задние конечности парализованы; 15:00, найдена мертвой.

Серия D.

Guinea pig 67. Gray and yellow male. Weight, 330 grams. Diet, oats.

5 октября: 11:25, 4 куб. см 2-процентного кофеина введено в брюшную полость (240 мг на килограмм); 11:30, столбняк — выжила, судороги периодически. Смерть в 14:55. Вскрытие: Тяжелый гастроэнтерит; почки с петехиями; застойные явления в легких и печени.

Guinea pig 63. Gray and white male. Weight, 340 grams. Diet, oats.

October 5: 11.20 a. m., 4 cc of 2 per cent caffein (235 mg per kilo) injected into peritoneal cavity.

14 октября: Жива и в хорошем состоянии.

Guinea pig 64. Brown and black female. Weight, 305 grams.

5 октября: 11:35, 3,8 куб. см 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 11:40, столбняк — выжила, судороги периодически, погибла в 16:15. Вскрытие: Результаты точно такие же, как у № 67.

Изучение результатов экспериментов с внутрибрюшинными инъекциями показало, что 0,2 грамма кофеина на килограмм были токсичны для двух морских свинок (№ 59 и 58). Тяжелые симптомы наблюдались в течение 15 минут у № 56 и в течение одного часа у № 55 после введения примерно такой же дозы кофеина. Одна из них погибла в течение трех с половиной часов; другая, № 56, хорошо оправилась от острых эффектов. Это количество кофеина, следовательно, можно рассматривать как минимальную токсическую дозу для морской свинки при введении в брюшную полость. Это подтверждается экспериментами серии B, в которых меньшие дозы не вызывали никаких мышечных, нервных или дыхательных симптомов, не было также замечено никаких последствий, так как все они выжили и находились под наблюдением некоторое время. Морские свинки серии A, однако, по-видимому, противоречат этим результатам. Следует отметить, что заметно меньшие дозы вызывали симптомы у всех из них, и один случай закончился летально. Сезонная вариативность, как уже отмечалось, по всей вероятности, также ответственна за разницу в устойчивости между морскими свинками серий A и B. Также были проведены тесты для определения минимальной летальной дозы. Для этой цели были выполнены эксперименты серии D. Устойчивость № 63 в этой серии весьма поразительна. Мы не можем объяснить такое расхождение в результатах, полученных в практически одинаковых условиях. Минимальная летальная доза кофеина при введении в брюшную полость, следовательно, составляет около 240–250 миллиграммов на килограмм. Эти количества, как можно заметить, были быстро летальными, в поразительном контрасте с результатами, полученными при введении таких доз подкожно. Это, вероятно, связано с лучшим всасыванием из брюшной полости, чем из подкожных тканей.

ВВЕДЕНИЕ ЧЕРЕЗ РОТ.

Все морские свинки в этих экспериментах содержались на диете из сена и овса и были крупного размера. Тесты проводились с различными дозами кофеина, чтобы определить пределы токсичности при введении препарата через рот.

Guinea pig 129. White and black male. Weight, 855 grams. Diet, oats and hay.

6 июня: 14:20, 12 куб. см 2-процентного кофеина (0,28 грамма на килограмм) через рот; 15:00, рефлексы усилены; 17:00, рефлексы еще более усилены; других симптомов нет.

7 июня: 9:00, найдена мертвой; морская свинка выделила 75 куб. см мочи, которая была почти бесцветной. Вскрытие: Сердце и кровеносные сосуды инъецированы; легкие полнокровны; тонкие кишки полнокровны; другие органы, по-видимому, нормальны.

Guinea pig 130. Black and brown male. Weight, 800 grams. Diet, oats and hay.

6 июня: 14:30, 12 куб. см 2-процентного кофеина (0,3 грамма на килограмм) введено через рот; 15:00, рефлексы усилены; 17:00, усиление рефлексов больше, чем в 15:00.

7 июня: 9:00, найдена мертвой; с 16:00 выделилось лишь несколько кубических сантиметров мочи. Вскрытие: Сердце и кровеносные сосуды инъецированы; легкие полнокровны; тонкие кишки слегка полнокровны.

Guinea pig 181. White and yellow male. Weight, 860 grams. Diet, oats and hay.

6 июня: 14:40, 12 куб. см 2-процентного кофеина введено через рот; 15:00, рефлексы усилены; 17:00, рефлексы еще более выражены.

7 июня: 9:00, найдена мертвой, свинка выделила около 5 куб. см мочи с 16:00 предыдущего дня. Вскрытие: То же, что у № 130.

Guinea pig 136. White and black male. Weight, 1,000 grams. Diet, oats and hay.

9 июня: 16:00, 7,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в спину; 16:50, рефлексы усилены.

10 июня: 9:30, более чувствительна, чем нормальные морские свинки, но рефлексы не столь выражены, как в 17:00 предыдущего дня, выделилось около 15 куб. см мочи с момента инъекции кофеина, восстановление реактива Фелинга значительное, белка нет.

13 июня: Жива и в хорошем состоянии. Аппетит хороший. (Примечание. — Параллельный тест с мочой двух морских свинок, которые не получали кофеин, не показал восстановления реактива Фелинга.)

Guinea pig 137. White and brown male. Weight, 925 grams. Diet, oats and hay.

June 9: 4 p. m., 7 cc 2 per cent solution caffein injected subcutaneously; 4.50 p. m., reflexes increased.

10 июня: Рефлексы менее выражены, чем в 17:00 предыдущего дня, но более чувствительна, чем нормальная морская свинка, выделилось около 10 куб. см мочи с момента инъекции кофеина, умеренное количество восстановления реактива Фелинга.

13 июня: Морская свинка жива, аппетит хороший, состояние хорошее.

16 июня: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 135. White and black male. Weight, 955 grams. Diet, hay and oats.

9 июня: 15:00, 7,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина дано через рот с помощью желудочного зонда; 16:50, рефлексы усилены.

10 июня: Рефлексы меньше, чем в предыдущий день, и менее выражены, чем у № 136, собрано несколько кубических сантиметров грязно-коричневой мочи, но проверить на восстановление не удалось.

13 июня: Состояние хорошее, аппетит хороший.

16 июня: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 134. White and brown male. Weight, 740 grams. Diet, hay and oats.

9 июня: 14:55, 6 куб. см теплого 2-процентного раствора кофеина дано через рот с помощью желудочного зонда; 16:50, рефлексы усилены.

10 июня: 9:30, рефлексы намного меньше, чем днем ранее, усиление незначительное, выделилось несколько кубических сантиметров мочи с момента инъекции кофеина, выглядела коричневой и грязной, проверить на восстанавливающие вещества не удалось.

13 июня: Морская свинка жива, аппетит хороший, состояние хорошее.

14 июня: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 128. White and black male. Weight, 1,075 grams. Diet, hay and oats.

7 июня: 10:00, 11 куб. см 2-процентного кофеина через рот с помощью желудочного зонда; 11:10, симптомов нет, моча не выделялась; 13:00, усиленные рефлексы, выделилось около 15 куб. см (оценочно) мочи; 16:00, рефлексы усилены, выделилось еще больше мочи (около 20 куб. см); 16:50, столбняк, частые приступы, затем паралич и смерть в 16:58. Вскрытие: Легкие полнокровны; кровеносные сосуды сердца инъецированы; кишечник слегка полнокровен; жирная печень.

Guinea pig 126. White and gray male. Weight, 980 grams. Diet, oats and hay.

7 июня: 9:40, 9,8 куб. см 2-процентного кофеина дано через рот с помощью желудочного зонда; 10:00, симптомов нет; 11:10, моча не выделялась, рефлексы усилены; 13:00, более чувствительна, чем раньше; 16:00, усиление рефлексов более выражено, моча не выделялась; 16:45, собрано около 15 куб. см мочи; 17:00, без изменений.

8 июня: 9:00, рефлексы примерно такие же, как в 17:00 предыдущего дня, моча не выделялась с 16:45 предыдущего дня, значительное восстановление реактива Фелинга, намного больше, чем в моче морской свинки № 127; 11:05, судороги; 12:00, все еще жива и вытянута на животе; погибла в 13:00. Вскрытие: Легкие сильно полнокровны; сердце и кровеносные сосуды инъецированы; кровеносные сосуды почки и тонких кишок инъецированы; печень переполнена кровью; несколько некротических пятен в желудке.

Guinea pig 127. White, black, and brown male. Weight, 760 grams. Diet, oats and hay.

7 июня: 9:50, 7,6 куб. см 2-процентного кофеина через рот с помощью желудочного зонда; 10:00, симптомов нет; 11:10, рефлексы усилены, моча не выделялась; 13:00, очень чувствительна; 16:00, чувствительность усилена, выделилось около 20 куб. см мочи; 17:00, без изменений.

8 июня: 9:00, рефлексы примерно такие же, как в 17:00 предыдущего дня; 9:30, морская свинка выделила 30 куб. см мочи с момента получения кофеина, моча показала умеренное количество восстановления; 12:00, судороги; погибла в 14:30. Вскрытие: Легкие полнокровны; кровеносные сосуды сердца и кишечника инъецированы; многочисленные некротические пятна в желудке; другие органы, по-видимому, нормальны.

Изучение протоколов показывает, что всасывание кофеина из желудочно-кишечного тракта было довольно быстрым, симптомы наблюдались уже через 20 минут после его введения. Продолжительность жизни, как можно заметить, варьировалась в зависимости от размера дозы. Когда скармливалось примерно 3 дециграмма на килограмм, все животные погибали ночью. Таким образом, они жили менее 18 часов. 2 дециграмма на килограмм были также летальными, но продолжительность жизни была больше. Чтобы решить, является ли это наименьшей летальной дозой, скармливались меньшие количества. Сначала казалось, что около 150 мг на килограмм — это наименьшая токсическая доза, а около 200 мг на килограмм — минимальная летальная доза. Макроскопическое исследование органов, однако, вызвало некоторые сомнения в этом предположении, так как хорошо выраженные поражения были замечены у всех морских свинок, которые получили 0,2 грамма на килограмм. Вполне возможно, следовательно, что минимальная летальная доза может быть несколько выше, так как у нас есть основания полагать, что, по крайней мере, при некоторых патологических состояниях восприимчивость к кофеину повышена. Наличие жировых изменений в печени у № 128 и быстрая смерть в этом случае дают особое подтверждение этой точке зрения. Следовательно, минимальная летальная доза, вероятно, больше 0,2 грамма на килограмм для нормальной морской свинки. Дозы, использованные для тестов на морских свинках № 129, 130 и 131, могут, следовательно, считаться минимальной летальной дозой для этих животных. Также можно заметить, что макроскопическое исследование органов этих животных не выявило наличия тяжелых поражений. То, что минимальная токсическая доза, вероятно, намного меньше 0,28 грамма на килограмм, указывают эксперименты на морских свинках № 135 и 134, в которых 0,15 грамма кофеина на килограмм вызывали легкие симптомы в течение от двух до трех часов. Обе они, однако, а также № 137, погибли через четыре-шесть дней после того, как препарат был скормлен. Как уже отмечалось, кофеин может быть фактором отсроченной смерти морских свинок, которые получили его умеренные дозы. То, что это предположение может быть верным и для морских свинок № 134, 135 и 137, действительно становится вероятным благодаря наблюдению, что после умеренных количеств кофеина симптомы могут сохраняться у морской свинки в течение примерно 24 часов, а также благодаря тому факту, что секреция мочи у этих животных была очень скудной, как показано в предыдущей записи экспериментов; это означает медленное выведение кофеина и продуктов его разложения. Вполне вероятно, что присутствие токсических количеств кофеина в организме в течение значительного времени вызвало бы изменения, которые в конечном итоге привели бы к смерти животного, или что болезненные процессы запускаются комбинированным действием кофеина и какого-либо уже существующего яда. Поскольку некоторые морские свинки, однако, пережили указанные дозы, более вероятно, что такие изменения были бы вызваны кофеином в присутствии уже существующего яда. Смерть этих свинок, а также № 137 несколько дней спустя, трудно объяснить какой-либо другой теорией, кроме предложенной. Если бы не тот факт, что контрольные животные, то есть животные той же партии, которые не получали кофеин, пережили всех экспериментальных животных, измененные условия окружающей среды или несчастный случай могли бы считаться причиной смерти морских свинок последней серии.

Таблица 6. — Подкожная инъекция морским свинкам.

SERIES A.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
| Grams. | Mg. |  |  |  |  |
18 | 500 | 0.300 | 2 minutes | 2 hours 40 minutes | Carrots | March | Female.
15 | 548 | .290 |  | 30 minutes | Oats | do. | Do.
14 | 442 | .360 | 15 minutes | do. | do. | do. | Do.
SERIES B.
20 | 497 | 0.200 | 2 hours 20 minutes | 3 hours 30 minutes | Oats | April | Female.
38 | 570 | .210 | 25 minutes | 2 hours 15 minutes | Carrots | February | Male.
37 | 820 | .200 | 1 hour 25 minutes | Less than 18 hours | Carrots and oats. | do. | Do.
13 | 618 | .194 | 25 hours |  | Oats | March | Female.
36 | 850 | .200 | 1 hour 30 minutes | 18 hours | Carrots and oats. | February | Male.
SERIES C.
66 | 510 | 0.200 | None | 5 days | Oats | October | Male.
65 | 510 | .200 | do. | Survived | do. | do. | do.
60 | 320 | .219 | 1 hour 15 minutes | Within 18 hours | do. | do. | Female.
57 | 350 | .200 | do. | About 2½ days | do. | do. | Do.
68 | 785 | .200 | 25 minutes | Less than 22 hours | do. | do. | Male.
69 | 585 | .200 | 20 minutes | 9 days | do. | do. | Do.
61 | 330 | .240 | 1 hour 30 minutes | Less than 24 hours | do. | do. | Female.
62 | 335 | .238 | 1 hour | do. | do. | do. | Do.
70 | 545 | .238 | 50 minutes | About 2 days | do. | do. | Male.
71 | 540 | .240 | 45 minutes | do. | do. | do. | Do.
72 | 560 | .232 | 35 minutes | About 3 days | do. | do. | Do.
SERIES D.
49 | 510 | 0.160 | 1 hour 40 minutes | Less than 18 hours | Oats | March | Male.
40 | 630 | .158 |  | Less than 2 days | Oats and carrots. | February | Do.
45 | 435 | .160 | None | Survived | Oats | March | Female.
39 | 820 | .150 |  | 2 days | Oats and carrots. | February | Male.
41 | 660 | .150 |  | Survived | do. | do. |
46 | 470 | .170 | 1 hour 20 minutes | do. | Oats (?) | March | Female.
SERIES E.
19 | 556 | 0.100 |  | Survived | Oats | April
42 | 490 | .120 | None | do. | do. | February
43 | 430 | .116 | do. | do. | do. | do.
44 | 535 | .112 | do. | do. | do. | do.
97 | 330 | .100 | do. | do. | do. | November
98 | 520 | .100 | do. | About 3 days | Carrots | do.

SERIES A.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
18 | 500 | 0.300 | 2 minutes
15 | 548 | .290 |
14 | 442 | .360 | 15 minutes
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
18 | 2 hours 40 minutes | Carrots | March | Female.
15 | 30 minutes | Oats | do. | Do.
14 | do. | do. | do. | Do.
SERIES B.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
20 | 497 | 0.200 | 2 hours 20 minutes
38 | 570 | .210 | 25 minutes
37 | 820 | .200 | 1 hour 25 minutes
13 | 618 | .194 | 25 hours
36 | 850 | .200 | 1 hour 30 minutes
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
20 | 3 hours 30 minutes | Oats | April | Female.
38 | 2 hours 15 minutes | Carrots | February | Male.
37 | Less than 18 hours | Carrots and oats. | do. | Do.
13 |  | Oats | March | Female.
36 | 18 hours | Carrots and oats. | February | Male.
SERIES C.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
66 | 510 | 0.200 | None
65 | 510 | .200 | do.
60 | 320 | .219 | 1 hour 15 minutes
57 | 350 | .200 | do.
68 | 785 | .200 | 25 minutes
69 | 585 | .200 | 20 minutes
61 | 330 | .240 | 1 hour 30 minutes
62 | 335 | .238 | 1 hour
70 | 545 | .238 | 50 minutes
71 | 540 | .240 | 45 minutes
72 | 560 | .232 | 35 minutes
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
66 | 5 days | Oats | October | Male.
65 | Survived | do. | do. | do.
60 | Within 18 hours | do. | do. | Female.
57 | About 2½ days | do. | do. | Do.
68 | Less than 22 hours | do. | do. | Male.
69 | 9 days | do. | do. | Do.
61 | Less than 24 hours | do. | do. | Female.
62 | do. | do. | do. | Do.
70 | About 2 days | do. | do. | Male.
71 | do. | do. | do. | Do.
72 | About 3 days | do. | do. | Do.
SERIES D.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
49 | 510 | 0.160 | 1 hour 40 minutes
40 | 630 | .158 |
45 | 435 | .160 | None
39 | 820 | .150 |
41 | 660 | .150 |
46 | 470 | .170 | 1 hour 20 minutes
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
49 | Less than 18 hours | Oats | March | Male.
40 | Less than 2 days | Oats and carrots. | February | Do.
45 | Survived | Oats | March | Female.
39 | 2 days | Oats and carrots. | February | Male.
41 | Survived | do. | do. |
46 | do. | Oats (?) | March | Female.
SERIES E.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
19 | 556 | 0.100 |
42 | 490 | .120 | None
43 | 430 | .116 | do.
44 | 535 | .112 | do.
97 | 330 | .100 | do.
98 | 520 | .100 | do.
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
19 | Survived | Oats | April
42 | do. | do. | February
43 | do. | do. | do.
44 | do. | do. | do.
97 | do. | do. | November
98 | About 3 days | Carrots | do.

Таблица 7. — Введение в брюшную полость; морские свинки.

SERIES A.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
| Grams. | Mg. |  |  |  |  |
41 | 700 | 0.130 | 2 hours 15 minutes | 22 hours | Oats | April | Male.
49 | 370 | .135 | 2 hours | Survived | do. | do. | Do.
47 | 550 | .127 | 1 hour | do. | do. | March | Female.
50 | 290 | .138 | 2 hours | do. | do. | April | Do.
SERIES B.
51 | 415 | 0.144 | None | Survived | Oats | October | Female.
52 | 450 | .155 | do. | do. | do. | do. | Male.
53 | 490 | .163 | do. | do. | do. | do. | Do.
SERIES C.
59 | 375 | 0.200 | 15 minutes | Survived | Oats | October | Gray and white.
58 | 380 | .200 | 10 minutes | do. | do. | do.
56 | 440 | .200 | 15 minutes | 14 days | do. | do. | Male.
55 | 690 | .188 | 1 hour | 3 hours 30 minutes | do. | do. | Do.
SERIES D.
67 | 330 | 0.240 | 5 minutes | 30 minutes | Oats | October | Male.
63 | 340 | .235 |  | Survived | do. | do. | Do.
64 | 305 | .250 | 25 minutes | 4 hours 40 minutes | do. | do. | Female.

SERIES A.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
41 | 700 | 0.130 | 2 hours 15 minutes
49 | 370 | .135 | 2 hours
47 | 550 | .127 | 1 hour
50 | 290 | .138 | 2 hours
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
41 | 22 hours | Oats | April | Male.
49 | Survived | do. | do. | Do.
47 | do. | do. | March | Female.
50 | do. | do. | April | Do.
SERIES B.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
51 | 415 | 0.144 | None
52 | 450 | .155 | do.
53 | 490 | .163 | do.
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
51 | Survived | Oats | October | Female.
52 | do. | do. | do. | Male.
53 | do. | do. | do. | Do.
SERIES C.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
59 | 375 | 0.200 | 15 minutes
58 | 380 | .200 | 10 minutes
56 | 440 | .200 | 15 minutes
55 | 690 | .188 | 1 hour
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
59 | Survived | Oats | October | Gray and white.
58 | do. | do. | do.
SERIES D.
56 | 14 days | do. | do. | Male.
55 | 3 hours 30 minutes | do. | do. | Do.
SERIES D.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
67 | 330 | 0.240 | 5 minutes
63 | 340 | .235 |
64 | 305 | .250 | 25 minutes
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
67 | 30 minutes | Oats | October | Male.
63 | Survived | do. | do. | Do.
64 | 4 hours 40 minutes | do. | do. | Female.

Таблица 8. — Кофеин через рот; морские свинки.

SERIES A.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in
| Grams. | Mg. |
129 | 855 | 0.280 | 40 minutes
130 | 800 | .300 | 30 minutes
131 | 860 | .280 | 20 minutes
135 | 955 | .150 | 1 hour 50 minutes
134 | 740 | .160 | 3 hours
¹137 | 925 | .150 | 50 minutes
¹136 | 1,000 | .150 | do.
126 | 980 | .200 | 20 minutes
127 | 760 | .200 | 1 hour
128 | 1,075 | .200 | 3 hours
Number of pig. | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
129 | Less than 8 hours | Hay and oats | June | Male.
130 | Less than 18 hours | do. | do. | Do.
131 | do. | do. | do. | Do.
135 | 6 days | do. | do. | Do.
134 | 4 days | do. | do. | Do.
¹137 | 6 days | do. | do. | Do.
¹136 | Survived | do. | do. | Do.
126 | 27 hours | do. | do. | Do.
127 | 28 hours | do. | do. | Do.
128 | 7 hours | do. | do. | Do.

1 Подкожная инъекция для сравнения.

SERIES A.
Number of pig. | Weight. | Caffein per kilo | Appearance of symptoms in | Duration of life. | Diet. | Month. | Remarks.
| Grams. | Mg. |  |  |  |  |
129 | 855 | 0.280 | 40 minutes | Less than 8 hours | Hay and oats | June | Male.
130 | 800 | .300 | 30 minutes | Less than 18 hours | do. | do. | Do.
131 | 860 | .280 | 20 minutes | do. | do. | do. | Do.
135 | 955 | .150 | 1 hour 50 minutes | 6 days | do. | do. | Do.
134 | 740 | .160 | 3 hours | 4 days | do. | do. | Do.
¹137 | 925 | .150 | 50 minutes | 6 days | do. | do. | Do.
¹136 | 1,000 | .150 | do. | Survived | do. | do. | Do.
126 | 980 | .200 | 20 minutes | 27 hours | do. | do. | Do.
127 | 760 | .200 | 1 hour | 28 hours | do. | do. | Do.
128 | 1,075 | .200 | 3 hours | 7 hours | do. | do. | Do.

1 Подкожная инъекция для сравнения.

РЕЗЮМЕ.

Обзор результатов, полученных в экспериментах на морских свинках, показывает, что способ введения кофеина оказывает лишь незначительное влияние на его токсичность. При тщательном анализе можно заметить, что скорость всасывания после введения кофеина через рот, подкожно или внутрибрюшинно примерно одинакова по времени появления симптомов. Сохранение симптомов интоксикации кофеином, наблюдаемое в этих экспериментах в течение 24 часов после введения, указывает на медленное выведение, что и следовало ожидать, учитывая тот факт, что морские свинки выделяли мало мочи, а кофеин не является диуретиком для этих животных. Длительное присутствие кофеина в организме, вероятно, оказывает вредное влияние или последствие, что может объяснить отсроченную смерть некоторых животных спустя много дней после того, как была дана однократная доза кофеина. Среди факторов, которые, несомненно, влияют на токсичность, следует учитывать сезон, в то время как наличие болезненного состояния, несомненно, имеет тенденцию снижать устойчивость морской свинки к кофеину. Диета не оказывала никакого влияния на токсичность однократной дозы кофеина.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА КОШКАХ.

Эти эксперименты проводились на хорошо откормленных животных, которые находились под наблюдением в течение нескольких дней до проведения тестов с кофеином. Диета состояла исключительно из мяса. В некоторых случаях моча проверялась на наличие белка и сахара перед введением кофеина. Тесты с кофеином не проводились, если обнаруживались большие количества белка. Можно заметить, что сахар никогда не обнаруживался у кошек до введения кофеина, но значительные его количества были обнаружены в некоторых случаях после того, как он был дан. Были проведены исследования с использованием различных способов введения: подкожной инъекции, внутрибрюшинно или через рот. Внимание также было направлено на устойчивость к кофеину у молодых кошек, с этой целью было проведено несколько экспериментов на котятах.

ПОДКОЖНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Рост заявил, что кофеин выводится с мочой в неизмененном виде после его введения в организм и что обнаруженные количества варьируются у разных видов животных. У кролика количество выведенного вещества составляло около 21 процента; у собаки около 8 процентов; а у кошки несколько менее 2,5 процентов. По-видимому, следовательно, кошка разлагает кофеин более легко, чем кролик или собака; ее устойчивость, следовательно, должна быть выше, чем у других животных. В соответствии с этим в предварительных экспериментах (серия A) использовались умеренно большие дозы, но полученные результаты, как показано в протоколах, показали, что кофеин столь же токсичен для кошки, как и для кролика или собаки. Затем дозы были уменьшены, и были проведены эксперименты с целью установления минимальной токсической, а также минимальной летальной дозы.

Серия A.

В этих экспериментах вводилось три дециграмма кофеина на килограмм. Результаты показаны в следующих протоколах:

Cat 4. Black and white. Weight, 1,440 grams.

26 мая: 10:05, 22 куб. см 2-процентного кофеина (0,3 грамма на килограмм) введено подкожно; 11:10, обильное слюноотделение, кошка раздражительна, присутствует мышечная скованность, но столбняка нет; 11:45, кошка беспокойна, судороги, приступы кратковременные, паралича после судорог не наблюдалось, зрачки расширены; 16:45, кошка спокойна, присутствует легкий паралич.

27 мая: Кошка истощена.

28 мая: Найдена мертвой.

Cat 5. Black and white male. Weight, 1,396 grams.

3 июня: 10:00, 21 куб. см 2-процентного кофеина (0,3 грамма на килограмм) введено подкожно; 12:00, найдена мертвой.

Хотя наблюдалась значительная разница в продолжительности жизни после инъекции одной и той же дозы кофеина на килограмм, конечный исход был одинаковым, так как обе кошки погибли от воздействия препарата. Одна погибла в течение 2 часов, а другая прожила более 30 часов после его введения. Три дециграмма кофеина на килограмм, следовательно, безусловно летально для этих животных. Тесты, проведенные с меньшими дозами, показаны в следующих экспериментах:

Серия B.

В этих экспериментах применялись дозы в диапазоне от 0,20 до 0,25 грамма кофеина на килограмм массы тела.

Cat 3. Black and white female. Weight, 2,854 grams. Well fed.

June 4: 10.30 a. m., 35 cc 2 per cent caffein (0.25 gram per kilo) injected subcutaneously; 11 a. m., found dead.

Cat 6. Black and white. Weight, 1,645 grams.

3 июня: в 15:00 подкожно введено 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,243 грамма на килограмм); через несколько минут кошка стала очень раздражительной; около 16:00 рефлексы заметно усилились; 17:00, у кошки паралич.

4 июня: кошка найдена мертвой.

Cat 8. Weight, 1,735 grams.

7 октября: 16:00, подкожно в область спины введено 22 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,25 грамма на килограмм); 16:30, кошка раздражительна, обильное слюнотечение, судороги; умерла в 17:30; после введения кофеина мочеиспускания не было.

Cat 9. Weight, 1,960 grams.

7 октября: 15:45, подкожно в область спины введено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,25 грамма на килограмм); 16:45, кошка очень раздражительна, повторяющиеся приступы судорог, обильное слюнотечение; умерла в 17:30; после инъекции кофеина кошка не мочилась.

Cat 12. Striped kitten. Weight, 1,185 grams.

9 октября: моча исследована, альбумина и сахара нет; 13:45, введено 12 см³ 2-процентного раствора кофеина; 17:00, кошка жива, симптомов, кроме слюнотечения и общей раздражительности, нет.

10 октября: 10:30, найдена мертвой. Собрано около 15 см³ мочи, но анализ не проводился.

Cat 14. Black. Weight, 1,855 grams.

8 октября: 13:40, 18,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); 15:00, кошка стала беспокойной примерно через 10 минут после инъекции кофеина; постоянно кричала и передвигалась по клетке, судорог не было, кошка помочилась (около 15 см³) и испражнилась.

9 октября: 9:00, кошка найдена мертвой в клетке. Моча дала очень сильное восстановление реактива Фелинга (гораздо больше, чем моча кроликов); анализ 20 см³ мочи показал содержание сахара 4,65 процента. Вскрытие: легкие сильно полнокровны; печень — выраженная жировая инфильтрация и дегенерация; селезенка в норме; почки бледные и анемичные; кишечник в норме; желудок в норме.

Cat 15. Striped. Weight, 2,145 grams.

8 октября: 14:00, подкожно введено 22 см³ (0,2 грамма на килограмм) 2-процентного раствора кофеина; 14:30, кошка раздражительна, беспокойна, пытается выбраться из клетки, постоянно кричит; 14:40, судороги продолжительностью около двух минут, затем кошка поднялась и попыталась выбраться из клетки, слюнотечения нет, кошка помочилась (около 10 см³) и испражнилась.

9 октября: 9:00, кошка найдена мертвой в клетке, около 10 см³ мочи содержали огромное количество сахара. Вскрытие: легкие сильно полнокровны; печень с выраженной жировой дегенерацией; селезенка в норме; почки слегка бледные и анемичные; кишечник умеренно полнокровен; желудок в норме.

Cat 19. White. Weight, 1,100 grams.

20 октября: 13 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,236 грамма на килограмм). Примерно через 15 минут кошка стала раздражительной, рефлексы усилились, постоянный крик, скованность конечностей, диарея; 16:30, скованность мышц, координация сильно нарушена, ходила с большим трудом; 16:30, новых симптомов нет, постоянный крик продолжается.

21 октября: найдена мертвой.

Cat 20. White kitten. Weight, 790 grams.

20 октября: 11:35, подкожно введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,25 грамма на килограмм); 12:00, судороги, сменившиеся параличом; 13:30, еще дышит, по-видимому, в коматозном состоянии, лежит на боку, одышка, обильное слюнотечение; 16:00, судороги и смерть.

Результаты экспериментов серии B показывают, что даже доза 0,2 грамма кофеина на килограмм является очень токсичной для кошек. У одного животного симптомы появились через 40 минут после инъекции кофеина. Некоторые из них были найдены мертвыми через 18 часов после инъекции, что означает, что продолжительность жизни была, вероятно, гораздо меньше, так как имелись признаки того, что они были мертвы уже некоторое время. Смерть наступала довольно быстро после введения больших доз. Кошка № 3 умерла через 30 минут после получения кофеина. Поэтому количества, использованные в этих экспериментах, нельзя считать минимальными летальными дозами. Затем были опробованы меньшие дозы, как показано в экспериментах следующей серии.

Серия C.

Эксперименты были проведены на пяти кошках, которые получили от 140 до 155 мг на килограмм, следующим образом:

Cat 24. Striped. Weight, 1,300 grams.

25 октября: 10:00, 50 см³ мочи, умеренное количество альбумина — сахара нет; 12:00, подкожно введено 10 см³ кофеина; 12:30, раздражительность, постоянный крик, отсутствие аппетита; 16:00, судорог нет, но постоянный крик.

27 октября: кошка все еще была жива.

Cat 17. Weight, 2,620 grams.

12 октября: 9:30, собрано 65 см³ мочи; присутствует более чем следовое количество альбумина, восстановления реактива Фелинга нет; 15:00, подкожно введено 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (150 мг на килограмм); 15:15, раздражительность и беспокойство.

13 октября: 9:00, собрано около 15 см³ мочи, восстановление реактива Фелинга выраженное; проба с озазоном также положительная.

Cat 23. Black and white. Weight, 1,645 grams.

October 25: 10 a. m., 140 cc urine collected (since October 23), small amount of albumin present, no sugar.

27 октября: 9:00, альбумина нет; в моче сахара нет; 11:50, подкожно введено 12,5 см³ кофеина (0,15 грамма на килограмм); 13:00, судороги и смерть.

Cat 7. Striped kitten. Weight, 1,285 grams.

11 октября: собрана моча, альбумина и сахара нет; 9:50, подкожно в область спины введено 10 см³ 2-процентного раствора кофеина; 10:10, сильные судороги продолжительностью около 30 секунд; 10:20, судороги меньшей продолжительности; 10:30, судороги; 10:35, судороги продолжительностью несколько секунд; моча, выделенная около 10:20, содержала умеренное количество альбумина, но восстановления реактива Фелинга не было; 10:45, обильное слюнотечение и паралич; умерла около 10:50.

Cat 39. Yellow. Weight, 2,285 grams.

13 апреля: 14:40, подкожно в область спины введено 16 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,14 грамма на килограмм); 15:45, кошка умерла.

Из пяти экспериментов этой серии три закончились смертью после введения доз 140, 150 и 155 мг на килограмм. У двух других наблюдались симптомы токсичности, но они выжили после дозы 150 мг на килограмм, что указывает на то, что минимальная летальная доза, вероятно, была достигнута. Чтобы проверить это предположение, были введены меньшие дозы, как показано в следующих экспериментах.

Серия D.

Для этой серии экспериментов было использовано десять кошек, а вводимые дозы варьировались от 103 до 139 мг на килограмм. Результаты, представленные в прилагаемой таблице (стр. 58), показывают, что около 120–140 мг кофеина на килограмм могут в некоторых случаях вызывать легкие симптомы. Таким образом, можно с уверенностью сделать вывод, что 150 мг на килограмм является приблизительно минимальной летальной дозой для кошки при подкожном введении препарата. Однако то, что меньшие дозы отнюдь не всегда следует считать безопасными, показано в следующих экспериментах.

Серия E.

Cat 43. Weight, 3,225 grams.[D]

14 сентября: 10:20, в область спины введено 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,124 грамма на килограмм); 11:00, столбняк и смерть. Вскрытие: легкие полнокровны; печень полнокровна, с геморрагическими пятнами в капсулах и жировой дегенерацией; почки слегка полнокровны; остальные органы в норме.

Cat 48. Black female. Weight, 3,050 grams.

14 сентября: подкожно в область спины введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,118 грамма на килограмм); 10:30, сильные судороги и смерть. Вскрытие: легкие полнокровны, местами с многочисленными петехиями; печень полнокровна; селезенка полнокровна; остальные органы в норме.

Пониженная устойчивость к кофеину у кошек № 43 и № 48 может быть обусловлена патологическими изменениями, обнаруженными при вскрытии, поскольку имеются доказательства того, что токсичность лекарственных средств может значительно изменяться при патологических состояниях. Хант (40) показал, что устойчивость к ацетонитрилу значительно снижается при хроническом алкоголизме. По-видимому, это справедливо и для других лекарственных средств в аномальных условиях. При отравлении свинцом для достижения тех же результатов требуются меньшие дозы атропина (78), чем в нормальных условиях. Следующий эксперимент представляет интерес в этой связи, так как в данном случае гораздо меньшая доза, чем та, что была введена в экспериментах № 43 и № 48, вызвала типичные симптомы отравления кофеином и оказалась смертельной.

Cat 47, black and white male. Weight, 4,220 grams.

15 сентября: подкожно введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,084 грамма на килограмм); в течение примерно шести часов симптомов не наблюдалось.

16 сентября: симптомов нет.

17 сентября: масса 4250 граммов; введено 18 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,084 грамма на килограмм); через два часа столбняк и смерть. Вскрытие: тяжелая геморрагическая пневмония; почки бледные, остальные органы в норме.

Поскольку два контрольных животных выжили после введения той же дозы в пропорции к массе тела без каких-либо симптомов, оправдано предположение, что пониженная устойчивость к кофеину была обусловлена наличием пневмонии, что дает дополнительное подтверждение мнению о том, что токсичность кофеина может возрастать при заболевании.

ВВЕДЕНИЕ В БРЮШНУЮ ПОЛОСТЬ.

Эти эксперименты проводились на взрослых и молодых особях. Как и в предыдущих экспериментах, применялись дозы различных размеров. Сначала была опробована доза 0,2 грамма на килограмм, а затем постепенно снижена до 0,1 грамма на килограмм.

Cat 10. Female. Weight, 2,970 grams.

9 октября 1909 г.: 13:30, в брюшную полость введено 30 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм); моча исследована на альбумин и сахар, результат отрицательный; кошка найдена мертвой в 14:30. В мочевом пузыре мочи нет.

Cat 16. Black female. Weight, 2,420 grams.

9 октября 1910 г.: моча исследована на альбумин и сахар, результат отрицательный; 14:30, в брюшную полость введено 22 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,183 грамма на килограмм); найдена мертвой в 15:00.

Cat 99. Well-fed gray female. Weight, 3 kilos.

22 июня 1911 г.: 15:40, в брюшную полость введено 15 см³ 2-процентного раствора кофеина; слюнотечение и выраженная раздражительность в течение одного часа после инъекции.

24 июня: жива, аппетит хороший.

Cat 98. Well-fed black male. Weight, 4,100 grams.

22 июня: 15:45, в брюшную полость введено 20,5 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,1 грамма на килограмм); очень раздражительна через несколько минут после инъекции, других симптомов нет.

24 июня: симптомов нет, аппетит хороший.

Cat 93. Black and white. Weight, 1,450 grams.

22 июня: 15:00, в брюшную полость введено 30 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,137 грамма на килограмм); слюнотечение, других симптомов нет; под наблюдением до 18:00.

23 июня: 9:00, мочи нет, у кошки симптомов не наблюдалось.

24 июня: 9:00, симптомов нет, принимала пищу как обычно.

Cat 87. Well-fed white female. Weight, 2,615 grams.

23 июня: 14:45, в брюшную полость введено 19 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,145 грамма на килограмм); стала раздражительной и беспокойной.

24 июня: 9:00, симптомов нет, принимала пищу как обычно.

Cat 97. Gray. Age, 3 months. Weight, 500 grams. Diet, meat.

June 24: 2.25 p. m., 5 cc 2 per cent caffein (0.2 gram per kilo) injected into peritoneal cavity; 4 p. m., no symptoms.

29 июня: умерла.

Cat 96. Gray and white. Age, 3 months. Weight, 575 grams. Diet, meat.

24 июня: 14:20, в брюшную полость введено 4 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,139 грамма на килограмм); 15:55, симптомов нет.

30 июня: умерла.

Cat 95. Black. Age, about 3 months. Weight, 860 grams. Diet, meat.

24 июня: 10:15, в брюшную полость введено 8,6 см³ 2-процентного раствора кофеина, слюнотечение сразу после инъекции; 10:25, судороги и паралич; умерла в 10:45. Вскрытие: макроскопическое исследование органов отрицательное.

Cat 94. Black and white. Weight, 790 grams. Age, about 3 months. Diet, meat.

24 июня: 10:00, в брюшную полость введено 8 см³ 2-процентного раствора кофеина; 16:00, под постоянным наблюдением с момента инъекции, кошка очень раздражительна, дыхание чаще нормы, диарея.

Изучение приведенных выше протоколов показывает, что доза 2 дециграмма на килограмм была смертельной в течение одного часа для одной кошки, а несколько меньшая доза убила другую особь за 30 минут. Количества менее 0,15 грамма на килограмм были достаточны лишь для вызова легких симптомов, таких как повышенная раздражительность и слюнотечение, которые исчезали в течение нескольких часов. Ни в одном случае эффекты не были заметны на следующий день. Эксперименты на молодых котятах особенно интересны, так как они, вопреки ожиданиям, оказались значительно более устойчивыми, чем взрослые особи. Смерть № 97 и № 96 через пять и шесть дней соответственно нельзя приписать кофеину, так как некоторые контрольные животные также умерли. Более того, следует отметить, что у трех из четырех молодых котят не появилось никаких симптомов после введения дозы, которая была быстро смертельной для взрослых кошек. Быстрая смерть № 95 после той же дозы является исключением, которое невозможно объяснить, так как макроскопическое исследование при вскрытии дало отрицательный результат.

ВВЕДЕНИЕ ЧЕРЕЗ РОТ.

Сначала давали два дециграмма на килограмм, но было установлено, что это количество безусловно смертельно. Поэтому дозу снизили до 0,125 грамма на килограмм. Во всех этих экспериментах кофеин вводили с помощью мягкого резинового катетера, надетого на носик воронки, которая служила желудочным зондом. Во всех этих тестах использовался 2-процентный водный раствор, за исключением одного случая, когда кофеин давали в смеси с пищей.

Cat 92. Black and white female. Weight, 1,750 grams.

10 июня: 12:05, через рот введено 14 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,16 грамма на килограмм); кошка была спокойна, когда ее привязали к держателю, сопротивлялась лишь немного, когда трубку вводили в желудок; 12:30, кошку вырвало, других симптомов нет.

13 июня: состояние хорошее, аппетит хороший.

Cat 87. White female. Weight, 2,620 grams. Diet, meat.

5 июня: 14:15, через рот с помощью желудочного зонда введено 20 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,15 грамма на килограмм); 14:30, кошка раздражительна, но других симптомов нет; 17:00, состояние примерно такое же, за исключением того, что она стала более раздражительной и проявилась некоторая скованность конечностей.

13 июня: жива и в хорошем состоянии, аппетит хороший, не раздражительна.

Cat 91. White female. Weight, 3,050 grams.

10 июня: 12:00, через рот введено 23 см³ (0,15 грамма на килограмм) 2-процентного раствора кофеина, кошка яростно сопротивлялась; 13:30, слюнотечение; 13:40, судороги; умерла в 14:00. Вскрытие: полнокровие легких, печени и селезенки; сосуды сердца инъецированы; остальные органы в норме.

Cat 88. Black and white female. Weight, 3,260 grams. Diet, meat.

5 июня: 14:20, через рот введено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,15 грамма на килограмм); 14:45, кошка раздражительна, других симптомов нет (кошку не рвало после введения кофеина); 16:00, кошка найдена мертвой. Вскрытие: печень очень сильно полнокровна; сердце сокращено; тело во время вскрытия было еще теплым.

Cat 90. White and yellow female. Weight, 2,685 grams. Diet, meat.

5 июня: 15:15, через рот с помощью желудочного зонда введено 27 см³ 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм), примерно через полчаса кошка стала раздражительной и началось слюнотечение; в 16:30 слюнотечение стало более выраженным, хорошо развилась одышка, кошка была довольно беспокойна и наблюдалась дрожь; 17:00, короткие спазмы задних конечностей, но большую часть времени лежала спокойно в клетке; 17:20, судороги короткой продолжительности и смерть, мышечное расслабление наступило сразу после судорог, рвоты не было, после введения кофеина наблюдалась диарея, кошка выделила около 10 см³ мочи.

6 июня: 9:00, найдена мертвой.

Cat 89. White and black female. Weight, 2,860 grams. Diet, meat.

5 июня: 15:15, через рот с помощью желудочного зонда введено 28,6 см³ (0,2 грамма на килограмм) 2-процентного раствора кофеина, рвоты не наблюдалось, как и других симптомов; 15:30, найдена мертвой. Вскрытие: органы в норме; печень полнокровна.

Cat 82. Gray female. March 3, weight 2,450 grams; June 6, weight 2,750 grams. Diet, 150 grams of meat daily.

7 июня: дано 0,4125 грамма кофеина в 150 граммах мяса, не ела.

8 июня: дано 0,4125 грамма кофеина в 150 граммах мяса, отказалась есть.

9 июня: дано 150 граммов мяса без кофеина, съела все.

10 июня: пища не давалась.

11 июня: пища не давалась.

12 июня: дано 0,4125 грамма кофеина в 150 граммах мяса (150 мг на килограмм), съела все.

13 июня: найдена мертвой. Вскрытие: легкие полнокровны, печень полнокровна; остальные органы, по-видимому, в норме.

Cat 100. Gray female. Weight, 2,740 grams. Diet, meat.

17 июля: 15:00, через рот с помощью желудочного зонда введено 17 см³ 2-процентного раствора кофеина (124 мг на килограмм) в 15:20; 17:00, очень раздражительна, но других симптомов нет.

18 июля: под наблюдением весь день, симптомов нет.

Cat 93. Black and white female. Weight, 1,640 grams.

July 17: 3.30 p. m., 10 cc (0.125 gram per kilo) of 2 per cent caffein given by mouth through stomach tube.

18 июля: под наблюдением весь день, симптомов нет.

Из результатов экспериментов этой серии следует, что 0,15 грамма кофеина на килограмм могут быть смертельными в течение нескольких часов после введения, даже если препарат смешан с умеренным количеством мяса. Эксперименты 87 и 92 показывают, однако, что это количество может переноситься некоторыми особями без каких-либо серьезных последствий, так как кошки находились под наблюдением некоторое время после получения кофеина, и никаких неблагоприятных симптомов ни у одной из них за это время не было замечено. Можно отметить, что кошку № 92 вырвало вскоре после получения кофеина. Поэтому практически достоверно, что такое количество кофеина в пропорции к массе животного в подавляющем большинстве случаев окажется смертельным, а возможно, в меньшем проценте случаев оно безусловно токсично, если не избежит всасывания. Меньшие дозы могут вызывать раздражительность у некоторых особей, но симптомы, относящиеся к нервным симптомам мышц, отсутствовали, как в экспериментах № 93 и № 100. Таким образом, минимальная летальная доза кофеина для кошки при введении через рот составляет 0,15 грамма на килограмм.

Таблица 9. — Подкожная инъекция; кошки.

SERIES A.
Number. | Weight. | Caffein per kilo | Symptoms. | Duration of life.
| Grams. | Gram. |  |
4 | 1,440 | 0.30  | 65 minutes | Over 29 hours.
5 | 1,396 | .30  |  | About 2 hours.
SERIES B.
3 | 2,854 | 0.25  |  | 30 minutes.
6 | 1,645 | .243 | Few minutes | 1 hour 30 minutes.
8 | 1,735 | .25  | 30 minutes. | 1 hour.
9 | 1,960 | .25  | 1 hour | 1 hour 45 minutes.
12 | 1,185 | .20  | 3 hours | Less than 18 hours.
14 | 1,855 | .20  | 1 hour 20 minutes | Do.
15 | 2,145 | .20  | 40 minutes. | Do.
19 | 1,100 | .236 | 15 minutes | Do.
20 | 790 | .25  |  | 4 hours 30 minutes.
SERIES C.
24 | 1,300 | 0.153 | 1 hour | Survived.
17 | 2,620 | .15  | 15 minutes | Do.
23 | 1,645 | .15  |  | 1 hour 10 minutes.
7 | 1,285 | .155 | 20 minutes | 1 hour.
9 | 2,285 | .14  |  | 65 minutes.
SERIES D.
13 | 730 | 0.139 | Restlessness |
21 | 1,165 | .138 | None |
25 | 965 | .103 | do. |
26 | 1,605 | .125 | do. |
27 | 1,625 | .125 | do. |
28 | 2,335 | .128 | do. | Received 2 doses: survived.
40 | 2,710 | .129 | do. | Do.
41 | 1,785 | .123 | do. | Do.
42 | 2,315 | .112 | do. | Do.
38 | 2,325 | .120 | Mild | Died after second dose.
SERIES E.
43 | 3,225 | 0.124 |  | 40 minutes.
48 | 3,050 | .118 |  | Died soon after.
47 | 4,220 | .084 |  | Survived.
²47 | 4,250 | .084 |  | 2 hours.

1 Патологические состояния. 2 Через два дня после первой инъекции.

Таблица 10. — Инъекции в брюшную полость; кошки.

SERIES A.
Number. | Weight. | Caffein per kilo | Symptoms. | Duration of life.
| Grams. | Gram. |  |
99 | 3,000 | 0.100 | Mild | Survived.
98 | 4,100 | .100 | do.¹ | Do.
93 | 1,450 | .137 | Very mild | Do.
87 | 2,615 | .145 | do. | Do.
97 | 505 | .200 | None | 5 days.
96 | 575 | .139 | do. | 6 days.
95 | 860 | .200 | 15 minutes | 30 minutes.
94 | 790 | .200 | Diarrhea | Survived.
10 | 2,970 | .200 |  | 1 hour.
16 | 2,420 | .183 |  | 30 minutes.

1 Через несколько минут.

Таблица 11. — Введение кофеина через рот; кошки.

SERIES A.
Number. | Weight. | Caffein per kilo | Symptoms. | Duration of life.
| Grams. | Gram. |  |
91 | 3,050 | 0.15  | 1 hour 40 minutes | 2 hours.
88 | 3,260 | .15  |  | 1 hour 40 minutes.
92 | 1,750 | .16  | 25 minutes | Survived.
87 | 2,620 | .15  | 3 hours | Do.
90 | 2,685 | .20  | 1 hour 15 minutes | Less than 18 hours.
89 | 2,860 | .20  |  | 75 minutes.
82 | 2,450 | .15  |  | Less than 24 hours.
100 | 2,740 | .124 | 1 hour 40 minutes | Survived.
93 | 1,640 | .125 |  | Do.

РЕЗЮМЕ.

Токсичность кофеина для кошек одинакова как при введении через рот, так и при подкожной инъекции, при этом минимальные летальные дозы в обоих случаях составляют 0,15 грамма на килограмм. При введении внутрибрюшинным путем кофеин, напротив, значительно менее токсичен. После введения 0,137 и 0,145 грамма кофеина на килограмм (№ 93 и № 87) слюнотечение у одной кошки (№ 93) и раздражительность и мышечная скованность у другой были единственными замеченными эффектами. Эти симптомы на следующий день уже не наблюдались, и кошки выглядели совершенно нормальными. Эксперименты с большими дозами показывают, что минимальная летальная доза при этом методе введения составляет около 0,2 грамма на килограмм.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА СОБАКАХ.

Эксперименты проводились на хорошо питающихся взрослых собаках и на щенках, которые некоторое время находились под наблюдением до введения препарата. Для этих тестов использовались только те животные, которые не проявляли признаков аномалий. Кофеин давали через рот в смеси с 10–20 граммами мяса или подкожно в 2-процентном водном растворе. Молодые животные получали кофеин, растворенный в молоке. Определение минимальных токсических или летальных доз при кормлении препаратом представляло значительную трудность, так как во многих случаях за приемом препарата следовала рвота.

ВВЕДЕНИЕ ЧЕРЕЗ РОТ.

Серия A.

Эффективная доза в этих экспериментах демонстрировала значительную вариативность. Одна собака (№ 38) умерла после дозы 0,12 грамма кофеина на килограмм, в то время как некоторые особи выжили после доз 0,2 и 0,23 грамма на килограмм. В 12 экспериментах, приведенных в таблице 12 на стр. 62, можно заметить, что от 0,12 до 0,152 грамма на килограмм оказались смертельными для трех собак, тогда как три другие выжили после тех же количеств в пропорции к массе тела. Результаты были такими же и при больших дозах. В этой связи можно отметить, что из пяти собак, у которых рвота наблюдалась в течение 24 часов после введения кофеина, четыре выжили, за исключением № 38. Большая токсичность кофеина в этом случае, по всей вероятности, обусловлена каким-то болезненным процессом, наличие которого указывалось высокой температурой у этой особи.

То, что рвота может предотвратить летальный исход после больших доз кофеина, становится еще более вероятным благодаря эксперименту на собаке № 48, для которой при отсутствии рвоты доза 0,2 грамма кофеина на килограмм оказалась смертельной. На этом основании расхождение в результатах, полученных в этой серии, может быть легко объяснено. Наименьшие дозы, которые оказались смертельными в этих экспериментах, составляли 0,145 и 0,152 грамма на килограмм. № 38, которая умерла от дозы 0,12 грамма на килограмм, можно считать исключением, так как эта особь не была нормальной. Эксперименты с кофеином на собаках проводились в этой лаборатории и в другое время, но не показали, что меньшие дозы кофеина, даже если рвота не возникала после его введения, были смертельными, хотя наблюдались токсические эффекты. Таким образом, оправдан вывод, что минимальная летальная доза кофеина для нормальной собаки составляет около 0,15 грамма на килограмм при введении через рот.

ПОДКОЖНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Серия B.

Для более точного определения токсичности кофеина, особенно для сравнения с животными других видов, также использовался метод подкожного введения. Инъекции производились шприцем емкостью 20 см³, содержимое которого вводилось в смежные области. Результаты экспериментов на шести собаках показывают, что приблизительно 150–160 мг на килограмм является минимальной летальной дозой, поскольку такие дозы оказались смертельными для двух из трех животных, получивших это количество, в то время как три другие, получившие дозы от 143 до 160 мг на килограмм, выжили.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА ЩЕНКАХ.

Серия C.

В этих экспериментах изучалась устойчивость молодых растущих щенков к кофеину. Кофеин давали через рот всем особям, кроме одной, которой его вводили подкожно. Протоколы, лишь некоторые из которых приведены, и табличные данные экспериментов (стр. 62) показывают, что возраст животного оказывает решающее влияние на токсичность кофеина.

Dog 11. Weight, 1,260 grams.

2 августа: в 10:00 через желудочный зонд введено 12,5 см³ 2-процентного раствора кофеина; 14:00, судороги, диарея, слюнотечение и скованность конечностей.

3 августа: найдена мертвой в 9:00. Вскрытие: грудные внутренности, по-видимому, в норме; желудок чрезвычайно растянут и заполнен белой творожистой массой и некоторой жидкостью; в желудке и тонкой кишке много аскарид; слизистая оболочка всего кишечника полнокровна; содержимое нижнего отдела кишечника полнокровно; печень бледная; селезенка дряблая; почки полнокровны.

Dog 10. Weight, 1,650 grams.

26 июля: 9:30, 29 см³ 2-процентного раствора кофеина добавлено к 60 см³ молока, предложено, но собака отказалась, поэтому введено через рот с помощью желудочного зонда; 10:25, симптомов нет; 11:30, беспокойство, конечности скованы, задние конечности расставлены, собака демонстрирует хорошо выраженные симптомы отравления кофеином; 12:10, симптомы более тяжелые, конечности вытянуты и расставлены, лежит плашмя на животе так, что нос касается пола клетки; 12:40, найдена мертвой; в 12:10 была жива. Вскрытие: легкие показали геморрагические очаги во всех долях; сердце, по-видимому, в норме; печень жирная; желудок и кишечник заполнены аскаридами; селезенка и почки, по-видимому, в норме.

Dog 9. Weight, 3,000 grams.

25 июля: 350 мг кофеина на килограмм; 17:00, большую часть времени лежит, иногда ходит по стойлу; присутствует беспокойство, но не выраженное; 17:30, на полу стойла замечена рвота, выглядящая пенистой и слизистой; кусочков мяса в рвотных массах не замечено, хотя их искали; иногда скулит.

26 июля: 9:00, выглядит хорошо; никаких признаков воздействия кофеина, данного накануне.

Dog 8. Yellow female. Weight, 3,100 grams.

22 июля: 10:50, получила 1,1 грамма кофеина в 10 граммах мяса (354 мг кофеина на килограмм); 15:00, рвота слизью; походка неуклюжая; отказалась есть; постоянно пьет воду; очень беспокойна; 16:00, судороги начались в 15:55; тоническая ригидность задних конечностей; обильное слюнотечение; судороги были как тонического, так и клонического характера и напоминали те, что наблюдались у кроликов при отравлении кофеином; поразительной особенностью была продолжительность спазма, который начался в 15:55 и продолжался более двух часов.

23 июля: найдена мертвой в 9:00.

Данные, записанные в таблице и в протоколах экспериментов серии C, показывают, что четыре из семи подопытных животных умерли менее чем через 24 часа после кормления кофеином; трое из них получили 300–354 мг кофеина на килограмм, а один получил 200 мг кофеина на килограмм. № 8 вырвало через четыре часа после получения кофеина. У трех других собак рвоты не наблюдалось. Таким образом, от 0,300 до 0,350 грамма кофеина на килограмм можно считать безусловно смертельными для молодых растущих щенков. То, что это, по всей вероятности, минимальная летальная доза, следует из следующих экспериментов: № 9, которая получила 350 мг на килограмм, вырвало через час, и она выжила, что указывает на то, что часть препарата, вероятно, не всосалась. Количество, попавшее в кровоток, было, следовательно, меньше 350 мг на килограмм. Поскольку № 15, которая получила 250 мг кофеина подкожно, также выжила, вероятнее всего, 300–350 мг на килограмм были минимальными летальными дозами для этих животных. Более того, № 12, которая получила 200 мг кофеина на килограмм, выжила, рвоты не наблюдалось. Случай № 11, в котором такое же количество кофеина в пропорции к массе тела оказалось смертельным, может быть объяснен, возможно, результатами вскрытия.

Результаты, полученные в этих экспериментах, оправдывают вывод, что молодые растущие собаки могут переносить большие дозы кофеина, чем взрослые и более старые собаки.

Здесь также можно обратить внимание на разницу в симптомах, вызываемых кофеином у очень молодых и у взрослых собак. В этих экспериментах часто замечалось, что симптомы у взрослых особей при получении токсических доз кофеина возникали довольно внезапно и заканчивались мгновенной смертью. Мы не наблюдали этого явления после введения больших количеств кофеина очень молодым собакам, у которых наблюдались тонические и клонические судороги, чередующиеся с парезами. Эти симптомы возникали довольно постепенно и длились несколько часов (см. эксперимент № 8), напоминая в этом отношении кролика.

РЕЗЮМЕ.

Токсичность кофеина для взрослых собак примерно одинакова, независимо от того, дается ли он через рот или вводится подкожно. Устойчивость щенков к кофеину намного выше, чем у взрослых.

Таблица 12. — Введение через рот; собаки. (Серия A.)

No. | Weight. | Caffein per kilo | Results. | Remarks.
| Kilos. | Gram. |  |
47 | 13.60 | 0.144 | Survived | Vomiting observed.
55 | 12.75 | .200 | do. | Stiffness of muscles; no other symptoms.
56 | 7.95 | .200 | Found dead next day |
52 | 13.60 | .147 | Survived |
57 | 6.50 | .230 | do. | Vomited after 1 hour; convulsions after 1 hour and 45minutes.
39 | 23.10 | .120 | do. | Increased frequency of respiration, thirst, loss of appetite, vomited rest of day when he drank water, salivation, restlessness, passed feces frequently.
48 | 11.50 | .174 | do. | Vomiting observed.
48 | 12.00 | .200 | Found dead next day | No vomiting observed. Second dose was given 8 days after first.
54 | 13.40 | .200 | Survived | Vomiting observed.
49 | 13.15 | .152 | Found dead next day |
38 | 14.50 | .120 | do. | Symptoms after 1½ hours: Dog had a temperature of 104° F. before caffein was given; vomited 3 hours after caffein was fed.
18 | 10.80 | .145 | do. |

Таблица 13. — Подкожная инъекция; собаки. (Серия B.)

No. | Weight. | Caffein per kilo | Results. | Remarks.
| Kilos. | Gram. |  |
62 | 9.30 | 0.161 | Survived | Restlessness and vomiting one-half hour after injection.
61A | 14.00 | .160 | Found dead next day |
63 | 12.00 | .150 | Survived | Restlessness 1 hour after injection.
64 | 14.00 | .150 | do. | Restlessness and thirst 45 minutes after injection.
59 | 7.20 | .160 | Died 1 hour and 20 minutes after injection. | Marked restlessness, but no convulsion.
61 | 14.60 | .143 | Survived | Symptoms observed in 1½ hours.

Таблица 14. — Введение через рот щенкам. (Серия C.)

No. | Weight. | Caffein per kilo. | Results. | Remarks.
| Kilos. | Gram. |  |
8 | 3.10 | 0.354 | Found dead next day | Vomited in 4 hours after feeding; restlessness, loss of appetite, thirst, incoordination of muscles, convulsions.
9 | 3.15 | .350 | Survived | Muscular incoordination and stiffness, restlessness, vomited 1 hour after caffein was given.
10 | 1.60 | .350 | Died in 3 hours | Convulsion; no vomiting.
11 | 1.26 | .200 | Found dead | Salivation; convulsions.
12 | 1.28 | .200 | Survived | No symptoms.
15 | 1.20 | .250 | do. | Subcutaneous injection.
16 | 3.50 | .300 | Died in 1 hour | Convulsions 45 minutes after caffein was fed.

ХРОНИЧЕСКАЯ ИНТОКСИКАЦИЯ КОФЕИНОМ.

Целью этого исследования было установить эффект повторного дозирования при ежедневном введении кофеина или через более длительные интервалы. Эксперименты проводились на кроликах и собаках. Как и в экспериментах по острой интоксикации, животные некоторое время находились под наблюдением в лаборатории до начала введения кофеина, чтобы установить наличие или отсутствие аномалий. Взаимосвязь диеты и токсичности получила некоторое внимание, но вопрос не был изучен исчерпывающе в настоящем исследовании.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА КРОЛИКАХ.

Использовались как взрослые, так и молодые кролики. Диета состояла либо из моркови, либо из овса; вода давалась ad libitum. Кролики содержались в металлических клетках в хорошо освещенном и проветриваемом помещении. Ненужного обращения или любой другой процедуры, ведущей к утомлению или вызывающей дискомфорт у животных, очень тщательно избегали, так как мы обнаружили, что такое обращение, вероятно, снижает устойчивость кролика к кофеину. Кофеин вводили путем кормления через рот и через желудочный зонд или подкожным методом. Во многих случаях его давали ежедневно, в некоторых — через более длительные интервалы.

Серия A.

Эксперименты этой серии сформировали предварительное исследование с целью проверки эффекта умеренных доз. Один дециграмм кофеина на килограмм давали ежедневно в течение нескольких дней; при введении через более длительные интервалы дозу увеличивали до 150–200 мг на килограмм. Было установлено, что меньшие дозы не вызывали никаких симптомов; даже масса животных не подвергалась влиянию. Дозы среднего размера, данные в течение двух последовательных дней, также были без какого-либо заметного эффекта (№ 182, 183, 123, 101). Когда третья доза такого размера давалась в течение 48 или 24 часов, она оказывалась смертельной (№ 123, 182 и 183). Исключительно, однако, умеренно большие дозы (для кроликов) могут даваться в течение трех последовательных дней без летального исхода, как у кролика № 101. При введении с интервалами в два-три дня большие дозы, как можно видеть из протоколов, могут вводиться без вызова острой смерти (№ 173, 181, 201).

Результаты тестов этой серии указывают на отсутствие какой-либо кумуляции и на возможное выведение умеренных доз кофеина и продуктов его распада в течение 24 часов или около того. Когда дозы больше, время его выведения, по-видимому, дольше, что показано тем фактом, что повторение дозы на следующий день может быть смертельным, но при допущении более длительного интервала он может вводиться без вызова смерти. Будет замечено, что только один кролик этой серии выжил, но он был крайне истощен. Это состояние наблюдалось в ряде случаев после того, как кофеин давался в течение нескольких дней. Даже когда препарат отменяли, животные продолжали терять массу. Это может быть объяснено состоянием желудочно-кишечного канала, обнаруженным при вскрытии. Наличие воспаления слизистой оболочки желудка и кишечника, с изъязвлением слизистой оболочки привратника у одного из кроликов (№ 173) серии, по всей вероятности, вызывало уменьшение или потерю аппетита, что само по себе вело бы к потере плоти и силы и, наконец, к смерти. Далее следуют протоколы экспериментов.

Кролик 173. Морковь давалась с 1 по 18 октября, а овес — в остальное время эксперимента.

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Oct. 9     | 1,980 | 0.141 |  | Oct. 16     | 2,005 | 0.220
Oct. 11 | 1,905 | .190 |  | Oct. 18 | 1,845 |
Oct. 13 | 1,930 | .207 |  | Oct. 20 | 1,740 | .230

21 октября: паралич задних конечностей.

22 октября: 9:00, найден мертвым.

Моча исследовалась до и после введения кофеина. После введения кофеина (5 доз за 11 дней) симптомов не наблюдалось, также не было найдено альбумина или сахара в моче после любого из экспериментов на этом кролике. Вскрытие: слизистая оболочка привратника обнаружила несколько язв; тонкий кишечник показал легкое воспаление; печень глубоко полнокровна; почки показали выраженное воспаление коры; остальные органы практически в норме.

Кролик 181. Диета: морковь с 29 сентября по 17 октября, затем овес.

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Oct. 4     | 1,425 | 0.105 |  | Oct. 11     | 1,370 | 0.175
Oct. 5 | 1,450 | .100 |  | Oct. 13 | 1,385 | .180
Oct. 6 | 1,270 | .100 |  | Oct. 16 | 1,345 | .200
Oct. 7 | 1,210 | .100 |  | Oct. 17 | 1,030 |
Oct. 8 | 1,375 | .130 |  | Oct. 18 | 1,230 |
Oct. 9 | 1,305 | .153 |  | Oct. 20 | 1,215 |

Кролик был заметно истощен и слаб. В результате кормления кофеином в моче не найдено альбумина или сахара.

Кролик 182. Диета из моркови с 29 сентября.

Получал кофеин подкожно следующим образом:

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Oct. 4     | 1,765 | 0.100 |  | Oct. 8     | 1,685 | .135
Oct. 5 | 1,880 | .100 |  | Oct. 9 |  | .150
Oct. 6 | 1,750 | .100 |  | Oct. 11 | 1,605 | .174
Oct. 7 | 1,710 | .100 |  |  |  |

12 октября: 11:00, через 23 часа после получения кофеина, судороги с выздоровлением; кролик умер в 13:30. Сахар не был найден в моче в любое время после введения кофеина. Альбумин присутствовал только в одном образце.

Кролик 183. Диета из моркови с 29 сентября.

Получал кофеин подкожно следующим образом:

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Oct. 4     | 1,385 | 0.100 |  | Oct. 8     | 1,310 | 0.153
Oct. 5 | 1,460 | .100 |  | Oct. 9 | 1,390 | .142
Oct. 6 | 1,385 | .100 |  | Oct. 11 | 1,390 | .187
Oct. 7 | 1,240 | .122 |

12 октября: 9:00, найден мертвым. Альбумин в моче не найден. Только один образец содержал сахар.

Кролик 123. Белый, самка. Диета: овес.

Получал кофеин подкожно следующим образом:

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Apr. 14 | 2,350 | 42 |  | Apr. 20 | 2,126 | 141
Apr. 16 | 2,250 | 90 |  | Apr. 21 | 1,965 | 152
Apr. 17 | 2,325 | 86 |  | Apr. 22 | 1,876 | 160

Кролик умер через 30 минут после последней инъекции кофеина. Вскрытие: желудок обнаружил выраженное воспаление слизистой. Легкий энтерит. Печень и почки были глубоко полнокровны и темного цвета.

Кролик № 101, белый самец. Диета: овес.

Получал кофеин подкожно следующим образом:

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Mar. 18     | 2,025 | 0.100 |  | Mar. 24     | 1,815 | .166
Mar. 19 | 1,970 | .100 |  | Mar. 25 | 1,830 | .185
Mar. 20 | 2,009 | .100 |  | Mar. 26 | 1,710 | .176
Mar. 22 | 1,855 | .100 |  | Mar. 29 | 1,734 | .219
Mar. 23 | 1,738 | .114 |  | Apr. 1 | 1,606 | .224

5 апреля: найден мертвым. Вскрытие: выраженное воспаление слизистой желудка. Значительный энтерит, затрагивающий всю протяженность кишечника; печень полнокровна и хрупка; почки глубоко полнокровны в корковом и мозговом слоях; селезенка полнокровна, но нормального размера; легкие и сердце в норме.

Четыре дня, 0,1 на килограмм; 10 доз за 14 дней.

Кролик 201. Диета из моркови начата 1 октября; 19 октября — овес.

Подкожные инъекции следующим образом:

Date. | Weight. | Caffein per kilo. |  | Date. | Weight. | Caffein per kilo.
| Grams. | Gram. |  |  | Grams. | Gram.
Oct. 9     | 1,000 | 0.150 |  | Oct. 16     | 1,065 | .225
Oct. 11 | 1,015 | .180 |  | Oct. 18 | 850 |
Oct. 13 | 1,065 | .187 |  | Oct. 20 | 890 | .111

Под наблюдением шесть часов 20 октября; симптомов нет.

23 октября: умер; был сильно истощен, но не показывал никаких симптомов; истощение началось, когда кофеин был отменен; моча никогда не содержала сахара или альбумина; симптомы наблюдались только после второй дозы.

Серия B.

Вопрос о том, является ли кофеин кумулятивным у кролика, предложенный в предыдущих экспериментах, был предметом дальнейшего исследования в Серии B. Кофеин давали через рот или подкожно. Морковь составляла исключительную диету, давалось измеренное количество. Кролики находились под наблюдением в течение двух недель, за исключением № 370 и № 373, записи о которых велись только в течение четырех дней до начала введения кофеина. Кофеин давали через рот в экспериментах Групп I и III. Кролики 292, 293 и 295 получали ежедневно 20 см³ воды через рот в течение четырех дней до введения кофеина, тогда как у кроликов Группы II лечение кофеином предварялось инъекцией 0,8-процентного солевого раствора подкожно. Целью в обоих случаях было установить, имеет ли метод введения кофеина какое-либо влияние на животное, но наблюдение, проводимое изо дня в день, не показало никакого эффекта такого лечения. Около 1 дециграмма кофеина на килограмм вводилось ежедневно, с периодическими перерывами. Позже в ходе эксперимента дозы увеличивались, 0,15 грамма на килограмм было максимальной дозой. Кролик 293 умер после третьей дозы с симптомами типичного отравления кофеином. Введение той же дозы кофеина продолжалось еще 10 дней у № 292 и № 295. Оно было пропущено на седьмой, четырнадцатый и пятнадцатый дни эксперимента. На восемнадцатый день эксперимента доза была увеличена до 150 мг на килограмм и повторена через 2 дня. № 295 был найден мертвым на следующий день. № 292 выжил. Кролики 313 и 315 могут рассматриваться вместе, так как с ними обращались одинаково во всех отношениях. Начальная доза 100 мг кофеина на килограмм была в конечном итоге увеличена до 122 мг. После двенадцатой дозы истощение было хорошо выражено, и кролики были очень слабы. № 313 был найден мертвым через 2 дня, а № 315 — через 3 дня после последней дозы кофеина. В этой связи следует отметить, что симптомы отравления кофеином у этих кроликов никогда не наблюдались. Смерть, следовательно, не была вызвана прежде всего кофеином, но быстрая потеря плоти и силы, наблюдаемая в течение последних нескольких дней, предполагает, что она была вызвана недоеданием, по-видимому, вызванным кофеином.

Результаты, полученные подкожной инъекцией кофеина, приведены в таблице как Группа II. Начальная доза 100 мг на килограмм вводилась ежедневно. № 298 умер после второй дозы. № 223 и № 296 получали это количество ежедневно в течение 6 дней. Последовал перерыв в 2 дня, по окончании которого та же доза была дана снова. На следующий день она была увеличена до 150 мг на килограмм, но никакого эффекта не наблюдалось; 48 часов спустя эта доза была повторена. № 223 был найден мертвым, но его пара выжила. Симптомы острой интоксикации кофеином не наблюдались ни у одного из этих кроликов. Таким образом, казалось бы, что кофеин не является кумулятивным. Это предположение, однако, кажется несколько противоречивым ввиду того факта, что из восьми кроликов этой серии шесть умерли, и никакой другой причины смерти, кроме кофеина, приписать было нельзя. Также первые результаты Экспериментов 293, 370 и 373 можно было бы рассматривать как указывающие на то, что кумуляция, хотя и в умеренной степени, имеет место, так как в этих случаях рефлексы развились после того, как препарат давался некоторое время. Но этот взгляд противоречит результатам Эксперимента 371, в котором 150 мг на килограмм, данные через 5 дней после того, как ежедневная дозировка кофеина была приостановлена, также вызвали усиленные рефлексы. Кумуляция, следовательно, не объясняет эффекты, отмеченные у другого кролика. Будет замечено, что кролик № 370, а также № 371 и № 373, имели диарею в течение нескольких дней. Вполне возможно, что ослабленное состояние сделало кроликов более чувствительными к действию препарата. Это становится весьма вероятным благодаря наблюдениям, записанным в экспериментах по острой интоксикации кофеином, в которых смерть наступала после малых доз. В таких случаях какое-либо патологическое состояние часто раскрывалось вскрытием. Результаты этой серии подтверждают, таким образом, результаты Серии A и указывают снова на отсутствие кумулятивного действия. Полученные результаты по всей вероятности обусловлены недоеданием и другими состояниями, вызванными полнокровием внутренностей и последующим повреждением желудочно-кишечного канала.

Таблица 16. — Хроническая интоксикация кофеином кроликов; Серия B по кумуляции.

| Group I. | Group II. | Group III.
Data. | No. 292. | No. 293. | No. 295. | No. 296. | No. 223. | No. 298. | No. 315. | No. 313.
Diet (grams carrots in 2 days) | 1,000 | 1,000 | 975 | 930 | 905 | 880 | 355 | 300
Caffein administered (cc) and weight (grams): |  |  |  |  |  |  |  |
Mar. 5 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,410 | 1,470 | 1,045 | 1,040 | 1,070 | 955 | 770 | 770
Mar. 7 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,415 | 1,360 | 1,140 | 1,090 | 1,095 | 1,000 | 715 | 690
Mar. 9 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,350 | 1,270 | 1,070 | 1,000 | 1,055 | 1,005 | 655 | 665
Mar. 11 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,505 | 1,465 | 1,190 | 1,230 | 1,285 | 1,250 | 755 | 760
Mar. 16 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,580 | 1,460 | 1,230 | 1,165 | 1,170 | 1,145 | 730 | 745
Mar. 17 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,515 | 1,415 | 1,080 | 1,040 | 1,115 | 1,105 | 720 | 685
Mar. 19 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,565 | 1,570 | 1,280 | 1,195 | 1,235 | 1,220 | 710 | 735
Mar. 21 | 7 | 7 | 6 |  |  |  | 4 | 4
| 1,585 | 1,530 | 1,265 | 1,150 | 1,215 | 1,260 | 755 | 700
Mar. 22 | 7 | 7 | 6 | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | 4 | 4
| 1,440 | 1,315 | 1,175 | 1,100 | 1,045 | 1,150 | 675 | 635
Mar. 23 | 7 | 7 | 6 | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | 4 | 4
| 1,335 | 1,140 | 1,110 | 1,145 | 1,190 | 1,230 | 715 | 700
Mar. 24 | 7 |  | 6 | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | 4 | 4
| 1,310 | ⁽²⁾ | 1,090 | 1,115 | 1,170 | 1,250 | 680 | 650
Mar. 25 | 7 |  | 6 | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | ⁽¹⁾ | 4 | 4
| 1,375 |  | 1,035 | 1,125 | 1,215 | 1,215 | 695 | 685
Mar. 26 | 7 |  | 6 |  |  |  | 4 |
| 1,255 |  | 1,095 | 1,105 | 1,155 | 1,150 | 675 | 695
Mar. 27 |  |  |  |  |  |  |  |
Mar. 28 | 7 |  | 6 | 5.5 | 6 | 6 | 4 | 4
| 1,355 |  | 1,115 | 1,120 | 1,160 | 1,155 | 595 | 685
Mar. 29 | 7 |  | 6 | 6 | 6 | 5 | 4 | 4
| 1,385 |  | 1,150 | 1,155 | 1,165 | 955 | 695 | 675
Mar. 30 | 7 |  | 6 | 6 | 6 |  | 4 | 4
| 1,330 |  | 1,075 | 1,035 | 1,095 | Dead. | 630 | 610
Mar. 31 | 7 |  | 6 | 6 | 6 |  | 4 | 4
| 1,325 |  | 1,170 | 1,110 | 1,140 |  | 690 | 605
Apr. ⁽¹⁾ | 7 |  | 6 | 6 | 6 |  | 4 | 4
| 1,335 |  | 1,050 | 1,050 | 1,120 |  | 625 | 620
Apr. 2 | 7 |  | 6 | 6 | 6 |  | 4 | 4
| 1,390 |  | 1,125 | 1,090 | 1,155 |  | 695 | 625
Apr. 3 |  |  |  |  |  |  |  |
|  |  |  |  |  | .. | 200 | ...
Apr. 4 |  |  |  |  |  |  |  |
| 1,300 |  | 1,005 | 1,105 | 1,080 |  | 585 | 580
Apr. 5 | 7 |  | 6 | 6 | 6 |  | 4 | 4
| 1,385 |  | 1,090 | 1,130 | 1,090 |  | 655 | 630
Apr. 6 | 9 |  | 7.5 | 7.5 | 8 |  |  |
| 1,260 | .. | 1,010 | 1,050 | 1,110 |  | 560 | 530
Apr. 7 |  |  |  |  |  |  |  |
|  |  |  |  |  |  |  | ⁽³⁾
Apr. 8 | 9 |  | 7.5 | 7.5 | 8 |  |  |
| 1,260 |  | 1,000 | 1.090 | 1.965 |  | Dead. |
Apr. 9 | Survived. |  | Dead. | Surv. | Dead. |  |  | Dead.

1 В эти дни 5 см³ солевого раствора вводилось подкожно.

2 Мертв 23 марта.

3 Найден мертвым в 9:00.

Таблица 17. — Хроническая интоксикация кроликов, серия B, Группа IV, по кумуляции.

RABBIT, 370.
Date. | Weight. | Carrots. | Water. | Urine. | Caffein by stomach. | Symptoms.
| Grams. | Grams. | cc. | Mg per kilo. |  |
Aug. 7 | 2,155 | 450 | 50 | 280 |  |
Aug. 8 | 2,030 | 450 | 25 | 185 |  |
Aug. 9 | 2,105 | 290 | 0 | 275 |  |
Aug. 10 | 2,095 | 450 | 30 | 335 |  |
Aug. 11 | 2,105 | 450 | 65 | 360 | 50 |
Aug. 12 | 2,125 | 450 | 65 | 220 | 50 |
Aug. 13 | 2,120 | 350 | 25 | 265 | 50 |
Aug. 14 | 2,170 | 450 | 35 | 275 | 75 |
Aug. 15 | 2,175 | 350 | (?) | 200 | 75 |
Aug. 16 | 2,170 | 360 | 65 | 250 | 75 |
Aug. 17 | 2,175 | 310 | 35 | 170 | 100 |
Aug. 18 | 2,095 | 180 | 40 | 285 | 100 | Severe diarrhea.
Aug. 19 | 2,120 | 400 | (?) | 285 | 125 | Do.
Aug. 20 | 2,120 | 400 | (?) | 310 | 125 | Better.
Aug. 21 | 2,120 | 400 | 70 | 250 | 125 | Do.
Aug. 22 | 2,040 | 400 | 45 | 265 | 150 | Diarrhea bad.
Aug. 23 | 2,030 | 370 | 35 | 220 | 150 | Diarrhea better.
Aug. 24 | 1,950 | 215 | 40 | 120 | 150 | Do.
Aug. 25 | 1,885 | 195 | 35 | 60 | 200 | Reflexes.
Aug. 26 |  |  |  |  |  | Found dead at 9.
RABBIT, 373.
Aug. 7 | 2,240 | 450 | 50 | 230 |  |
Aug. 8 | 2,150 | 150 | 30 | 300 |  |
Aug. 9 | 2,120 | 205 | 0 | 150 |  |
Aug. 10 | 2,150 | 450 | 15 | 245 |  |
Aug. 11 | 2,195 | 450 | 5 | 285 | 50 |
Aug. 12 | 2,160 | 450 | 65 | 325 | 50 |
Aug. 13 | 2,120 | 300 | 45 | 190 | 50 |
Aug. 14 | 2,195 | 450 | 40 | 265 | 75 |
Aug. 15 | 2,215 | 350 | 35 | 200 | 75 |
Aug. 16 | 2,205 | 310 | 45 | 225 | 75 |
Aug. 17 | 2,240 | 400 | 40 | 265 | 100 |
Aug. 18 | 2,255 | 350 | 30 | 320 | 100 |
Aug. 19 | 2,115 | 185 | (?) | 170 | 125 | Severe diarrhea.
Aug. 20 | 2,115 | 280 | 35 | 195 | 125 | Diarrhea better.
Aug. 21 | 2,050 | 175 | 75 | 115 | 125 | Slight diarrhea.
Aug. 22 | 2,060 | 180 | 75 | 130 | 150 |
Aug. 23 | 2,005 | 200 | 75 | 125 | 150 | Reflexes.
Aug. 24 | 1,990 | 200 | 75 | 150 | 150 | Slight diarrhea.
Aug. 25 | 1,950 | 255 | 55 | 132 | 175 | Severe diarrhea.
Aug. 26 | 1,870 | 205 | 80 | 140 | None | Do.
Aug. 27 | 1,830 | 200 | 50 | 140 | do. | Do.
Aug. 28 | 1,950 | 400 | 25 | 265 | do. | Slight diarrhea.
Aug. 29 | 1,825 | 400 | 0 | 315 | do. | Very weak and in poor condition
Aug. 30 | 1,850 |  | 10 | 140 | do. |
Aug. 31 | 1,835 |  |  |  |  |
RABBIT, 370.
Aug. 7 | 2,240 | 450 | 50 | 300 |  |
Aug. 8 | 2,260 | 450 | 50 | 225 |  |
Aug. 9 | 2,310 | 430 | (?) | 300 |  |
Aug. 10 | 2,295 | 450 | 50 | 305 |  |
Aug. 11 | 2,320 | 450 | 50 | 335 | 50 |
Aug. 12 | 2,280 | 450 | 70 | 400 | 50 |
Aug. 13 | 2,300 | 350 | 70 | 255 | 50 |
Aug. 14 | 2,265 | 425 | 55 | 154 | 75 |
Aug. 15 | 2,260 | 250 | 40 | 125 | 75 |
Aug. 16 | 2,295 | 155 | 70 | Lost | 75 |
Aug. 17 | 2,180 | 105 | 70 | 120 | 100 | Severe diarrhea.
Aug. 18 | 2,150 | 125 | 70 | 100 | 100 | Diarrhea better.
Aug. 19 | 2,075 | 210 | (?) | 192 | 100 | Diarrhea severe.
Aug. 20 | 2,075 | 280 | 70 | 180 | 100 | Do.
Aug. 21 | 2,165 | 260 | 50 | 225 | None | Diarrhea better.
Aug. 22 | 2,105 | 400 | 50 | 275 | do. |
Aug. 23 | 2,080 | 300 | 0 | 145 | do. | Diarrhea severe.
Aug. 24 | 2,105 | 250 | 15 | 245 | do. | Do.
Aug. 25 | 2,055 | 320 | 10 | 176 | 150 | Reflexes.
Aug. 26 | 2,040 | 190 | 75 | 250 | 150 | Died at 1 p. m., without having showed any symptoms other than reflexes.

Серия C.

Подопытными, использованными в этих экспериментах, были кролики среднего размера, и они были, по-видимому, молодыми или, во всяком случае, не очень старыми. Серия была запланирована для изучения возможного эффекта диеты на токсичность кофеина при введении в течение некоторого времени, и поэтому овес был заменен морковью, которая давалась в предыдущей работе, как уже было сказано. Кофеин давали через рот обычным способом, в 1-процентном растворе, 100 мг на килограмм ежедневно. Четырнадцать кроликов были использованы для этих тестов. Их масса записывалась ежедневно, и наблюдения проводились через частые интервалы в течение дня.

Единственным изменением, замеченным во всех экспериментах этой серии, была прогрессирующая потеря массы, которая началась через 3–8 дней после начала введения препарата. Продолжительность жизни варьировалась значительно. № 382 умер после первой дозы. № 389 жил 2 дня, № 386 — 3 дня, и № 385 — 5 дней; № 390 жил 7 дней и № 404 жил 20 дней после начала введения кофеина. Продолжительность жизни у всех остальных была от 11 до 16 дней. Находки при вскрытии интересны и наводят на размышления относительно возможного объяснения эффектов повторного дозирования кофеина. У восьми кроликов было вовлечение слизистой оболочки желудка или кишечника, или обоих. Поскольку то же состояние желудочно-кишечного канала наблюдалось в предыдущих экспериментах с кофеином при подкожной инъекции, простое прохождение трубки в желудок очевидно не является причиной этого состояния. Летальный исход обусловлен, следовательно, как было предложено выше, истощением, вызванным состоянием желудочно-кишечного канала. Более того, параллельные эксперименты, проведенные на кроликах таким же образом с алкоголем, выживали после этого лечения гораздо дольше. Очевидно, тогда прохождение мягкого резинового катетера не является причиной этого состояния желудочно-кишечного канала, ни диета. Кролики питались овсом исключительно в течение нескольких месяцев в этой лаборатории и процветали. Наличие пневмонии у других кроликов этой серии может рассматриваться как случайное, так как немыслимо, чтобы одна или две дозы кофеина, как это было в случае № 382 и № 389, могли предрасполагать легкие к инфекции. Результаты этих экспериментов, следовательно, находятся в гармонии с результатами предыдущих двух серий, указывая на то, что кофеин не накапливается в организме, и что токсичность кофеина, будь то одиночная доза или повторные дозы, одинакова, на диете из моркови или овса. Эти результаты также показывают, что кофеин гораздо более токсичен при повторном дозировании. Как сказано в исторической части этого бюллетеня, того же мнения придерживался Гуревич (28).

Кролик 386. Бельгийская самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 1,300 | 13.0 |  | Aug. 19 | (?) | (?)
Aug. 18 | 1,215 | 12.0 |

20 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие слегка гиперемированы; печень полнокровная и дряблая; желчный пузырь хорошо наполнен.

Кролик 389. Черный самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 1,070 | 10.0 |  | Aug. 18 | 1,025 | 10.0

19 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие сильно гиперемированы и частично гепатизированы; печень полнокровная; остальные органы выглядели нормально.

Кролик 382. Бельгийская самка.

17 августа весил 1035 граммов; получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов; всего введено 10 куб. см 1-процентного раствора кофеина.

18 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие гиперемированы и гепатизированы; печень полнокровная; на слизистой оболочке желудка обнаружены многочисленные петехиальные кровоизлияния; почки слегка гиперемированы; кишечник выглядел нормально.

Кролик 385. Бельгийская самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 780 | 8.0 |  | Aug. 20 | 715 | 7.0
Aug. 18 | 760 | 7.5 |  | Aug. 21 | 700 | 7.0
Aug. 19 | 755 | 7.5 |

22 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: в легких обнаружены пневмонические очаги с воспалением прилегающей плевры; вокруг легкого присутствует фиброзно-пластический экссудат; печень поражена кокцидиозом; желудок растянут содержимым; слизистая оболочка характеризуется катаральным воспалением; содержимое тонкой кишки жидкое, окрашено желчью; толстая кишка несколько уплотнена; печень и почки по виду нормальные.

Кролик 404. Белый самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 20 | 1,465 | 14.5 |  | Aug. 30 | 1,320 | 13.0
Aug. 21 | 1,475 | 14.5 |  | Aug. 31 | 1,330 | 13.5
Aug. 22¹ |  |  |  | Sept. ¹ | 1,335 | 13.5
Aug. 23 | 1,475 | 14.5 |  | Sept. 2 | 1,315 | 13.0
Aug. 24 | 1,400 | 14.0 |  | Sept. 3 | 1,350 | 13.5
Aug. 25² | 1,405 | 14.0 |  | Sept. 4 | 1,335 | 13.5
Aug. 26 | 1,415 | 14.0 |  | Sept. 5 | 1,350 | 13.5
Aug. 27 | 1,400 | 14.0 |  | Sept. 6 | 1,380 | 14.0
Aug. 28¹ |  |  |  | Sept. 7 | 1,375 | 14.0
Aug. 29 | 1,310 | 13.0 |  | Sept. 8 | 1,325 | 13.0

1 Не кормили. 2 Рефлексы.

9 сентября: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: в обоих легких обширная пневмония со спайками с плеврой; плеврит и перикардит очень выражены; большое количество фиброзного экссудата в плевральной полости; пилорический отдел желудка слегка гиперемирован; печень гиперемирована; остальные органы в норме.

Кролик 393. Бельгийский.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 950 | 9.5 |  | Aug. 25 | 835 | 8.5
Aug. 18 | 910 | 9.0 |  | Aug. 26 | 780 | 8.0
Aug. 19 | 895 | 9.0 |  | Aug. 27 | 765 | 7.5
Aug. 20 | 910 | 9.0 |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 21 | 905 | 9.0 |  | Aug. 29 | 710 |
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 30² |  |
Aug. 23 | 825 | 8.0 |  | Aug. 31¹ |  |
Aug. 24 | 870 | 8.5 |  |  |  |

1 Не кормили. 2 Состояние очень плохое; не кормили.

1 сентября: найден мертвым. Вскрытие: легкие гиперемированы и припаяны к плевре; обширное воспаление плевры; печень слегка увеличена и гиперемирована; слизистая оболочка желудка и тонкой кишки слегка гиперемирована; остальные органы в норме.

Кролик 390. Бельгийский, самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 1,490 | 15.0 |  | Aug. 21 | 1,265 | 12.5
Aug. 18 | 1,370 | 14.0 |  | Aug. 22¹ |  |
Aug. 19 | 1,365 | 13.5 |  | Aug. 23 | 1,120 | 11.0
Aug. 20 | 1,340 | 13.5 |  |  |  |

1 Не кормили.

24 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: сердце и легкие выглядели нормально; органы брюшной полости не показали видимых патологических изменений, за исключением кокцидиоза печени и наполненности кровеносных сосудов.

Кролик 392. Мальтийский, самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 1,265 | 12.5 |  | Aug. 26 | 1,140 | 11.5
Aug. 18 | 1,275 | 12.5 |  | Aug. 27 | 1,140 | 11.5
Aug. 19 | 1,240 | 12.5 |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 20 | 1,220 | 12.0 |  | Aug. 29 | 1,115 | 11.0
Aug. 21 | 1,245 | 12.5 |  | Aug. 30 | 1,080 | 11.0
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 31 | 1,020 | 10.0
Aug. 23 | 1,180 | 12.0 |  | Sept. 1 | 995 | 10.0
Aug. 24 | 1,190 | 12.0 |  | Sept. 2 | 930 | 9.0
Aug. 25 | 1,155 | 11.5 |  |  |  |

1 Не кормили.

Умер в 3 часа дня 2 сентября. Вскрытие: в желудке и тонкой кишке обнаружены многочисленные мелкие геморрагические пятна; содержимое желудка окружено толстым слоем слизи; остальные органы были по виду нормальными.

Кролик 403. Черный.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 20 | 1,640 | 16.5 |  | Aug. 26 | 1,390 | 14.0
Aug. 21 | 1,640 | 16.5 |  | Aug. 27 | 1,330 | 13.5
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 23 | 1,490 | 15.0 |  | Aug. 29 | 1,130 | 11.5
Aug. 24 | 1,515 | 15.0 |  | Aug. 30 | 1,055 | 10.5
Aug. 25 | 1,475 | 15.0 |  |  |  |

1 Не кормили.

31 августа: найден мертвым в 3 часа дня. Вскрытие: обширный гастроэнтерит; печень увеличена и гиперемирована; селезенка слегка гиперемирована; брюшина утолщена и гиперемирована; остальные органы в норме.

Кролик 884. Черный, самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 16 | 1,195 | 12.0 |  | Aug. 25 | 990 | 10.0
Aug. 17 | 1,205 | 12.0 |  | Aug. 26 | 960 | 9.5
Aug. 18 | 1,140 | 11.5 |  | Aug. 27 | 955 | 9.5
Aug. 19 | 1,180 | 12.0 |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 20 | 1,145 | 11.5 |  | Aug. 29 | 870 | 9.0
Aug. 21 | 1,145 | 11.5 |  | Aug. 30² | 850 | 8.5
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 31 | 810 | 8.0
Aug. 23 | 1,005 | 10.0 |  | Sept. 1 | 740 | 7.5
Aug. 24 | 1,035 | 10.5 |  |  |  |

1 Не кормили. 2 Плохое состояние, слизь из прямой кишки.

2 сентября: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: слизистая оболочка желудка показала многочисленные геморрагические пятна; начальный отдел тонкой кишки был слегка гиперемирован; остальные органы по виду были нормальными.

Кролик 383. Бельгийский, самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 16 | 995 | 10.0 |  | Aug. 22¹ |  |
Aug. 17 | 1,005 | 10.0 |  | Aug. 23 | 875 | 9.0
Aug. 18 | 990 | 10.0 |  | Aug. 24 | 855 | 8.5
Aug. 19 | 895 | 9.0 |  | Aug. 25 | 850 | 8.5
Aug. 20 | 945 | 9.5 |  | Aug. 26 | 785 | 8.0
Aug. 21 | 965 | 9.5 |  | Aug. 27 | 710 | 7.0

1 Не кормили.

28 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие, сердце и селезенка по виду нормальные; печень поражена кокцидиями; желудок по виду нормальный; стенки тонкой кишки инъецированы; толстая кишка сильно гиперемирована и геморрагична; почки геморрагичны.

Кролик 387. Бельгийский самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 1,260 | 12.5 |  | Aug. 26 | 1,185 | 12.0
Aug. 18 | 1,340 | 13.0 |  | Aug. 27 | 1,255 | 12.5
Aug. 19 | 1,335 | 13.0 |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 20 | 1,300 | 13.0 |  | Aug. 29 | 1,115 | 11.0
Aug. 21 | 1,325 | 13.0 |  | Aug. 30 | 1,135 | 11.5
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 31 | 1,175 | 12.0
Aug. 23 | 1,205 | 12.0 |  | Sept. 1 | 1,050 | 10.5
Aug. 24 | 1,200 | 12.0 |  | Sept. 2 | 900 | 9.0
Aug. 25 | 1,285 | 12.5 |  |  |  |

1 Не кормили.

3 сентября, найден мертвым. Вскрытие: желудок и тонкая кишка показали многочисленные геморрагические пятна; содержимое желудка окружено толстым слоем слизи; мочевой пузырь был сильно растянут мочой; остальные органы были по виду нормальными.

Кролик 388. Бельгийский самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 1,080 | 10.0 |  | Aug. 23 | 1,020 | 10.0
Aug. 18 | 1,115 | 11.0 |  | Aug. 24 | 985 | 10.0
Aug. 19 | 1,150 | 11.5 |  | Aug. 25 | 960 | 9.5
Aug. 20 | 1,130 | 11.5 |  | Aug. 26 | 900 | 9.0
Aug. 21 | 1,120 | 11.0 |  | Aug. 27 | 875 | 9.0
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 28¹ |  |

1 Не кормили.

29 августа, найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: сердце и легкие нормальные; печень и почки полнокровные; желудок нормальный; кишечник показал катаральное воспаление, хотя и не сильное; селезенка нормальная; стенки толстой кишки несколько инъецированы.

Кролик 391. Бельгийский.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 17 | 940 | 9.5 |  | Aug. 24 | 805 | 8.0
Aug. 18 | 950 | 9.5 |  | Aug. 25 | 800 | 8.0
Aug. 19 | 955 | 9.5 |  | Aug. 26 | 765 | 7.5
Aug. 20 | 935 | 9.5 |  | Aug. 27² | 690 | 7.0
Aug. 21 | 945 | 9.5 |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 29 | 565 | 5.5

1 Не кормили. 2 Плохое состояние.

30 августа, найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: сердце инъецировано; легкие нормальные; печень слегка поражена кокцидиями; желудок по виду нормальный; тонкая кишка нормальная, но толстая кишка значительно воспалена; почки слегка полнокровные; остальные органы в норме.

Кролик 402. Черная самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса.

Date. | Weight. | Treatment. |  | Date. | Weight. | Treatment.
| Grams. | cc. |  |  | Grams. | cc.
Aug. 20 | 2,030 | 20.0 |  | Aug. 27 | 1,765 | 17.5
Aug. 21 | 1,950 | 19.5 |  | Aug. 28¹ |  |
Aug. 22¹ |  |  |  | Aug. 29 | 1,630 | 16.5
Aug. 23 | 1,955 | 19.5 |  | Aug. 30 | 1,540 | 15.5
Aug. 24 | 1,905 | 19.0 |  | Aug. 31 | 1,510 | 15.0
Aug. 25 | 1,890 | 19.0 |  | Sept. 1 | 1,425 | 14.0
Aug. 26 | 1,780 | 18.0 |  |  |  |

1 Не кормили.

2 сентября, найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие были сильно гиперемированы, задняя доля правого легкого показала гепатизацию; печень была значительно увеличена и гиперемирована; слизистая оболочка желудка и тонкой кишки была гиперемирована и показала многочисленные геморрагические пятна; почки показали легкую гиперемию; все остальные органы в норме.

Серия D.

Данные, представленные на предыдущих страницах относительно кумуляции кофеина, естественным образом наводят на вопрос, приобретает ли организм толерантность к нему. На этот вопрос уже был дан утвердительный ответ Гуревичем (28), но из-за метода, который он использовал для идентификации кофеина, и малого количества проведенных экспериментов его результаты не являются окончательными. Эксперименты серий A, B и C можно рассматривать как указывающие на то, что толерантность к кофеину у кролика не вырабатывается. Однако было замечено, что кролик, по-видимому, переносит все большие дозы при определенных условиях, как показывают следующие эксперименты:

Кролик 223. Бельгийский заяц, самец.

October 22: Weight, 1,520 grams; 15 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously at 2 p. m.

1 ноября: 10:30 утра, вес 1510 граммов; 17 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно (225 мг на килограмм), наблюдались рефлексы, но тетануса не было.

4 ноября: 10:30 утра, вес 1535 граммов; 19 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в 2:40 дня; 4:40 дня, симптомов нет.

8 ноября: вес 1425 граммов; 20 куб. см 2-процентного раствора кофеина (285 мг на килограмм) введено в 11:45 вечера; 5 часов вечера, симптомов нет.

November 17: Weight, 1,325 grams; 22 cc 2 per cent caffein injected at 2.55 p. m. (329 mg per kilo), no symptoms.

18 ноября: кролик в хорошем состоянии.

Кролик 224. Бельгийский заяц, самка. Диета: морковь.

October 18: Weight, 1,935 grams; 11.20 a. m., 15 cc 2 per cent caffein (155 mg per kilo) injected.

1 ноября: вес 1780 граммов; 20 куб. см 2-процентного раствора кофеина (224 мг на килограмм) введено подкожно, рефлексы усилены, присутствуют мышечные треморы, но других симптомов нет.

November 4: Weight, 1,710 grams; 21.5 cc 2 per cent caffein (252 mg per kilo) injected.

8 ноября: вес 1435 граммов; 22,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина, или 314 мг на килограмм, введено в 11:40 вечера; 5 часов утра, симптомов нет.

November 17: Weight, 1,340 grams; 24 cc 2 per cent caffein (358 mg per kilo) injected subcutaneously.

18 ноября: 9 часов утра, кролик умер.

Кролик 226. Серый самец. Диета: морковь.

28 октября: вес 1045 граммов; 10 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в 1:50 дня; 4:30 дня, наблюдались треморы, но других симптомов нет.

29 октября: кролик в хорошем состоянии.

November 1: Weight, 950 grams; 10.55 a. m., 11 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously (231 mg per kilo).

November 4: Weight, 930 grams; 2.50 p. m., 12 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously (258 mg caffein per kilo).

November 6: Weight, 945 grams; 11.45 a. m., 15 cc 2 per cent caffein (313 mg per kilo) injected subcutaneously.

November 17: Rabbit still alive; weight, 890 grams.

Результаты этих экспериментов указывают на то, что при достаточном времени между двумя последовательными инъекциями восприимчивость к кофеину не увеличивается. Кролик, напротив, по-видимому, приобретает толерантность к препарату, так как четвертая доза была на 15 процентов больше минимальной летальной дозы кофеина. Это, по всей вероятности, объясняется лучшим выведением кофеина и продуктов его распада, а также восстановлением после вредного воздействия каждой дозы, что стало возможным благодаря длительным интервалам между инъекциями.

Результаты этих экспериментов можно кратко суммировать, заявив, что сублимиальные дозы кофеина, вводимые кролику ежедневно или с интервалами (не слишком длительными), не вызывают никаких симптомов, подобных тем, что наблюдались при острой интоксикации кофеином, а именно: усиления рефлексов и судорог или увеличения частоты дыхания, что показывает отсутствие кумулятивного эффекта. Однако были получены данные, несомненно свидетельствующие о суммировании эффекта, если введение сублимиальных доз кофеина продолжается ежедневно в течение 11–18 дней, что приводит к летальному исходу. Толерантность, однако, может быть приобретена, хотя и в ограниченной степени, при условии, что интервалы между инъекциями достаточно длительны, чтобы дать время для восстановления повреждений, нанесенных препаратом, и для развития механизма его лучшего разложения и выведения. Более того, приведенные данные указывают на то, что выведение сублимиальных доз кофеина и продуктов его распада, вероятно, завершается в течение 24 часов или около того. То, что выведение больших доз не завершается в этот интервал, делает вероятным следующий эксперимент:

Серый кролик 455. Самка. Диета: овес.

12 октября: вес 1185 граммов; 3:30 дня, 11,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено в поясничные мышцы; 3 часа дня, рефлексы усилены.

13 октября: 10 часов утра, кролик весил 1070 граммов; симптомов отравления кофеином нет, рефлексы нормальные; 10:30 утра, 10 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено в поясничные мышцы; 11:30 утра, кролик спрыгнул со стола, начались судороги, и он умер.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА СОБАКАХ.

Получив некоторую информацию относительно воздействия повторных доз кофеина на кроликов, было интересно выяснить, как хищники реагируют на препарат при аналогичном введении. Для этой цели использовалось несколько собак. Было допущено значительное разнообразие в методах экспериментирования, как станет ясно далее.

Поскольку состояние животного, его возраст, окружающая среда или диета могут быть факторами, влияющими на токсичность, были проведены тесты на взрослых и молодых растущих собаках с разным питанием. Подопытные животные находились под наблюдением от нескольких дней до нескольких недель до начала введения кофеина, чтобы определить, существует ли какое-либо болезненное состояние, а также выяснить, оказывает ли новая среда какое-либо влияние на этих животных. Кофеин давали преимущественно через рот, но в некоторых случаях в течение части экспериментального периода применялся и подкожный метод. Начальная доза, которая варьировалась для разных особей, поддерживалась в течение переменного периода времени. Затем ее постепенно увеличивали, в большинстве случаев до смерти животного. При больших дозах интервалы между последовательными инъекциями также увеличивались.

Серия A.

В этой серии использовалось шесть собак. Кофеин вводили через рот в течение периодов от шести дней до пяти недель. Его давали ежедневно или с интервалами в два, а иногда и в три дня. В нескольких случаях препарат не давали в течение четырех или даже семи дней, а затем его введение возобновляли по истечении этого времени. Начальная доза в этих экспериментах варьировалась примерно от 40 до 140 мг на килограмм. Затем дозы постепенно увеличивали, проверяя таким образом максимальную устойчивость подопытного к кофеину. Диета состояла либо исключительно из мяса, либо преимущественно из углеводов с минимальным количеством мяса для придания вкуса пище.

Собака 11. Самка.

Диета состояла из 250 граммов риса, 250 граммов тростникового сахара, 50 граммов мяса, около 100 граммов крекерной муки. Кофеин давали через рот ежедневно или с интервалом в один день, когда доза не превышала 1,5 грамма. Перед тем как дозу увеличили до 2 граммов, или примерно 0,213 грамма кофеина на килограмм, был сделан интервал в два дня. Симптомы были замечены на следующий день. Поэтому снова был сделан интервал в два дня, по окончании которого та же доза была повторена. Следует отметить, что в этот раз симптомов не было, и общее состояние собаки казалось хорошим. Поэтому в течение следующих двух дней ежедневно давали по 2 грамма кофеина без каких-либо нежелательных эффектов; затем дозу увеличили до 2,5 граммов. Даже после такого огромного количества не наблюдалось никаких симптомов, кроме легкого тремора. Когда эта доза была повторена 26 часов спустя, она оказалась смертельной. В моче не было обнаружено ни альбумина, ни сахара, хотя собаку кормили очень обильной углеводной диетой. Ниже приводится полная запись эксперимента.

20 апреля: моча кислая, альбумина нет, сахара нет.

21 апреля: моча без сахара.

22 апреля: моча без сахара. 1 грамм кофеина дан во второй половине дня.

23 апреля: 9 часов утра, собака была очень жаждущей, выпила большое количество воды, моча не восстанавливала реактив Фелинга.

April 24: 2.30 p. m., 1 gram caffein, no sugar in urine.

25 апреля: введен 1 грамм кофеина.

26 апреля: вес 10,6 кг, моча собрана утром, сахара нет; 4:10 дня, 1,5 грамма кофеина.

27 апреля: 1,5 грамма кофеина; 1:30 дня, диета как прежде, сахара в моче нет.

28 апреля: вес 10,2 кг, кофеина нет, сахара в моче нет.

April 30: Weight, 10.4 kilos, no sugar in urine; 4.20 p. m., 2 grams caffein.

1 мая: моча исследована, сахара нет, вес 10 кг, рвота, больна, наблюдались треморы, выпила 500 куб. см воды за один раз, аппетит плохой.

2 мая: кофеина нет, выпила 150 куб. см воды.

3 мая: моча, сахара нет, присутствует умеренное количество альбумина; 12 часов дня, 2 грамма кофеина дано через рот, вес 10,3 кг; 2 часа дня, моча, сахар отрицательный, состояние собаки хорошее, симптомов интоксикации кофеином нет.

4 мая: 10 часов утра, в бутылке для сбора найдено около 10 куб. см густой, темного цвета слизистой мочи; альбумина чуть больше следов, определенно меньше, чем 3 мая, сахара нет, состояние собаки довольно хорошее, за исключением легкого мышечного тремора; 4 часа дня, 2 грамма кофеина через рот (как обычно).

May 5: Urine not examined, no symptoms; 4 p. m., 2 grams caffein.

6 мая: моча не исследовалась; 2:30 дня, 2,5 грамма кофеина дано через рот; 4 часа дня, легкий тремор, других симптомов нет.

7 мая: моча не исследовалась, симптомов не наблюдалось; 4 часа дня, 2,5 грамма кофеина.

8 мая: 9 часов утра, найдена мертвой, моча, собранная с момента последней дозы кофеина, не содержала сахара или альбумина, количество кофеина, скормленное этой собаке, составило 18 граммов за 18 дней. Вскрытие: посмертное исследование показало выраженный энтерит с геморрагическими пятнами на слизистой оболочке; печень и почки гиперемированы и темного цвета; легкие гиперемированы; щитовидная железа была значительно увеличена и гиперемирована.

Собака 28.

30 апреля: вес 6,8 кг; диета состояла из 250 граммов риса, 250 граммов сахара, 100 граммов крекерной муки и 100 граммов мяса. 3 мая ее вес был 7 кг. Она получила 1 грамм кофеина через рот в 12 часов дня. В 2 часа дня у нее была рвота и наблюдались треморы. На следующий день, 4 мая, треморы все еще присутствовали, хотя и менее выраженные. Исследование мочи на сахар и альбумин было отрицательным; 4 мая снова дали 1 грамм кофеина и повторили 5 мая. В этот день ее общее состояние было нехорошим — у собаки не было аппетита, и она отказывалась принимать кофеин. Поскольку собака потеряла 10 процентов своего веса, ее перевели исключительно на мясную диету, а дозу кофеина снизили до 0,5 грамма. Она заболела после второй дозы, поэтому введение кофеина было прекращено. Его возобновили через пять дней, и кофеин вводили в возрастающих количествах, т. е. 18 мая — 0,5 грамма; 19 мая — 0,5; 20 мая — 1; 21 мая — 1 грамм в двух дозах по 0,5 каждая, с интервалом в один час; 22 мая — 1 грамм. Собака стала раздражительной, но других симптомов не наблюдалось. На следующий день введение кофеина пропустили. На следующий день, когда дали ту же дозу кофеина, снова наблюдалась выраженная раздражительность и тремор. Поэтому эксперимент был прекращен.

Собака 22. Бульдог, самец.

24 июня: собака весила 13,7 кг. Диета состояла исключительно из мяса; 1 грамм кофеина дан через рот; развилась диарея; кофеин не давали в течение трех дней.

28 июня: собака весила 13,6 кг, 1,5 грамма кофеина дано в 10 часов утра.

30 июня: введено 1,75 грамма кофеина.

2 июля: собака весила 13,5 кг; 2 грамма кофеина, или 0,15 грамма на килограмм, вызвали выраженную жажду, но не вызвали никаких других симптомов.

Собака 20. Самка.

12 мая: вес 7,7 кг. Кормили обильной углеводной диетой, состоящей из 100 граммов риса, 100 граммов сахара, мяса и крекерной муки в количестве, достаточном для придания вкуса пище.

14 мая: вес 7,7 кг. Исследование мочи на альбумин и сахар дало отрицательные результаты. Моча была кислой по лакмусу.

17 мая: вес 7,4 кг. Через три часа после кормления собака получила 0,5 грамма кофеина через рот. Исследование мочи на следующий день на сахар было отрицательным, но присутствовал след альбумина. Будет замечено, что дозы увеличивались постепенно и что симптомы наблюдались только после четвертой дозы 0,1 грамма на килограмм. Позже мясо было заменено углеводной диетой, и введение кофеина было прекращено на четыре дня. По окончании этого периода ежедневно в течение пяти дней скармливали 100 мг кофеина на килограмм, а затем дозу очень постепенно увеличивали. Диарея случалась дважды, но других симптомов не было, причем второй приступ длился несколько дней. Ниже приводится полная запись эксперимента:

19 мая: 0,5 грамма кофеина в 11:45 утра.

20 мая: 0,75 грамма кофеина в 12:45 утра.

21 мая: 0,75 грамма кофеина в 12 часов дня; сахара нет, альбумина в моче нет.

22 мая: 0,75 грамма кофеина; моча, то же состояние; симптомов нет.

23 мая: вес 7,5 кг; кофеина нет.

24 мая: 0,75 грамма кофеина; тремор очень выражен.

25 мая: кофеина нет.

26 мая: 0,75 грамма кофеина.

27 мая: 0,75 грамма кофеина.

28 мая: 0,75 грамма кофеина.

29 мая: 1 грамм кофеина в двух дозах по 0,75 и 0,25 грамма.

30 мая: кофеина нет.

31 мая: кофеина нет; диета исключительно мясная.

1 июня: кофеина нет; диета исключительно мясная.

2 июня: кофеина нет; сахара нет, альбумина в моче нет.

3 июня: вес 7,6 кг; 0,75 грамма кофеина; сахара в моче нет.

4 июня: вес 7,3 кг; 0,75 грамма кофеина; сахара в моче нет.

5 июня: вес 7,5 кг; 0,8 грамма кофеина; выпила 500 куб. см воды; съела 200 граммов мяса.

6 июня: вес 7,4 кг; 0,8 грамма кофеина; 500 куб. см мочи; выпила 500 куб. см воды; съела 200 граммов мяса; симптомов нет.

June 7: Weight, 7.7 kilos; 0.8 gram caffein 10 a. m.; 400 cc urine, 500 cc water, 200 grams meat.

June 8: Weight, 7.5 kilos; 0.9 gram caffein, 450 cc urine, 1 p. m.; 200 grams meat, 500 cc water.

9 июня: вес 7,6 кг; 0,9 грамма кофеина, 1 час дня; 500 куб. см воды, 200 граммов мяса и костной муки; диарея и беспокойство весь день.

June 10: Weight, 7.6 kilos; 1 gram caffein, 500 cc water, 200 grams meat, 480 cc urine.

June 11: Weight, 8 kilos; 1 gram caffein, 470 cc urine, 500 cc water, 200 grams meat.

June 12: Weight, 7.8 kilos; 1 gram caffein, 710 cc urine, 500 cc water, 200 grams meat.

June 13: 450 cc urine, 500 cc water, 300 grams meat.

June 14: Weight, 7.9 kilos; 1.2 grams caffein, 500 cc water, 300 grams meat, 490 cc urine.

June 15: Weight 7.8 kilos, 500 cc water, 300 grams meat, 550 cc urine.

June 16: Weight 8.0 kilos, 1.2 gram caffein, 500 cc water, 300 grams meat, bone dust added to check diarrhea.

June 17: 500 cc water, 300 grams meat, 450 cc urine, diarrhea continues, bone dust added.

June 18. Weight 7.8 kilos, 1.3 gram caffein, 300 grams meat, 500 cc water, 300 cc urine.

19 июня: собака очень жаждущая, выпила 1 литр воды и съела 350 граммов мяса; 960 куб. см мочи выделено за последние 24 часа.

21 июня: вес 7,5 кг, 1,5 грамма кофеина дано в 10 часов утра. В 2 часа дня судороги и смерть. Эта собака получила в общей сложности 21,15 грамма кофеина в 25 дозах в течение 35 дней, что составляет в среднем 85 мг на килограмм ежедневно.

Собака 19. Самка фокстерьера.

13 мая: вес 6,4 кг. Диета состояла из 100 граммов риса, 100 граммов сахара и достаточного количества мяса и крекерной муки для придания вкуса пище. Исследование мочи показало след альбумина, но не сахара. Моча была кислой по лакмусу. Два дня спустя моча была щелочной по лакмусу. Все еще было небольшое количество альбумина, но не сахара.

17 мая: 0,5 грамма кофеина дано через рот. Исследование мочи, собранной на следующий день, все еще показало наличие альбумина и отсутствие восстанавливающих веществ. У собаки были треморы. Поэтому кофеин не вводили.

19 мая: 0,5 грамма кофеина дано через рот.

20 мая: 0,75 грамма кофеина скормлено в 12:45 дня. Собаку рвало ночью, а на следующее утро наблюдались треморы. Собранная моча была исследована на альбумин и сахар, но ни того, ни другого не было найдено.

21 мая: 12 часов дня, скормлено 0,75 грамма кофеина. Собака весила 6 кг, что, таким образом, представляло потерю 0,4 кг. Стала аномально жаждущей и потеряла аппетит, но других симптомов отравления кофеином не наблюдалось.

22 мая: собаке снова дали 0,75 грамма кофеина в 12 часов дня. Исследование мочи на альбумин и сахар дало отрицательные результаты. Собака умерла в 4:15 дня. Летальная доза для этой собаки составила 0,125 грамма кофеина на килограмм, а общее количество кофеина, принятое за шесть дней, составило 3,25 грамма, или 0,54 грамма в день, что составляет 90 мг на килограмм.

Собака 21. Белая самка бульдога.

Эту собаку держали на диете исключительно из мяса и давали воду вволю. От 0,5 до 0,6 грамма кофеина вводили ежедневно в течение семи дней; затем дозы увеличивали и давали с более длительными интервалами. Никаких симптомов воздействия кофеина не наблюдалось до тех пор, пока не была скормлена доза 1,5 грамма, когда на следующий день была замечена диарея. В следующей записи приведены подробности эксперимента:

Date. | Weight. | Caffein. |  | Date. | Weight. | Caffein.
| Kilos. | Grams. |  |  | Kilos. | Grams.
June 7 | 12.5 | 0.5 |  | June 16 | 12.7 | 0.8 
June 8 | 12.5 | .5  |  | June 18 | 12.9 | 1.0 
June 9 | 12.5 | .5  |  | June 21 | 13.4 | 1.2 
June 10 | 12.3 | .6  |  | June 24 | 13.3 | 1.5 
June 11 | 12.3 | .6  |  | June 25 | ⁽¹⁾ | .0 
June 12 | 12.3 | .6  |  | June 27 | 13.5 | 1.5 
June 13 | 12.3 | .6  |  | June 30 | 13.5 | 1.75
June 14 | 12.3 | .8  |  |  |  |

1 Диарея.

2 июля: 11:30 утра, 2,0 грамма кофеина скормлено через рот; 1:30 дня, тетанус, собака умерла. Общее количество кофеина, скормленное собаке № 21 за 25 дней эксперимента, составило 14,45 грамма, или в среднем 578 мг в день, что составляет около 42–43 мг на килограмм веса тела.

Несмотря на разнообразие методов экспериментирования, наблюдалось поразительное единообразие в некоторых полученных результатах. Все эксперименты серии показали отсутствие кумулятивного действия кофеина. Представленные экспериментальные данные указывают на то, что умеренно большие дозы могут вводиться с интервалами около 24 часов, не вызывая никаких симптомов нервного или какого-либо другого расстройства. Это проиллюстрировано в тестах на собаке 11, которые носили предварительный характер. У этого подопытного 100–150 мг кофеина на килограмм принимались ежедневно в течение нескольких дней без каких-либо изменений. Позже, в ходе эксперимента, после введения больших доз, наблюдались только легкие симптомы, такие как тремор. Дополнительным доказательством отсутствия кумулятивного действия кофеина послужили результаты следующих экспериментов:

Собака 23 получала 142 мг кофеина на килограмм в течение трех последовательных дней. Ее общее состояние указывало на то, что эти количества кофеина были токсичными, но она выжила. В другой серии тестов, проведенных после того, как ей дали отдохнуть несколько дней, она снова не показала никакой кумуляции препарата, так как на этот раз выжила в серии тестов большей продолжительности, чем первая.

Гораздо лучшей иллюстрацией отсутствия кумулятивного действия препарата служат эксперименты на собаке № 20. В этом случае 100–125 мг кофеина на килограмм, данные в течение 10 дней подряд, не вызвали никаких заметных эффектов. Единственными наблюдаемыми симптомами были диарея и беспокойство. Таким образом, эти эксперименты показывают, что выведение и разложение кофеина, по-видимому, осуществляются организмом в течение двадцати четырех часов или около того.

Эксперименты на собаке 19, однако, составляют исключение — третья доза 125 мг кофеина на килограмм оказалась смертельной. Очень низкое содержание белка в диете этой собаки наводит на мысль о возможной причине более низкой устойчивости к кофеину у этого подопытного. Но можно заметить, что такая же диета предоставлялась собаке 20, которая переносила такие количества кофеина гораздо дольше. Наличие следа альбумина в моче собаки 19 также недопустимо в качестве причины разницы в токсичности кофеина у этой собаки, так как моча собаки 20 также содержала след альбумина. Щелочная реакция мочи вместе с тем фактом, что первая доза всего 60 мг кофеина на килограмм вызвала симптомы токсичности, предполагает наличие аномального состояния, которое, по всей вероятности, и стало причиной смерти этого подопытного при указанных условиях.

В большом количестве экспериментов с кофеином, проведенных в этой лаборатории, было замечено, что симптомы, вызванные кофеином, часто исчезали, когда введение той же дозы препарата продолжалось. Так, собаку 19 рвало, когда количество кофеина было увеличено до 125 мг на килограмм. Когда это количество повторили на следующий день, рвоты не было. Аналогичные наблюдения были сделаны на собаках 11 и 23, а также на других собаках. У № 22 сначала развилась диарея; однако, когда введение кофеина было возобновлено несколько дней спустя, диареи не было. В других экспериментах, проведенных в этой лаборатории, симптомы нервной раздражительности, вызванные кофеином, исчезали при продолжении лечения.

Поэтому было интересно узнать, увеличится ли устойчивость к кофеину при продолжении введения все больших количеств препарата. Когда скармливали дозы 150 и выше, интервалы обычно были длиннее 24 часов. Между двумя последовательными дозами разрешалось проходить двум, а иногда и трем дням. Это делалось для того, чтобы дать время для восстановления после возможных изменений, вызванных большими дозами кофеина, и тем самым предотвратить суммирование эффекта. Таким образом, в рассматриваемых экспериментах, №№ 11, 23, 20 и 19, токсичность кофеина, по-видимому, не выше, чем в экспериментах по острой интоксикации кофеином у собаки. Однако предполагалось, что большие начальные дозы или быстрый переход к большим дозам, когда количества, используемые в начале, были малы, могли иметь какое-то отношение к неудаче в достижении заметной степени толерантности. Поэтому эксперимент на собаке 21 был проведен путем введения от 40 до 60 мг на килограмм в течение восьми дней, а затем увеличения дозы, но толерантность не удалось вызвать, как показано в протоколе эксперимента.

Серия B.

Согласно исследованиям Читтендена (16), низкобелковая диета улучшает общий метаболизм организма, утомляемость уменьшается, а жизненная энергия, следовательно, соответственно увеличивается. Поэтому оправдано ожидание, что защита организма от вредных веществ, вводимых в тело, значительно улучшается при такой диете, тем самым повышая его устойчивость к ядам. Эксперимент Ханта на эту тему, также цитируемый Читтенденом, подтверждает этот взгляд. Он обнаружил, что мыши, которых кормили преимущественно углеводами или продуктами, содержащими лишь небольшое количество белка, были более устойчивы к ацетонитрилу. Поэтому было интересно узнать, отличается ли токсичность кофеина при аналогичных условиях диеты.

Для всех собак этой серии была предусмотрена фиксированная диета той же калорийности, но содержание белка для трех животных составляло примерно одну треть от количества, обычно скармливаемого собакам. Кофеин сначала вводили подкожно, но у всех собак на низкобелковой диете развились абсцессы в месте инъекции, в то время как ни у одной из собак на высокобелковой диете не наблюдалось местной реакции. Затем начали кормление через рот, которое в каждом случае продолжалось на протяжении всего эксперимента. Начальная доза составляла 50 мг на килограмм, которую давали ежедневно в течение семи-девяти дней. Затем ее постепенно увеличивали на 25 мг на килограмм; 75 мг на килограмм вводили в течение одного-двух дней, 100 мг — в течение двух-трех дней, 125 мг — в течение одного-двух дней, 150 мг — в течение одного-двух дней и однократную дозу 175 мг. Будет замечено, что иногда приходилось делать интервал в один день, в течение которого кофеин не скармливали.

Собака 30. Черно-подпалая гончая, самец.

Собака находилась под наблюдением около восьми недель до начала эксперимента и получала высокобелковую диету. Затем ей давали 50 мг кофеина в течение девяти дней подряд. На десятый день дозу увеличили до 75 мг на килограмм. Поскольку симптомы не развились, эту дозу увеличили до 100 мг на килограмм и скармливали через день. Затем ее повысили до 125 мг на килограмм. Впервые с момента начала скармливания препарата появились симптомы; они были замечены через несколько часов после кормления и сохранялись в течение следующего дня. Хотя аппетит был хорошим, в этот день кофеин не давали. На следующий день эту дозу повторили. Поскольку симптомы не были серьезными, 150 мг на килограмм давали ежедневно в течение следующих трех дней, пока не дошли до 175 мг на килограмм. Эта доза оказалась смертельной в течение шести часов. Ниже следует запись эксперимента:

9 октября: вес 9 кг, на полной азотной диете, получал ежедневно 0,724 грамма азота на килограмм или 87 калорий на килограмм, получал 18 граммов мяса на килограмм, 4 грамма сала на килограмм, 3 грамма углеводов на килограмм, костную муку вволю.

3 ноября: вес 9,10 кг.

November 10: Weight, 9 kilos.

20 ноября: вес 9,55 кг.

29 ноября: вес 8,70 кг.

6, 7, 8 и 9 декабря: получил подкожно 22 куб. см 2-процентного раствора кофеина. Состояние хорошее, место инъекции нормальное.

10, 11, 12, 13 и 14 декабря: получил 0,4375 грамма кофеина через рот, что равно 0,050 грамма на килограмм, симптомов нет, аппетит и общее состояние хорошие.

15 декабря: 11:30 утра, получил 0,6563 грамма кофеина через рот, или 0,75 грамма на килограмм, симптомов нет, аппетит хороший, состояние отличное.

16 декабря: 11 часов утра, получил 0,870 грамма кофеина через рот, или 0,1 грамма на килограмм, вес 8,70 кг, симптомов нет.

17 декабря: кофеин не давали.

18 декабря: получил 0,870 грамма кофеина, или 0,1 грамма на килограмм, симптомов нет.

20 декабря: 2:45 дня, получил 1,0875 грамма кофеина, или 0,125 на килограмм; 4 часа дня, ел пищу охотно, казался очень некомфортно и больным.

21 декабря: 9 часов утра, скованность в мышцах, но других симптомов нет, аппетит хороший, кофеин не давали.

22 декабря: 11 часов утра, получил 1,0875 грамма кофеина, или 0,125 грамма на килограмм; 3 часа дня, подавленное настроение и болен, но других симптомов не наблюдалось.

23 декабря: 11:30 утра, получил 1,305 грамма кофеина, или 0,150 грамма кофеина на килограмм; 1:30 дня, по-видимому, довольно болен, но других симптомов нет, аппетит хороший.

24 декабря: 10 часов утра, получил 0,175 грамма кофеина на килограмм; 4 часа дня, когда собирались кормить, упал и умер; вскрытия не было.

Общее количество кофеина, данное собаке 30, составило 11,3458 грамма, вводимых в течение восемнадцати дней. Среднее суточное количество на килограмм составило, таким образом, 72 мг. Фекалии стали зловонными, когда количества кофеина были увеличены до 75 мг на килограмм. Будет замечено, что у этой собаки аппетит был неизменно хорошим до дня смерти. Является ли это причиной ее устойчивости к кофеину, будет обсуждаться позже.

Собака 32. Белый, самец, молодой.

Хотя он быстро рос, вес этой собаки был постоянным, но выглядел он анемичным. Он получал высокобелковую диету до 3 декабря, когда рацион был увеличен на одну треть. Эта собака находилась под наблюдением с 26 октября по 6 декабря, когда было начато введение кофеина. Затем он получал 50 мг кофеина на килограмм ежедневно в течение девяти дней подряд, не проявляя никаких эффектов, после чего дозу увеличили до 75 мг на килограмм, затем до 100 мг на килограмм. Эту дозу далее увеличили до 150 мг на килограмм, не вызывая симптомов, что повторили на следующий день. Поскольку после таких количеств кофеина симптомов не наблюдалось, скормили 175 мг на килограмм. Эта доза, однако, оказалась смертельной в течение двух часов. Ниже следует запись эксперимента:

26 октября: вес 6,90 кг.

3 ноября: вес 6,90 кг.

10 ноября: вес 6,90 кг.

20 ноября: вес 6,90 кг.

29 ноября: вес 6,55 кг.

3 декабря: помещен в клетку, диета увеличена на одну треть.

6, 7, 8, 9 декабря: вес 6,30 кг; 12:30 дня, получил 16 куб. см 2-процентного раствора кофеина путем подкожной инъекции в спину, никаких симптомов какого-либо рода не замечено, место инъекции нормальное.

10, 14 декабря: 0,05 грамма кофеина на килограмм.

15 декабря: получил 0,4725 грамма кофеина через рот, симптомов нет.

16 декабря: получил 0,655 грамма кофеина, 0,100 грамма на килограмм.

17 декабря: кофеин не давали.

18 декабря: получил 0,655 грамма кофеина ежедневно, 0,100 грамма на килограмм, симптомов нет.

20 декабря: получил 0,8188 грамма кофеина, 0,125 грамма на килограмм, симптомов нет, аппетит хороший.

21 декабря: получил 0,9825 грамма кофеина, 0,150 грамма на килограмм, несколько некомфортно, других симптомов нет.

22 декабря: получил 0,9825 грамма кофеина, 0,150 грамма на килограмм, симптомов нет, кроме некоторого беспокойства.

23 декабря: 9 часов утра, симптомов нет, аппетит хороший; 11:30 утра, получил 1,146 грамма кофеина, 0,1759 грамма на килограмм; 1:30 дня, умер, пытаясь выбраться из клетки, перед смертью наблюдалось тоническое сокращение конечностей.

Количество кофеина, полученное за весь экспериментальный период, составило 9,2223 грамма, или в среднем около 80 мг на килограмм в день, и, следовательно, на 10 процентов больше, чем получила собака № 30. Будет замечено, что аппетит у собаки № 32 был также неизменно хорошим и что она получала очень высокобелковую диету, которая также была очень высокой калорийности.

Вскрытие (собака 32). — Желудок показал тяжелое воспаление слизистой оболочки, особенно в области дна и пилорических отделов. Гастрит был более выражен в пилорическом отделе, и воспалительное состояние распространялось вдоль всего хода тонкой кишки, которая показала многочисленные геморрагические участки и толстый катаральный экссудат на слизистой оболочке. Толстая кишка содержала довольно большое количество паразитов, вероятно, круглых червей. Печень была увеличена, а желчный пузырь хорошо наполнен. Селезенка была также значительно полнокровной, почки выглядели нормально, остальные органы все выглядели нормально.

Собака 31. Черный спаниель, самец.

Эта собака находилась под наблюдением один месяц до экспериментов с кофеином. Затем в течение девяти дней вводилась обычная начальная доза. При подкожном введении препарата признаков местного раздражения не было, но присутствовали симптомы токсичности. Они, однако, исчезли, когда препарат вводили через рот. Поэтому дозу увеличили до 75 мг на килограмм. Это, как будет видно, оказалось смертельным в течение шести часов. Высокоазотистая диета, такая же, как у № 30.

3 ноября: вес 10,250 кг.

10 ноября: вес 10,25 кг.

20 ноября: вес 10,30 кг.

1 декабря: помещен в клетку.

6, 7, 8, 9 декабря: вес 10,20 кг; получил 26 куб. см 2-процентного раствора кофеина подкожно, место инъекции нормальное.

6 декабря: очень беспокойный и возбужденный, скулил, когда его трогали, как будто мышцы болели, казался больным.

10–14 декабря: состояние хорошее, получал 0,51 грамма кофеина через рот ежедневно, примечательных симптомов нет, аппетит остается хорошим, временами несколько беспокоен.

15 декабря: 11:30 утра, получил 0,765 грамма кофеина через рот (0,075 грамма на килограмм); 2 часа дня, подавленное настроение, казался больным и некомфортно; 4:15 дня, когда собирались кормить, животное подпрыгнуло, а затем упало замертво.

Вскрытие (собака 31): легкие гиперемированы; сердце наполнено кровью и содержало небольшое количество окрашенной кровью жидкости в перикардиальном мешке. Печень глубоко гиперемирована, мягкая и дряблая; желчный пузырь растянут желчью; почки показали воспаление коры; селезенка бледная, нормального размера и консистенции; желудок практически пуст, слизистая оболочка пилорического отдела показала тяжелый гастрит с толстым катаральным экссудатом. Это катаральное воспаление распространялось через двенадцатиперстную кишку; оставшаяся часть тонкой кишки показала легкое воспаление; толстая кишка выглядела практически нормальной. Общее количество кофеина, полученное собакой 31 за 10 дней, составило 5,395 мг, или суточное среднее 53,9 мг на килограмм. Эта необычно низкая устойчивость к кофеину (что было практически единственным случаем во всех экспериментах на собаках, представленных в этом исследовании) предполагает наличие какого-то аномального состояния. Кровавый экссудат в перикардиальной полости, указывающий на перикардит, который, вероятно, вызывает вторичные изменения сердечной мышцы, может рассматриваться как возможная причина повышенной токсичности кофеина в этом случае.

Собака 29. Самец фокстерьера, черный.

Эту собаку держали на диете с низким содержанием азота почти пять недель, прежде чем начали давать кофеин. Затем в течение восьми дней вводили по 50 мг кофеина на килограмм массы тела, при этом никаких симптомов токсичности не наблюдалось. После этого дозу увеличили до обычного уровня — 75 мг на килограмм, что привело к проявлению симптомов. Однако дальнейшее увеличение до 100 мг на килограмм не дало видимого эффекта. Тем не менее было сочтено целесообразным приостановить введение кофеина на один день. Затем те же дозы повторяли в течение двух дней подряд. Поскольку симптомов не наблюдалось, ввели 125 мг на килограмм. Так как наблюдались симптомы токсичности, особенно потеря аппетита, на следующий день кофеин собаке не давали. Поскольку аппетит улучшился, эксперимент с более высокими дозами был возобновлен. Смерть наступила после второй дозы 150 мг на килограмм. Ниже приводится протокол:

Масса 9,90 кг. Диета с одной третью азота. Получает 0,269 г азота на килограмм (88,269 калории на килограмм).

3 ноября: масса 9,85 кг.

10 ноября: масса 9,55 кг.

12 ноября: масса 9,40 кг.

29 ноября: масса 9,85 кг.

6 декабря: масса 9,90 кг; 11:35, получено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина путем подкожной инъекции в спину; 16:00, симптомов нет, аппетит хороший.

7–9 декабря: получено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина — подкожная инъекция, симптомов нет, место инъекции воспалено и отечно.

10, 13 декабря: место инъекции показало усиление воспаления, ежедневно получал 0,495 г кофеина (50 мг на килограмм) с 30 г мяса без проявления каких-либо симптомов.

14 декабря: 12:00, получено 0,7425 г кофеина перорально (0,075 на килограмм); 14:30, беспокойство и тревога.

15 декабря: 11:30, получено 0,7425 г кофеина перорально; 14:00, подавленное состояние, хотя аппетит остается хорошим.

16 декабря: масса 9,50 кг; 15:15, получено 0,9509 г кофеина перорально; 16:50, симптомов нет.

17 декабря: животное отдыхало.

18 декабря: получено 0,950 г кофеина перорально, симптомов нет.

19 декабря: получено 0,9509 г кофеина перорально, симптомов нет.

20 декабря: 14:45, получено 1,1875 г кофеина (0,125 г на килограмм); 16:00, беспокойство и явное недомогание; съел лишь немного пищи.

21 декабря: 9:00, все еще чувствует себя некомфортно, оставлен отдыхать, кофеин не давали, аппетит постепенно восстановился.

22 декабря: 11:00, получено 1,875 г кофеина; 15:00, выглядел больным, но других симптомов не проявлял, аппетит удовлетворительный.

23 декабря: 9:00, симптомов после предыдущего дня не наблюдалось, пищу ел постепенно, выглядел больным; 11:30, получено 1,425 г кофеина (0,150 г на килограмм); 13:30, выглядел и вел себя как очень больной, других симптомов нет; 15:45, при попытке выбраться из ящика упал на спину, начались судороги, скулил, одышка, смерть в течение 30 секунд.

Вскрытие: желудок демонстрировал легкое воспаление; тонкая кишка воспалена, на слизистой оболочке геморрагические участки; печень полнокровная и дряблая; селезенка в норме; почки слегка гиперемированы; остальные органы выглядели нормально. Общее количество кофеина, скормленного собаке 29, составило 12,135 г, что было введено за 18 дней. Таким образом, среднее суточное количество на килограмм составило 67,68 мг.

Собака 28. Самец фокстерьера.

Диета с низким содержанием азота была начата примерно за четыре недели до начала кормления кофеином; затем в течение семи дней подряд скармливали по 50 мг кофеина. После первой дозы наблюдалась частичная потеря аппетита. По мере продолжения эксперимента желание есть неуклонно уменьшалось, а фекалии стали зловонными. Симптомы интоксикации проявились рано, а после четвертой дозы возникла рвота. Затем собаку перевели на диету, состоящую исключительно из мяса. После 10-дневного перерыва дали 109 мг кофеина на килограмм. Поскольку симптомов не было, на следующий день количество увеличили до 125 мг на килограмм. Эта доза оказалась смертельной в течение 16–20 часов.

Эта собака была крепкой и сильной, масса 12,25 кг, получала ежедневно 0,269 г азота на килограмм (88,269 калории на килограмм).

3 ноября: масса 11,75 кг.

10 ноября: масса 11,95 кг.

20 ноября: масса 11,20 кг. Весь этот период содержалась в холодном, плохо проветриваемом помещении, переведена в теплое помещение с подстилкой и хорошей вентиляцией.

29 ноября: масса 11,95 кг.

1 декабря: помещена в клетку; масса 11,95 кг.

6 декабря: масса 11,95 кг; 11:45, получено 0,050 г кофеина на килограмм; затем получено 30 см³ 2-процентного кофеина (0,6 г) практически одной подкожной инъекцией; 16:30, съел только часть пищи.

7 декабря: 10:25, получено 30 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции (0,6 г, или 50 мг, на килограмм); 13:45, казался чувствительным к прикосновениям, отсутствие желания есть, подавленное состояние.

8 декабря: 11:40, получено 30 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции (50 мг на килограмм); 13:00, подавленное состояние, задние ноги казались несколько скованными, отсутствие желания есть обычную пищу, место инъекции воспалено.

9 декабря: 10:50, получено 30 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции (50 мг на килограмм); 14:30, была рвота, отсутствие желания есть обычную пищу.

10 декабря: воспаление места инъекции и отек очень выражены; 14:00, получено 0,5975 г кофеина, или 50 мг на килограмм, с 30 г мяса, отказался от обычной пищи.

11, 12 декабря: получено 0,5975 г кофеина перорально, симптомов нет, кроме отказа от обычной пищи, фекалии зловонные.

13–22 декабря: переведен исключительно на мясную диету, высокая температура, кофеин не давали, масса 10 кг, аппетит хороший, фекалии зловонные.

22 декабря: 12:00, масса 11 кг, получено 1,2 г кофеина перорально (0,109 г на килограмм); 16:00, симптомов нет.

23 декабря: 11:30, получено 1,375 г кофеина (0,125 г на килограмм), была рвота пищей предыдущего дня, но в рвотных массах не удалось обнаружить кофеин или капсулы; 16:30, симптомов нет, казался в хорошем настроении, аппетит хороший, мяса для кормления не было, поэтому дали корм с низким содержанием азота, которого он съел около четверти.

24 декабря: 9:00, найден мертвым, окоченевшим и холодным. Наиболее поразительным эффектом кофеина у этой собаки является усиление кишечного гниения. Фекалии оставались зловонными еще 10 дней после прекращения введения кофеина.

Вскрытие, собака 28: желудок частично заполнен непереваренной пищевой массой; слизистая оболочка демонстрировала сильное воспаление; тонкие кишки представляли собой геморрагический энтерит на всем протяжении; толстая кишка также демонстрировала легкое воспаление; печень была полнокровной; селезенка выглядела нормально; почки слегка гиперемированы в корковом слое; остальные органы выглядели нормально.

Собака 24. Бело-рыжий самец: был переведен на диету с низким содержанием белка за шесть недель до начала экспериментов с кофеином. Затем в течение восьми дней подряд вводилась начальная доза 50 мг на килограмм. Единственными симптомами, наблюдавшимися в этот период введения кофеина, были симптомы кишечного гниения. Зловонные фекалии были замечены уже после первой инъекции кофеина. Когда вторая доза 75 мг кофеина была повторена, появились легкие симптомы, но даже при увеличении количества кофеина других симптомов не наблюдалось.

Диета с одной третью азота. Получал ежедневно 0,269 г азота на килограмм (88,269 калории на килограмм).

26 октября: масса 11,15 кг. Пища состояла из 5 г крекерной муки на килограмм; мяса, 3 г на килограмм; сала, 2 г на килограмм; тапиоки, 10,69 г на килограмм. Содержался в холодном, сыром помещении с плохой вентиляцией до 20 ноября.

November 3: Weight, 11 kilos.

10 ноября: масса 10,75 кг.

20 ноября: масса 10,55 кг; переведен в теплое помещение с подстилкой и хорошей вентиляцией.

29 ноября: масса 10,85 кг.

1 декабря: помещен в клетку.

6 декабря: масса 10,90 кг; 11:25, получено 28 см³ 2-процентного кофеина подкожно в бок, ниже лопаток, область промыта спиртом и эфиром, введено примерно 50 мг на килограмм, симптомов нет.

7 декабря: 10:15, получено 28 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции; фекалии мягкие и очень зловонные; 13:00, подавленное состояние, глаза тусклые.

9 декабря: 10:45, получено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина подкожно, фекалии все еще зловонные, место инъекции воспалено и отечно, других симптомов нет.

10 декабря: воспаление области инъекции более выражено; 14:00, дано 0,5449 г кофеина и 30 г мяса; 16:00, покормлен, симптомов нет, фекалии зловонные.

11 декабря: 12:00, дано 0,5459 г кофеина и 30 г мяса, симптомов нет, фекалии зловонные.

12, 13 декабря: давали по 0,5459 г кофеина ежедневно, не заметив никаких симптомов.

14 декабря: 12:00, получено 0,817 г кофеина (75 мг на килограмм); 14:30, беспокойство и дискомфорт, других симптомов нет.

15 декабря: 11:30, получено 0,8175 г кофеина перорально; 14:00, подавленное состояние, вел себя как больной, других симптомов нет.

December 16: Weight, 11 kilos; 11 a. m., received 0.100 gram caffein per kilo (1.100 grams) by mouth, no symptoms.

17 декабря: отдыхал.

18 декабря: 14:30, получено 1,100 г кофеина перорально; 16:00, симптомов нет.

19 декабря: 12:00, получено 1,100 г кофеина перорально; 16:15, симптомов нет.

20 декабря: 14:45, дано 1,375 г кофеина (0,125 г на килограмм); 15:45, рвота — одна из капсул найдена неповрежденной, другая вскрыта; 16:00, дана обычная диета, содержащая 1,3757 г кофеина в капсулах, съел большую часть этого за ночь, периодически скулил, координация нарушена, выглядел очень больным, но других симптомов не проявлял.

21 декабря: 9:00, найден мертвым, окоченевшим и холодным.

Общее количество кофеина, полученного собакой 24, составило от 10,109 до 11,484 г. Поскольку одна из капсул, вышедших при рвоте, была неповрежденной, а другая вскрытой, количество составило, вероятно, около 10,75 г. Смертельная доза в данном случае была, несомненно, менее 185 мг на килограмм — где-то между 125 и 185 мг. Вскрытие показало сердце в диастоле; задняя доля правого легкого глубоко гиперемирована; печень полнокровная; желчный пузырь наполнен; селезенка выглядела нормально; желудок хорошо заполнен полужидкой массой; пилорическая часть желудка демонстрировала сильное воспаление слизистой оболочки; слизистая оболочка двенадцатиперстной кишки сильно воспалена и имела геморрагические участки и катаральный экссудат; остальная часть тонкой кишки также демонстрировала легкое воспаление; почки глубоко гиперемированы, брыжейка инъецирована.

Сравнение смертельных доз кофеина в экспериментах на диете с высоким и низким содержанием белка не показывает большой разницы в устойчивости к кофеину, поскольку 175 мг на килограмм оказались смертельными для № 30 и 32, в то время как № 29 умер после получения 150 мг на килограмм, а № 24 получил от 125 до 185 мг на килограмм. Более того, № 28, который был переведен с диеты с низким содержанием белка на диету с высоким содержанием белка, погиб при получении 125 мг на килограмм. Однако наблюдения, сделанные в течение экспериментального периода, указывают на большую токсичность кофеина у субъектов на диете с низким содержанием белка. Собака 30 показала эффекты препарата, когда доза была увеличена до 125 мг кофеина на килограмм, в то время как у № 32 150 мг на килограмм были получены без какого-либо проявления симптомов. Собака 31, которая также была на диете с высоким содержанием белка, очевидно, является исключением, и ее низкая устойчивость к кофеину может быть объяснена состоянием, обнаруженным при вскрытии. У других собак на диете с низким содержанием белка симптомы интоксикации появлялись рано в ходе эксперимента. У № 29 и 24 это наблюдалось, как только количество кофеина увеличивалось до 75 мг на килограмм. У собаки 28 первая доза кофеина 50 мг на килограмм была токсичной. Симптомы желудочно-кишечного расстройства были особенно выражены после кофеина на диете с низким содержанием белка. Это может показаться противоречащим результатам экспериментов на собаках 11 и 20, в которых большие дозы кофеина не вызывали симптомов интоксикации. Но следует отметить, что диета, состоявшая почти исключительно из углеводов, давалась только во время введения кофеина, тогда как в экспериментах серии B субъекты получали диету с низким содержанием белка в течение нескольких недель до начала введения кофеина, и она продолжалась в течение всего периода введения кофеина. Будет отмечено, что отсутствие кумулятивного действия в экспериментах предыдущей серии наблюдалось также у собак как на диете с высоким, так и на диете с низким содержанием белка. Появление симптомов после меньших доз кофеина в последних экспериментах могло бы указывать на кумулятивное действие, но поскольку эти симптомы исчезали при продолжении введения вещества, кумуляция явно не показана. Желудочно-кишечные поражения, наблюдавшиеся при патологоанатомическом исследовании, были, как можно вспомнить, также обнаружены у кроликов, получавших аналогичное лечение. Предложенное объяснение, вероятно, применимо и в случае с собаками.

Серия C.

Как уже указывалось в экспериментах по острой токсичности кофеина, молодые растущие собаки, вероятно, более устойчивы к кофеину, чем взрослые. То, что это может быть справедливо и для хронической интоксикации кофеином, по-видимому, указывают следующие эксперименты.

Dog 33. Black female puppy. Weight, 4 kilos. Had been continuously on a meat diet.

22 декабря: 14:30, получено 0,69 г кофеина (0,172 г на килограмм); 15:15, симптомов нет, кроме того, что фекалии были зловонными.

23 декабря: 11:30, получено 0,79 г кофеина (0,197 г на килограмм); 13:30, симптомов нет.

24 декабря: 11:00, получено 0,87 г кофеина (0,2009 г на килограмм); 16:00, симптомов нет.

Будет замечено, что единственным эффектом, произведенным у собаки 33 кормлением кофеином, было усиление кишечного гниения, хотя за три дня было дано 2,37 г кофеина. Желательны были дополнительные данные о влиянии возраста животных на устойчивость к кофеину. Поэтому были проведены следующие эксперименты. Шесть щенков из одного помета были отняты от груди в возрасте 7–8 недель и переведены на молочную диету. Трое из них получали эту диету в течение всего экспериментального периода. Мясо было заменено у остальных трех за несколько дней до начала введения кофеина и продолжалось до конца эксперимента. Кофеин давали перорально; начальная доза, которая вводилась в течение нескольких дней, а затем постепенно увеличивалась, составляла 160–200 мг для каждой собаки, за исключением одной, которая получала только 100 мг на килограмм в течение нескольких дней, а затем увеличенное количество.

Был сделан перерыв на несколько дней (в течение которых кофеин не давали). Это было сделано из-за некоторых исследований, проводившихся в то же время по влиянию кофеина на определенные компоненты мочи.

PUP NO. 1.
Date. | Weight. | Food (milk). | Treatment (2 per cent caffein). | Symptoms.
| Grams. | cc. | cc. |
Apr. 21 | 1,450 | 300 | 10.0 | No symptoms.
Apr. 22 | 1,520 | 300 | 10.0 | Do,
Apr. 23 | 1,450 | 250 | 10.0 | Do,
Apr. 24 | 1,375 | 250 | 10.0 | Do,
Apr. 25 | 1,420 | 250 | 10.0 | Do,
Apr. 26 | 1,390 | 250 | None. |
Apr. 27 | 1,400 | 250 | None. |
Apr. 28 | 1,405 | 250 | None. |
Apr. 29 | 1,420 | 250 | None. | Passed worms.
Apr. 30 | 1,430 | 250 | None. | Do,
May 1 | 1,450 | 250 | 10.0 | No symptoms.
May 2 | 1,515 | 250 | 15.0 | Do,
May 3 | 1,475 | 250 | 15.0 | Do,
May 4 | 1,495 | 250 | 15.0 | Do,
May 5 | 1,515 | 250 | 22.0 | Seems dull and whines.
May 6 | 1,535 | 250 | 20.0 | Whines.
May 7 | 1,525 | 250 | 20.0 | No symptoms.
May 8 | 1,530 | 250 | 20.0 | Do,
May 9 | 1,500 | 250 | 23.0 | Diarrhea; passed worms; tremor and rigidity of legs; whines.
May 10 | 1,490 | 250 | None. | Completely recovered from the effects of 9th.
May 11 | 1,535 | 250 | 25.0 | Can not balance itself; continually vomiting.
May 12 | 1,460 | 300 | None. | Recovered from effects.
May 13 | 1,475 | 350 | None. | In good condition.
May 14 | 1,545 | 250 | None. |
May 15 | 1,550 | 250 | None. |
May 16 | 1,555 | 250 | None. |
May 17 | 1,560 | 250 | 25.0 | Salivated in cage; stiffness of muscles.
May 18 | 1,450 | 250 | None. | Weak and stiff; diarrhea.
May 19 | 1,500 | 250 | None. | No symptoms.
May 20 | 1,565 | 250 | None. |
May 21 | 1,545 | 250 | None. |
May 22 | ⁽¹⁾ | 250 | None. |
May 23 | 1,595 | 250 | 27.0 | Tremors; gait clumsy; incoordination of movements.
May 24 | 1,495 | 250 | 27.0 | Diarrhea; vomited; weak and stiff; found dead 9 a. m. 25th.

1 Воскресенье.

Вскрытие: выраженная легочная гиперемия; печень очень бледная; стенка сердца инъецирована; легкое воспаление желудка и кишечника.

PUP NO. 2.
Date. | Weight. | Food (milk). | Treatment (2 per cent caffein). | Symptoms.
| Grams. | cc. | cc. |
Apr. 21 | 1,350 | 300 | 5.0 | No symptoms.
Apr. 22 | 1,240 | 300 | 5.0 | Do,
Apr. 23 | 1,250 | 200 | 7.5 | Do,
Apr. 24 | 1,205 | 200 | 7.0 | Do,
Apr. 25 | 1,220 | 200 | 7.0 | Do,
Apr. 26 | 1,210 | 200 | None. |
Apr. 27 | 1,210 | 200 | None. |
Apr. 28 | 1,205 | 200 | None. |
Apr. 29 | 1,200 | 200 | None. | Passed worms.
Apr. 30 | 1,210 | 200 | None. |
May 1 | 1,220 | 200 | 10.0 | No symptoms.
May 2 | 1,220 | 200 | 10.0 | Do,
May 3 | 1,235 | 200 | 10.0 | Do,
May 4 | 1,235 | 200 | 10.0 | Do,
May 5 | 1,235 | 200 | 17.0 | Whines.
May 6 | 1,250 | 200 | 17.0 | Do,
May 7 | 1,235 | 200 | 15.0 | Diarrhea and worms.
May 8 | 1,250 | 200 | 15.0 | Diarrhea.
May 9 | 1,165 | 200 | 18.0 | Little or no symptoms.
May 10 | 1,235 | 200 | None. | No symptoms.
May 11 | 1,300 | 200 | 20.0 | Salivated in cage; refused to eat; draws up hind legs.
May 12 | 1,200 | 200 | None. | Recovered.
May 13 | 1,215 | 200 | None. | In good condition.
May 14 | 1,280 | 200 | None. |
May 15 | 1,300 | 200 | None. |
May 16 | 1,310 | 200 | None. |
May 17 | 1,310 | 200 | 20.0 | Salivated in cage; stiff; all symptoms.
May 18 | 1,250 | 200 | None. | Weak and stiff.
May 19 | 1,245 | 200 | None. | No symptoms.
May 20 | 1,310 | 200 | None. |
May 21 | 1,325 | 200 | None. |
May 22 | 1,325 | 200 | None. |
May 23 | 1,325 | 200 | 22.0 | Somewhat stiff.
May 24 | 1,315 | 200 | 22.0 | Restless; scratches eyes; sick.
PUP NO. 3.
Apr. 21 | 1,215 | 300 | None. |
Apr. 22 | 1,220 | 300 | None. |
Apr. 23 | 1,220 | 200 | None. |
Apr. 24 | 1,200 | 200 | None. |
Apr. 25 | 1,205 | 200 | None. |
Apr. 26 | 1,195 | 200 | None. |
Apr. 27 | 1,200 | 200 | ⁽¹⁾ |
Apr. 28 | 1,215 | 200 | None. |
Apr. 29 | 1,220 | 200 | None. |
Apr. 30 | 1,200 | 200 | None. |
May 1 | 1,225 | 200 | 10.0 | No symptoms.
May 2 | 1,230 | 200 | 10.0 | Do,
May 3 | 1,235 | 200 | 10.0 | Coughs and whines.
May 4 | 1,245 | 200 | 10.0 | Passed worms.
May 5 | 1,270 | 200 | 17.0 | Eyes appear dim and is continually scratching them.
May 6 | 1,260 | 200 | 17.0 | Appears restless and draws up hind legs when walking.
May 7 | 1,240 | 200 | 15.0 | Eyes dim; passed worms; diarrhea.
May 8 | 1,265 | 200 | 15.0 | Coughing continually; very restless.
May 9 | 1,240 | 200 | 18.0 | 12 noon; salivated in cage; passed worms; diarrhea; foaming at mouth; can not balance himself; rigidity and tremor of hind legs. 2.15, found dead.

1 Моча, выжатая из мочевого пузыря.

Вскрытие: сильная легочная гиперемия; катаральный гастрит; легкий энтерит с небольшими геморрагическими участками на слизистой оболочке.

PUP NO. 4.
Date. | Weight. | Food. | Treatment (2 per cent caffein). | Symptoms.
| Grams. | Milk cc. | cc. |
Apr. 28 | 1,670 | 300 |  |
Apr. 29 | 1,670 | 300 |  |
Apr. 30 | 1,670 | 300 |  |
May 1 | 1,690 | 300 |  |
May 2 | 1,690 | 300 |  |
May 3 |  | 300 |  |
May 4 | 1,720 | 300 |  |
May 5 | 1,735 | 300 |  |
|  | Meat |  |
|  | (grams). |  |
May 6 | 1,760 | 60 |  |
May 7 | 1,745 | 80 |  |
May 8 | 1,710 | 180 |  |
May 9 | 1,750 | 180 |  |
May 10 | 1,750 | 180 |  |
May 11 | 1,755 | 180 | 10.0 | No symptoms.
May 12 | 1,730 | 180 | None. |
May 13 | 1,785 | 180 | None. |
May 14 | 1,835 | 115 | 10.0 | Do,
May 15 | 1,820 | 115 | 10.0 | Do,
May 16 | 1,835 | 115 | 10.0 | Passed worms.
May 17 | 1,860 | 115 | 10.0 | Feces soft and black.
May 18 | 1,855 | 115 | 15.0 | Stiff; loss of appetite.
May 19 | 1,770 | 115 | 15.0 | Loss of appetite.
May 20 | 1,755 | 115 | 15.0 | Do.
May 21 | 1,780 | 115 | 17.0 | Restless.
May 22 |  | 115 | 17.0 | Feces soft and black.
May 23 | 1,785 | 115 | 17.0 | Loss of appetite.
May 24 | 1,795 | 115 |  | Loss of appetite; threw up worms.
May 25 | 1,630 | 115 | 20.0 | Loss of appetite; worms; cough; diarrhea.
May 26 | 1,600 | 115 | 23.0 | Weak; no appetite; diarrhea; cough.
May 27 |  |  |  | Found dead, 9 a. m.

Вскрытие. — Легкое равномерно гиперемировано; печень глубоко гиперемирована; сердечная мышца бледная с геморрагическими участками; почки бледные с геморрагическими пятнами на поверхности и в корковом слое; легкое катаральное воспаление желудка и тонких кишок.

PUP NO. 5.
Date. | Weight. | Food. | Treatment (2 per cent caffein). | Symptoms.
| Grams. | Milk cc. | cc. |
Apr. 28 | 1,745 | 300 |  |
Apr. 29 | 1,745 | 300 |  |
Apr. 30 | 1,750 | 300 |  |
May 1 | 1,765 | 300 |  |
May 2 | 1,765 | 300 |  |
May 3 |  | 300 |  |
May 4 | 1,490 | 300 |  |
May 5 | 1,805 | 300 |  |
|  | Meat |  |
|  | (grams). |  |
May 6 | 1,815 | 60 |  |
May 7 | 1,825 | 80 |  |
May 8 | 1,770 | 180 |  |
May 9 | 1,795 | 180 |  |
May 10 | 1,805 | 180 |  |
May 11 | 1,800 | 180 | 10.0 | No symptoms.
May 12 | 1,720 | 180 | None. |
May 13 | 1,815 | 180 | None. |
May 14 | 1,845 | 115 | 10.0 | Do,
May 15 | 1,830 | 115 | 10.0 | Do,
May 16 | 1,815 | 115 | 10.0 | Loss of weight; no other symptoms.
May 17 | 1,830 | 115 | 15.0 | No symptoms.
May 18 | 1,835 | 115 | 15.0 | Stiffness.
May 19 | 1,825 | 115 | 15.0 | No symptoms.
May 20 | 1,850 | 115 | 15.0 | A little stiff.
May 21 | 1,835 | 115 | 17.0 | No symptoms.
May 22 |  | 115 | 17.0 |
May 23 | 1,820 | 115 | 17.0 | Do.
May 24 | 1,835 | 115 | 20.0 | Do.
May 25 | 1,840 | 115 | 20.0 | Feces soft and black.
May 26 | 1,820 | 115 | 23.0 |
May 27 | 1,840 | 115 | 25.0 | A little stiff.
May 28 | 1,830 | 115 | 25.0 |
May 29 |  | 115 | None. |
May 30 |  | 115 | None. |
May 31 | 1,770 | 115 | None. |
June 1 | 1,765 | 115 | 25.0 | Diarrhea; stiff in hind legs.
June 2 | 1,750 | 115 | 27.5 | Diarrhea and worms.
June 3 | 1,635 |  | 27.5 | Paralyzed; vomited; died at 3 p. m.

PUP NO. 6.
Date. | Weight. | Food. | Treatment (2 per cent caffein). | Symptoms.
| Grams. | Milk cc. | cc. |
Apr. 28 |  | 300 |  |
Apr. 29 | 1,280 | 300 |  |
Apr. 30 | 1,290 | 300 |  |
May 1 | 1,315 | 300 |  |
May 2 | 1,330 | 300 |  |
May 3 |  | 300 |  |
May 4 | 1,360 | 300 |  |
May 5 | 1,365 | 300 |  |
|  | Meat |  |
|  | (grams). |  |
May 6 | 1,395 | 60 |  |
May 7 | 1,365 | 80 |  |
May 8 | 1,340 | 180 |  |
May 9 | 1,380 | 180 |  |
May 10 | 1,400 | 180 |  |
May 11 | 1,425 | 180 | 14.5 | No symptoms.
May 12 | 1,470 | 180 | None. |
May 13 | 1,485 | 180 | None. |
May 14 | 1,510 | 115 | 14.5 | Do,
May 15 | 1,500 | 115 | 14.5 | Do,
May 16 | 1,485 | 115 | 14.5 | Passed worms.
May 17 | 1,480 | 115 | 14.5 |
May 18 | 1,485 | 115 | 19.5 | Feces soft and black; almost diarrhea.
May 19 | 1,495 | 115 | 19.5 |
May 20 | 1,500 | 115 | 19.5 | Scratches her eyes and chases her tail.
May 21 | 1,500 | 115 | 17.0 |
May 22 |  | 115 | 17.0 |
May 23 | 1,470 | 115 | 17.0 |
May 24 | 1,465 | 115 | 20.0 |
May 25 | 1,450 | 115 | 20.0 | Feces soft and black.
May 26 | 1,450 | 115 | 23.0 | Diarrhea and worms.
May 27 | 1,355 | 115 | 23.0 | Refused to eat all food.
May 28 | 1,270 | 115 | 23.0 | Threw up worms, stiff, and has skin over both eyes.
May 29 |  |  |  | Found dead.

Highest amount of caffein given, 362 mg per kilo. No autopsy.

Изучение результатов, полученных в экспериментах серии C, показывает, что молодые и растущие собаки переносят большие количества кофеина. У четырех субъектов этой серии, № 1, 2, 3 и 6, никакого эффекта не наблюдалось при скармливании умеренно больших количеств (160–200 мг кофеина на килограмм). Симптомы были замечены только тогда, когда эти количества кофеина были увеличены на 50–60 процентов. Однако две другие собаки, № 4 и 5 этой серии, были менее устойчивы к кофеину, так как 0,16 г препарата на килограмм вызывали хорошо выраженные симптомы. Поскольку их кормили мясом, в то время как № 1, 2 и 3 получали молоко, разница в токсичности может быть обусловлена используемой диетой, но № 6, который также получал мясную диету, не проявил эффектов кофеина при скармливании 200 мг на килограмм. С другой стороны, следует заметить, что № 1 умер после получения 360 мг на килограмм, № 2 пережил дозу 334 мг, в то время как № 3 умер после дозы 322 мг кофеина на килограмм. Смертельные дозы для № 4, 5 и 6 составили соответственно 287, 335 и 300 мг на килограмм. Хотя различия слишком малы, чтобы оправдать какой-либо определенный вывод относительно влияния молочной или мясной диеты на токсичность кофеина, результаты тем не менее предполагают разумную возможность того, что кофеин более токсичен для молодых собак при исключительно мясной диете, чем при кормлении молоком. Однако совершенно очевидно, что устойчивость к кофеину в обоих случаях очень велика, почти вдвое выше, чем у взрослых субъектов. Как показано в сериях A и B, 125–175 мг на килограмм оказались смертельными для всех, кроме двух животных в этих экспериментах, в то время как симптомы токсичности появлялись после гораздо меньших доз. В других отношениях поведение молодых собак по отношению к кофеину было таким же, как у взрослых. Ни в одном случае при условиях этих экспериментов не наблюдалось ни кумуляции, ни толерантности. Результаты вскрытия были также схожими, так как гастроэнтерит был основным поражением, наблюдавшимся при макроскопическом исследовании. Однако в этой связи можно упомянуть, что симптомы интоксикации кофеином у молодых собак часто представляли заметные различия по сравнению с теми, что наблюдались у животных более старшего возраста. Сходство эффектов кофеина у молодых щенков и у кроликов было очень поразительным. У тех и у других тонические и клонические судороги наблюдались после введения достаточного количества кофеина. У полностью выросших собак большая доза кофеина обычно сопровождалась тоническими судорогами и почти мгновенной смертью.

Умеренно большие количества кофеина, скармливаемые щенкам ежедневно в течение нескольких дней — в некоторых случаях до 10 дней — вызывали только легкие симптомы. Ни в одном из экспериментов серии C не наблюдалось кумулятивного эффекта. По-видимому, существует толерантность определенных функций к кофеину, но общую толерантность организма в этих экспериментах получить не удалось. Кофеин, по-видимому, менее токсичен для взрослых собак на диете с высоким содержанием белка, чем на диете с низким содержанием белка. У молодых и растущих собак кофеин несколько менее токсичен, когда молоко, а не мясо, составляет исключительную диету. Некоторые патологические состояния, по-видимому, увеличивают токсичность кофеина также и у собак. Симптомы интоксикации кофеином, наблюдаемые у молодых собак, в некоторых отношениях отличаются от таковых у взрослых и более старых животных и напоминают те, что замечены у кроликов.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Во введении было достаточно подробно указано, что токсичность некоторых лекарственных средств может быть неодинаковой для всех форм жизни. Это наблюдение было также сделано некоторыми исследователями, которые экспериментировали с кофеином на различных видах животных. Так, Морель (55) заявил, что кофеин в два раза более токсичен для лягушки, чем для кролика при пероральном введении. Эксперименты Фрёнера (26), с другой стороны, проведенные на домашних животных, не показали больших различий в токсичности кофеина. Согласно этому наблюдателю, лошади кажутся более восприимчивыми, чем крупный рогатый скот, козы и свиньи, при этом минимальная токсическая доза одинакова для всех них, в то время как устойчивость собаки к кофеину находится примерно посередине между устойчивостью лошади и других упомянутых животных. Можно заметить, однако, что Фрёнер провел только 13 экспериментов. То, что эти данные неадекватны для формирования каких-либо выводов относительно токсичности кофеина, очевидно, поскольку наиболее поразительным эффектом кофеина, наблюдавшимся в работе, представленной здесь, был сравнительно широкий диапазон вариаций устойчивости особей одного и того же вида к этому препарату. Это оказалось так даже тогда, когда условия эксперимента были приблизительно одинаковыми, и наблюдалось независимо от используемого способа введения препарата. Токсичность для разных особей также варьировалась как при острой, так и при хронической интоксикации. Именно по этой причине количество использованных тестов часто было довольно большим, так как нельзя было сделать никаких ценных выводов без усреднения результатов достаточно большого числа экспериментов. Кроме того, следует иметь в виду, что действие препарата может различаться в зависимости от способа его введения в организм и что разные виды животных могут различаться в этом отношении. Это особенно верно для некоторых веществ при пероральном введении, диапазон токсичности для определенных видов животных гораздо больше при таком введении, чем при подкожной или внутривенной инъекции.

Исследования Мореля (56) представляют интерес в этой связи, так как его работа охватывает систематическое изучение токсичности большого числа веществ у кролика, голубя и лягушки при пероральном, подкожном, внутривенном введении или при инъекции в мышцы. Согласно этому исследователю, диапазон вариации токсичности вещества наиболее широк при пероральном введении. Сульфоцианид калия, например, примерно в 2,5 раза более токсичен для лягушки, чем для кролика при пероральном введении. Гидробромид хинина в три раза более токсичен для лягушки, чем для голубя, в то время как для кролика он в два раза более токсичен, чем для голубя. При подкожной инъекции токсическая доза на килограмм массы практически одинакова для всех трех видов. Разница в устойчивости в зависимости от способа введения еще более выражена для сульфата спартеина. При пероральном введении токсичность для кролика в шесть раз выше, чем для лягушки, но при подкожной инъекции токсическая доза примерно одинакова для кролика и для лягушки. Связь способа введения с токсичностью далее показана на следующих веществах: для кролика минимальная смертельная доза гидробромида хинина на килограмм составляет 1,5 г при пероральном введении, 0,5 г при подкожной инъекции и 0,07 г при внутривенном пути, в то время как сульфат стрихнина в два раза более токсичен при внутривенном введении, чем при подкожном, и в шесть раз более токсичен, чем при пероральном введении. Способ введения, однако, не всегда влияет на токсичность вещества. Это становится очевидным из действия стрихнина на лягушек, у которых, согласно Морелю (56), токсическая доза одинакова независимо от того, дается ли он перорально или вводится в подкожные ткани. Это, по-видимому, справедливо и для других животных, как продемонстрировали эксперименты Хэтчера (35) на кошках, в которых он наблюдал, что стрихнин так же легко всасывается из полного желудка, как и из подкожных тканей. Эти результаты чрезвычайно интересны, особенно в свете работы Мореля (57) по данному предмету, согласно которой он обнаружил, что вещество гораздо менее токсично при пероральном введении, чем при подкожной или внутривенной инъекции. То, что это обобщение, однако, не допускает универсального применения, становится очевидным из работы различных экспериментаторов. Клод Бернар (10) наблюдал, что кураре так же ядовито для голубя при пероральном введении, как и при подкожной инъекции, тогда как Залеский (86) обнаружил, что самандарин более токсичен для лягушек при введении в желудок, чем при инъекции в лимфатические мешки. Наши эксперименты с кофеином также показывают, что обобщение Мореля не всегда верно, поскольку в экспериментах с серыми кроликами было обнаружено, что минимальная смертельная доза лишь умеренно выше при пероральном введении, чем при подкожном пути.

Столь же интересно наблюдение автора, что у морской свинки разница в токсичности между подкожной и внутрибрюшинной инъекциями очень незначительна, в то время как у кошки токсичность кофеина одинакова независимо от того, дается ли он перорально или вводится в подкожные ткани, и заметно меньше при инъекции в брюшную полость. Эксперименты на собаках показывают значительную вариацию эффективной дозы при пероральном введении, но было сделано интересное наблюдение, что токсическая доза при пероральном введении может быть в некоторых случаях меньше, чем средняя доза при подкожной инъекции. Если сравнить устойчивость к кофеину при подкожной инъекции у различных видов животных, использованных в настоящем исследовании, то будет замечено, что серый кролик или бельгийский заяц, который более устойчив, чем другие использованные разновидности, переносит больше кофеина по отношению к массе тела, чем другие животные.

Хотя минимальная смертельная доза оказалась несколько больше для морской свинки, чем для серого кролика при внутрибрюшинной инъекции кофеина, она, напротив, была меньше при других путях введения и довольно близко приближалась к минимальной смертельной дозе для кроликов других разновидностей. Кошки, как и собаки, оказались значительно менее устойчивыми к кофеину, чем травоядные.

Существует ряд факторов, гораздо более важных, чем зоологические различия, которые влияют на токсичность кофеина. Некоторые из них — возраст, сезон и патологические состояния. Поскольку эти факторы уже были рассмотрены в соответствующих местах, дальнейшее обсуждение может показаться излишним, но из-за их важности в определении действия препарата желателен акцент. Особенно это касается патологических состояний в отношении токсичности. Хотя положительного доказательства сниженной устойчивости к кофеину при патологических состояниях путем подвергания этого предположения экспериментальной проверке получено не было, в этих экспериментах на кроликах наблюдалось, что смерть наступала у некоторых особей после малых доз, которые обычно даже не являются токсичными. Результаты вскрытия указывают на наличие патологических состояний. То же самое наблюдалось в некоторых экспериментах на кошках и собаках. Поэтому чрезвычайно вероятно, что болезнь изменяет реакцию организма на кофеин, так же как и на другие лекарственные средства.

То, что устойчивость к лекарственным средствам может варьироваться в зависимости от возраста субъекта, утверждалось рядом фармакологов. Согласно Гинару (30), молодые собаки, кролики и морские свинки очень восприимчивы к морфину, напоминая в этом отношении детей. Минимальная смертельная доза для этих животных примерно на одну треть меньше, чем для взрослых. Это, однако, неверно для молодых особей других видов. Кошки в возрасте до 15 дней переносят двойную токсическую дозу морфина для взрослой кошки. Молодые бычки и козы также более устойчивы к этому алкалоиду, чем взрослые. С другой стороны, согласно Ливону (54), молодые морские свинки более чувствительны к алкалоидам, чем взрослые. Токсичность кофеина, как показано в настоящем исследовании, оказалась меньше у молодых, чем у взрослых. У собак молодые субъекты в некоторых случаях почти вдвое устойчивее, чем взрослые. Разница оказалась меньше у кошек и кроликов, чем у собак, но она была довольно заметной.

Влияние сезона на токсичность лекарственных средств обсуждалось в разделе об экспериментах на морских свинках, которые были более устойчивы к кофеину осенью, чем в феврале и марте. Влияние сезона, по-видимому, варьируется в зависимости от животного, но оно может также отличаться в зависимости от используемого вещества. В исследованиях Ноэ (65) по этому предмету было обнаружено, что кантаридин более токсичен для ежа в ноябре, чем в июле. Влияние сезона было иным для морфина, так как было замечено, что устойчивость ежа была выше в конце лета, чем раньше в сезоне.

Связь диеты с токсичностью лекарственных средств изучалась Хантом (39). Его эксперименты указывают на то, что это важный фактор в устойчивости к ацетонитрилу. Исследования, представленные здесь, о влиянии диеты на токсичность кофеина у кроликов ограничивались экспериментами с овсом и морковью и не показывают какого-либо изменения устойчивости к кофеину. Вопрос о диете при хронической интоксикации у собак, однако, предполагает, что у этих животных диета может влиять на токсичность кофеина, хотя данные по этому предмету далеки от удовлетворительных. Тем не менее, существует достаточно доказательств, чтобы предположить, что диета с высоким содержанием белка для взрослой собаки способствует большей устойчивости животного к кофеину, и аналогично растущая собака переносит большие количества кофеина на молочной диете, чем на диете из мяса.

Это подводит нас к рассмотрению поведения кофеина при хронической интоксикации. Хотя как у кроликов, так и у собак отсутствие кумуляции было очевидным, в других отношениях наблюдались решительные различия в устойчивости к кофеину. В то время как кролик переносит более чем двойную разовую дозу кофеина на килограмм для собаки, результат совершенно иной при повторном дозировании препарата, при этом кролик погибает от продолжения введения гораздо меньших доз препарата, чем собака. Это, вероятно, связано с поражениями желудочно-кишечного канала, вызванными кофеином, что вызывает потерю аппетита гораздо легче у кролика, чем у собаки. Обильный энергетический резерв у собаки позволяет этому животному переносить голодание гораздо дольше, чем кролику и другим травоядным. Разница в поведении кролика и собаки по отношению к кофеину интересна тем, что показывает полное изменение устойчивости при острой и хронической интоксикации. Из заявления во введении очевидно, что размер разовой токсической или смертельной дозы вещества никоим образом не является показателем активной степени его токсичности. Эксперименты с кофеином, представленные здесь, дают дополнительные доказательства того, что это верно, по крайней мере для кролика.

ОБЩЕЕ РЕЗЮМЕ И ВЫВОДЫ.

Токсичность кофеина у кролика варьируется в зависимости от способа его введения, будучи наименьшей при пероральном введении и наибольшей при внутривенном введении. Токсичность на 15–20 процентов выше при подкожных инъекциях, чем при пероральном введении, но составляет около половины таковой при инъекции в брюшную полость. Разницы в токсичности кофеина при введении в ягодичные или в поясничные мышцы не наблюдалось. При введении этим путем токсичность оказалась на одну треть меньше, чем при инъекции в брюшную полость, но примерно на 30 процентов более токсична, чем подкожные инъекции. Белые или черные кролики оказались менее устойчивыми к кофеину, чем серые кролики.

Устойчивость морской свинки к кофеину, как и кролика, наибольшая при пероральном введении. Минимальная смертельная доза меньше при внутрибрюшинных инъекциях, но больше, чем при подкожных инъекциях, таким образом отличаясь от кролика в этом отношении. Взрослая кошка менее устойчива к кофеину, чем морская свинка или кролик. Минимальная смертельная доза при пероральном введении такая же, как при подкожной, и меньше, чем при внутрибрюшинной инъекции. Минимальная смертельная доза для собак оказалась такой же при пероральном введении, как при подкожной инъекции, и почти такая же, как для кошки. Токсичность кофеина варьируется у морской свинки в зависимости от времени года.

Возраст также является фактором токсичности кофеина, молодые животные более устойчивы, чем полностью выросшие и более старые животные; это было показано в экспериментах на кроликах, кошках и собаках. Симптомы отравления кофеином также были разными у щенков и у полностью выросших собак. Различные диеты, такие как морковь и овес, не влияли на устойчивость кроликов и морских свинок к кофеину. Диета с низким содержанием белка имеет тенденцию к снижению устойчивости к кофеину у собак. Молодые растущие собаки менее устойчивы к кофеину на мясной, чем на молочной диете. Кофеин не является кумулятивным у кролика или собаки, даже если вводится в течение значительного времени. Некоторая степень толерантности может быть вызвана у кролика при определенных условиях, но не у собак при условиях экспериментов, проведенных в этом исследовании. Возможность того, что собаки могут приобрести толерантность к кофеину, однако, не исключена. Хотя кролик переносит гораздо большую разовую дозу кофеина, чем собака, было обнаружено в экспериментах по хронической интоксикации, что кролик менее устойчив к кофеину, чем собака. Токсичность кофеина, вероятно, увеличивается при патологических состояниях, поскольку сравнительно меньшие дозы были смертельными для кроликов, кошек и собак, когда при вскрытии обнаруживались выраженные поражения, не вызванные кофеином. Глюкозурия наблюдалась у кроликов, морских свинок и кошек, когда кофеин давался в достаточных количествах.

Таблица 18. — Острая интоксикация кофеином: таблица, показывающая средние минимальные токсические и минимальные смертельные дозы для взрослых животных.

Заголовки таблицы:

SC: подкожно. BM: перорально. IP: внутрибрюшинно. IM: внутримышечно. IV: внутривенно.

Animal. | Effect of dose. | Dose per kilo (grams)
SC. | BM. | IP. | IM. | IV.
Rabbit, gray | {Toxic | 0.15 | 0.325 | 0.100-0.125 | 0.13-0.15 | 0.05
| {Fatal | .30  | .350 | .150 | .20 | 0.10- .16
Rabbit, white or black | {Toxic |  |  |  |  |
| {Fatal | .20 | .290 |  |  |
Guinea pig | {Toxic | 0.15- .16 | .150 | .200 |  |
| {Fatal | .20- .24 | 0.280- .300 | .240- .250 |  |
Cat | {Toxic | .12- .14 | .125 | .125- .150 |  |
| {Fatal | .15 | .150 | .180- .200 |  |
Dog | {Toxic |  | .100- .120 |  |  |
| {Fatal | .15- .16 | .140- .150 |  |  |

Примечание. — Дозы, приведенные в этой таблице, являются приблизительными.

БИБЛИОГРАФИЯ ПО КОФЕИНУ.

1. Abderhalden and Brahm. Zts. Physiol. Chem., 1909, 62: 133.

2. Albers. Deut. Klin., 1852, 5: 577.

3. Amat. Diss. Париж, 1889.

4. Amory. Boston Med. Surg. J., 1868, 1: 261.

5. von Anrep. Arch. Ges. Phys., 1880, 21: 185.

6. Aubert. Pflüger's Arch., 1872, 5: 589.

7. Auer and Meltzer. J. Pharm. Exper. Ther., 1911, 2: 402.

8. Baldi. Terapia Moderna, 1891, 5: 617.

9. Bennett. Brit. Med. J., 1874, 2: 674.

10. Бернар, Клод. Leçons sur les substances toxiques, Париж, 1857, стр. 292.

11. Binz. Arch. Exper. Path. Pharm., 1878, 9: 31.

12. —— Ibid., 1891, 28: 197.

13. Brill. Diss. Марбург, 1861.

14. Buchheim and Eisenmenger. Beitr. Anat. Physiol., 1870, 5: 115.

15. Bunge and Schmiedeberg. Arch. Exper. Path. Pharm., 1876, 6: 233.

16. Читтенден. The Nutrition of Man, 1907.

17. Cogswell. Lancet (London), 1852, 2: 488.

18. Danilewski. Arch. Exper. Path. Pharm., 1894, 35: 105.

19. Drzewina. Compt. rend. Soc. biol., 1911, 70: 772.

20. Dumas and Pelletier. Ann. chim. phys., 1823, 24: 182.

21. Edmunds. J. Amer. Med. Assoc., 1907, 48: 1744.

22. Филене. Arch. Phys., 1886, стр. 72.

23. Fleischer and Loeb. Archives of Internal Medicine, 1909, 3: 78.

24. Focke. Arch. Pharm., 1903, 241: 678.

25. Frerichs. Handwörterbuch Phys., 1846, 3: 721.

26. Fröhner. Monats. prakt. Tierh., 1892, 3: 529.

27. Gentilhomme. Bull. Soc. Med. Reims, 1867, 5: 93.

28. Gourewitch. Arch. Exper. Path. Pharm., 1907, 57: 314.

29. Guinard. Compt. rend. Soc. biol., 1900, 2 (2d ser.): 727.

30. ——. Compt. rend., 1893, 113: 520.

31. ——. La Morphine et l'apomorphine, Париж, 1903.

32. Gunn. Arch. Int. Pharm. Ther., 1909, 19: 319.

33. Хейл. U. S. Public Health and Marine-Hospital Service. Hyg. Lab. Bul. 53, стр. 43.

34. Harrington. Amer. J. Phys., 1898, 1: 385.

35. Hatcher. J. Amer. Med. Assoc., 1910, 60: 746.

36. Эннеги. Diss. Монпелье, 1875.

37. Hofmeister. Arch. Exper. Path. Pharm., 1894, 33: 198.

38. Хоппе. Écho Méd. Невшатель, 1858.

39. Хант. U. S. Public Health and Marine-Hospital Service. Hyg. Lab. Bul. 69, стр. 51.

40. ——. Там же, Bul. 33.

41. Igersheimer and Stami. Arch. Exper. Path. Pharm., 1909, 61: 18.

42. Якоби и Головинский. Arch. Exper. Path. Pharm., Supplement Bd. 1908, стр. 286.

43. Jobst. Ann. Pharm., 1838, 25: 63.

44. Йохансен. Diss. Дерпт, 1869.

45. Kobert. Lehrbuch der Intoxicationen, 1902, 1: 24.

46. Köster. Arch. Gesamt. Phys., 1910, 136: 17.

47. Krüger and Schmidt. Ber. d. chem. Ges., 1899, 32: 2677.

48. Kurzak. Zts. Aerzte zu Wien, 1860, n. f., 3: 625.

49. Lapicque. Compt. rend. Soc. biol., 1910, 68: 1007.

50. Леблон. Diss. Париж, 1883.

51. Lehmann, C. G. Lehrbuch für physiolische Chemie, 1842, 1: 336.

52. Lehmann, J. Ann. chim. pharm., 1853, 87: 205.

53. Leven. Arch. Phys., 1868, 1: 180.

54. Livon. Compt. rend. Soc. biol., 1897, 4: 979.

55. Maurel. Compt. rend. Soc. biol., 1907, 62: 897.

56. ——. Ibid., 1909, 66: 782.

57. ——. Ibid., 1910, 69: 5.

58. Meltzer and Auer. J. Exper. Med., 1905, 7: 59.

59. Mitchell. J. Phys., 1862, 5: 109.

60. Митчерлих. Diss. Берлин, 1859.

61. Moschkowitsch. Arch. Pharm., 1903, 241: 358.

62. Mulder. J. prakt. Chem., 1838, 15: 280.

63. ——. Poggendorff's Ann. Physik Chem., 1838, 43: 180.

64. Neubauer. Arch. Exper. Path. Pharm., 1901, 46: 133.

65. Noe. Arch. Int. Pharm. Ther., 1904, 12: 160.

66. Ophüls. Proc. Soc. exper. biol. med., 1911, 8: 75.

67. Oudry. Nouvelle Bibliothek Médicale, 1827; Geiger's Magazin Pharm., 1827, 19: 49.

68. Паризо. Diss. Париж, 1890.

69. Pelletier. J. Pharm., 1826, 12: 229; also quoted by Brill, 3.

70. Перетти. Diss. Бонн, 1875.

71. Pfaff. Schweigger-Seidel, 1831, 1: 87.

72. Pfaff and Liebig. Ann. Pharm., 1832, 1: 17.

73. Поль. Arch. Exper. Path. Pharm., Suppl. Bd., 1908, стр. 427.

74. Pratt. Boston Med. Surg. J., 1868, 2: 82.

75. Robiquet. Dict. Tech., Paris, 1823, 4: 59.

76. Рост. Diss. Гейдельберг, 1895.

77. Рунге. Neuste phyto-chem. Entdeckungen, Бреслау, 1820.

78. Салант. U. S. Dept. Agr., Bureau of Chemistry Cir. 81.

79. Schmiedeberg and Bunge. Arch. Exper. Path. Pharm., 1874, 2: 62.

80. ——. Ibid., 1910, 62: 296.

81. Sollman and Brown. J. Amer. Med. Assoc., 1905, 45: 229.

82. Strecker. Ann. Chem. Pharm., 1861, 118: 151.

83. Stuhlmann and Falck. Arch. path. Anat. Phys., 1857, 11: 324.

84. Thierfelder and von Mering. Zts. physiol. Chem., 1885, 9: 511.

85. Фойт. Untersuch. über den Einfluss des Kochsalzes, des Kaffes... Мюнхен, 1860.

86. Залеский. Hoppe-Seyler Med. Chem. Untersuch., Берлин, 1866, 85–116.

СНОСКИ:

[A] Малые цифры относятся к библиографии в конце этого бюллетеня.

[B] Пережил первую дозу.

[C] Время инъекции непреднамеренно пропущено, но, вероятно, было не медленнее, чем в других случаях этой серии.

[D] Кошка, вероятно, старая; находилась в лаборатории в течение нескольких недель до эксперимента. Прибавила в массе 175 г.

[E] Случай случайного отравления, о котором недавно сообщил Вихура (Münich. Med. Woch., 1911, № 30, стр. 1618), ставит под сомнение принятый взгляд на то, что восприимчивость маленьких детей к морфину выше, чем у взрослых. Вихура также обнаружил, что терапевтические дозы препаратов кодеина, обычно рекомендуемые детям при плевритическом кашле, неэффективны при этом состоянии.

Примечания транскриптора

Очевидные опечатки были исправлены, но варианты написания, пунктуации и дефисов были сохранены.

Кролик 396. Дата 15 августа была исправлена на 19 августа.

Данные для кролика 123 представлены так, как они напечатаны в оригинале, хотя вероятно, что значения кофеина на килограмм должны предваряться десятичной запятой (или что заголовок должен быть «мг»).

Стандартные сноски обозначены в алфавитном порядке. Цифровые ссылки в тексте относятся к библиографии.

Заголовки таблицы 18 были сокращены для ясности на небольших экранах.